李 利， 李澤健

（1.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)理工學(xué)院，河北滄州061100；2.河北省黃驊市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，河北黃驊061100）

鯉魚隸屬于鯉科，又稱為鯉拐子，是我國魚類養(yǎng)殖中常見品種之一，該品種具有生長速度快、易存活、易捕撈、肉質(zhì)鮮美、含肉率高等多種優(yōu)點(diǎn)，在我國大部分地區(qū)的養(yǎng)殖環(huán)境和方式下都可以飼養(yǎng)（鐘小群，2018）。隨著漁業(yè)養(yǎng)殖發(fā)展，臨床中抗生素在漁業(yè)養(yǎng)殖過程中的不合理使用，出現(xiàn)嚴(yán)重弊端，由于抗生素的不合理使用導(dǎo)致魚類抗應(yīng)激能力和抗病力下降，其死亡率增加，給魚、蝦等水產(chǎn)品的質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重的危害，同時(shí)給魚類的養(yǎng)殖造成嚴(yán)重影響（郭振，2019；楊雨生，2018；姜光麗，2015）。相關(guān)研究表明，益生菌中富含多種營養(yǎng)物質(zhì)及多種消化酶類，可以抑制腸道中有害菌的生長，促進(jìn)有益菌生長，調(diào)整其腸道內(nèi)菌群平衡，益生菌中富含多種消化酶類可以促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)消化與吸收，因而提高飼料轉(zhuǎn)化率及動物的生長性能和生產(chǎn)性能，所含的生物活性物質(zhì)可以刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)，誘導(dǎo)產(chǎn)生其體液免疫和細(xì)胞免疫，益生菌制劑同時(shí)具有無污染、無耐藥性的優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中（陳柯源，2019；褚素喬，2019；何佳，2017）。臨床中以酵母菌類、乳酸菌類、腸球菌類、芽孢桿菌類等較為常見，乳酸菌類廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中，但在魚類養(yǎng)殖中很少見（劉政，2020）。本試驗(yàn)以乳酸菌為研究對象，以不同的比例添加在鯉魚基礎(chǔ)餌料中，研究其對鯉魚生長性能、魚體組成及腸道酶活性的影響，為進(jìn)一步臨床應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 乳酸菌制劑活菌含量≥100萬cf u/g；消化道酶活性試劑盒（蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶），購自南京建成生物工程研究所；全自動凱氏定氮儀（FOSS KT260型），購自瑞士FOSS公司；氧彈測熱儀 （Parr 1281型），購自美國PARR公司。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與管理 采用單因素設(shè)計(jì)試驗(yàn)，選擇初始體質(zhì)量為（26.5±0.5）g、健康的鯉魚幼苗240尾，隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20尾，1組為空白對照組飼喂基礎(chǔ)餌料，試驗(yàn)2、3、4組在基礎(chǔ)餌料中分別添加0.2%、0.4%、0.8%乳酸菌制劑，試驗(yàn)期為60 d，在試驗(yàn)期間，以每個(gè)重復(fù)組為一個(gè)單位，單獨(dú)給料網(wǎng)箱（規(guī)格為1.0 m×1.0 m×1.5 m）飼養(yǎng)，每天投喂3次，試驗(yàn)期間平均水溫25.0～35.0℃，溶氧5.0～8.5 mg/L，pH 7.0～7.5。基礎(chǔ)餌料根據(jù)NRC（2008）魚飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制，其成分組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成與營養(yǎng)水平 %

1.3 生長性能指標(biāo)的測定 以重復(fù)組為單位對試驗(yàn)鯉魚逐條稱重，記錄其試驗(yàn)開始、結(jié)束的體重、餌料消耗量及剩余量，參考孫樹奎（2020）和李少覲（2019）報(bào)道的方法，計(jì)算鯉魚的生長性能指標(biāo)增重率、存活率、餌料系數(shù)等。

1.4 魚體組成的測定 試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)組隨機(jī)抽取5尾魚，將魚體稱質(zhì)量后置于培養(yǎng)皿中，在105℃的烘箱中烘至恒質(zhì)量，測定魚體組成成分。按照鐘小群（2018）報(bào)道方法對水分含量、蛋白質(zhì)含量、脂肪含量、灰分含量、能量水平進(jìn)行測定。

1.5 腸道消化酶活性的測定 試驗(yàn)結(jié)束后，每個(gè)重復(fù)組隨機(jī)抽取5尾魚稱重放血處死后取腸道樣品，在冰浴條件下勻漿，制成10%的勻漿液，離心后取上清液。按照試劑盒說明書測定其蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性。

1.6 數(shù)據(jù)處理分析 試驗(yàn)結(jié)果用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，以每個(gè)重復(fù)為單位進(jìn)行單因素多重比較，分析其差異顯著性，用P＜0.05表示差異顯著性。

2 結(jié)果

2.1 飼糧中添加乳酸菌對鯉魚生長性能的影響由表2可知，試驗(yàn)2、3、4組鯉魚的增重率、存活率均高于1組，但是未達(dá)到差異性顯著水平（P＞0.05），試驗(yàn)2、3、4組鯉魚的特定生長率均高于1組，試驗(yàn)2組高于1組，但差異性不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組鯉魚的特定生長率較1組比提高10.7%、10.1%，差異性顯著（P＜0.05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)2、3、4組鯉魚的餌料系數(shù)均低于1組，試驗(yàn)2組鯉魚的餌料系數(shù)低于1組，差異性不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組鯉魚餌料系數(shù)較1組比分別降低12.2%、10.7%，差異性顯著（P＜0.05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）。

表2 乳酸菌對鯉魚生長性能指標(biāo)的檢測結(jié)果

2.2 飼糧中添加乳酸菌對鯉魚魚體組成的影響由表3可知，試驗(yàn)2、3、4組鯉魚的水分含量、脂肪含量、灰分含量均高于1組，差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)2、3、4組鯉魚的蛋白質(zhì)含量、能量水平均高于1組，其中試驗(yàn)2組高于1組，差異性不顯著（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組鯉魚的蛋白質(zhì)含量、能量水平較1組比分別提高34.0%、33.7%、24.0%、23.2%，差異性顯著（P＜0.05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）。

表3 乳酸菌對鯉魚魚體組成的檢測結(jié)果

2.3 飼糧中添加乳酸菌對鯉魚腸道酶活性的影響 由表4可知，試驗(yàn)2、3、4組鯉魚的淀粉酶活性均高于1組，差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)2、3、4組鯉魚的蛋白酶活性、脂肪酶活性高于1組，其中試驗(yàn)2組高于1組，差異性不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)3、4組的蛋白酶活性、脂肪酶活性較1組比分別提高17.9%、17.8%、21.8%、25.8%，差異性顯著（P＜0.05），試驗(yàn)2、3、4組之間相比，差異性不顯著（P＞0.05）。

表4 乳酸菌對鯉魚腸道酶活性的檢測結(jié)果

3 討論

研究表明，益生菌制劑中因含有蛋白質(zhì)、氨基酸及多種消化酶類，可以促進(jìn)飼料中營養(yǎng)物質(zhì)在動物體內(nèi)的利用率，提高其生長性能，而被廣泛應(yīng)用（周金影，2020；韓戰(zhàn)強(qiáng)，2020）。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)2、3、4組的增重率、存活率均高于1組（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組的特定生長率顯著高于1組（P＜0.05），餌料系數(shù)顯著低于1組（P＜0.05）；試驗(yàn)2、3、4組的水分含量、脂肪含量、灰分含量均高于1組（P＞0.05），試驗(yàn)3、4組的蛋白質(zhì)含量、能量水平顯著高于1組（P＜0.05），說明乳酸菌制劑的添加對鯉魚生長性能和魚體組成有一定促進(jìn)作用。由于乳酸菌制劑所含活性物質(zhì)通過胃腸黏膜的吸收，可以刺激胃腸黏膜分泌多種消化酶，體內(nèi)消化酶的分泌可以將飼料中營養(yǎng)物質(zhì)直接降解為易吸收的小分子蛋白、小肽和氨基酸等物質(zhì)，因而促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的消化與吸收，同時(shí)提高其飼料的營養(yǎng)價(jià)值和營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，改善其魚體組織組成，同時(shí)增加其鯉魚的食欲，降低餌料系數(shù)。從而改善機(jī)體的生長性能，改善其魚體組成。

魚類對食物消化與吸收主要靠腸道消化酶進(jìn)行化學(xué)性消化，消化酶在消化過程中起著關(guān)鍵性作用，因此，魚類腸道消化酶活性可以在一定程度上反映其消化能力（周金影，2020；李晉南，2020；馬德英，2019；何英霞，2019）。本試驗(yàn)研究表明，試驗(yàn)2、3、4組的淀粉酶活性均高于1組（P＞0.05）；試驗(yàn)3、4組的蛋白酶活性、脂肪酶活性顯著高于1組（P＜0.05），說明乳酸菌制劑的添加可以提高魚類消化酶的活性。其原因可能由于乳酸菌制劑的添加可抑制腸道內(nèi)致病菌的生長，促進(jìn)有益菌生長，調(diào)節(jié)魚腸道內(nèi)致病菌和益生菌的平衡，有效改善魚的消化道微生態(tài)環(huán)境平衡，同時(shí)益生菌內(nèi)所含的生物活性物質(zhì)可以刺激消化道黏膜，促進(jìn)消化酶分泌，因而提高其腸道內(nèi)蛋白酶活性、脂肪酶活性，進(jìn)而提高其飼料中營養(yǎng)物質(zhì)的消化率。益生菌在動物腸道定植后，其在增殖過程中可以向腸道分泌一定的酶類，增加其腸道內(nèi)酶的含量，對腸道內(nèi)源性酶進(jìn)行一定補(bǔ)充，從而提高機(jī)體的腸道消化酶活性。其作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

不同水平乳酸菌制劑的添加可以提高鯉魚生長性能和腸道酶活性，改善魚體組成，本試驗(yàn)條件下，以0.4%添加較適宜。