胡秀榮 蒲占湑 黃振東 杜丹超 呂 佳 劉順民 鹿連明

（浙江省柑橘研究所 臺州 318026）

亞洲柑橘木虱（Diaphorinacitri Kuwayama）簡稱柑橘木虱，屬于半翅目（Hemiptera）木虱科（Psyllidae），是柑橘黃龍?。℉uanglongbing，HLB）的媒介昆蟲［1］。柑橘黃龍病是全球柑橘生產(chǎn)上最具毀滅性的病害之一，由于目前防治柑橘黃龍病的有效藥劑尚未發(fā)現(xiàn)，因此防控柑橘木虱是控制柑橘黃龍病傳播的重要措施［2］。

當(dāng)前防控柑橘木虱主要依靠化學(xué)殺蟲劑，眾所周知，化學(xué)殺蟲劑帶來的農(nóng)藥殘留、環(huán)境污染和害蟲抗藥性越來越嚴(yán)重，國家近幾年也在大力提倡農(nóng)業(yè)綠色生產(chǎn)和減肥減藥等重要舉措，因而開發(fā)對環(huán)境友好、對人畜安全和不引起害蟲抗藥性的生物農(nóng)藥勢在必行。本實(shí)驗(yàn)室經(jīng)長期研究，從柑橘木虱蟲體分離獲得一株蟲生真菌，其編號為ZJPL08，通過該菌株的形態(tài)特征、培養(yǎng)特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析，將菌ZJPL08鑒定為淡紫紫孢菌（Paecilomyces lilacinus），該菌是一種常見昆蟲病原真菌，在自然界分布廣泛，對人、畜安全，不會造成環(huán)境污染，更不會引起害蟲抗藥性，具有開發(fā)為生物農(nóng)藥的潛力。本研究將ZJPL08菌株經(jīng)培養(yǎng)制成孢子懸浮液用于柑橘木虱若蟲的防治，另選用 2種植物源殺蟲劑和 4種化學(xué)殺蟲劑進(jìn)行對照。

從目前文獻(xiàn)來看，防治木虱藥劑的篩選試驗(yàn)大多是針對木虱成蟲，很少有針對木虱若蟲的，這是由于木虱若蟲體型較小，在田間憑肉眼很難觀察計數(shù)，本實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過長期試驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)一種新的方法，可以比較準(zhǔn)確的篩選木虱若蟲有效藥劑，本實(shí)驗(yàn)主要針對1～ 5齡木虱若蟲的藥劑進(jìn)行篩選，為生產(chǎn)中更高效更安全防治柑橘木虱提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx

柑橘木虱若蟲為浙江省柑橘研究所植保室玻璃溫室大棚內(nèi)飼養(yǎng)，寄主為市售 3～ 4年的枸櫞盆栽苗，常年飼養(yǎng)。

1.2 供試藥劑

真菌殺蟲劑，ZJPL08孢子懸浮液（自制）；植物源殺蟲劑， 0.5%藜蘆堿可溶液劑（成都新朝陽作物科學(xué)股份有限公司）；植物源農(nóng)藥，懷農(nóng)特高效植物油助劑（原產(chǎn)地：美國ORO AGRI公司，分裝企業(yè)：浙江天一農(nóng)化有限公司）； 1.5%精高效氯氟氰菊酯微囊懸浮劑（美國富美實(shí)公司）；10%溴氰蟲酰胺可分散油懸浮劑（美國富美實(shí)公司）；25%呋蟲胺可濕性粉劑（江蘇省鹽城利民農(nóng)化有限公司）；50%氟啶蟲胺腈水分散粒劑（美國陶氏益農(nóng)公司）。

1.3 試驗(yàn)方法

ZJPL08孢子懸浮液制備：將保存的蟲生真菌ZJPL08接種到PDA培養(yǎng)基上，置于25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)14 d以上，待菌落表面變成深紫色后以無菌水洗脫菌落上的分生孢子，制備成孢子懸浮液，并加入終濃度為0.1%的吐溫80，采用血球計數(shù)板計算孢子懸浮液的濃度，以無菌水進(jìn)行稀釋，獲得濃度為108spores/mL孢子懸浮液，再依次稀釋孢子濃度為107spores/mL和106spores/mL孢子懸浮液。

剪取帶有木虱若蟲的香櫞枝條，去掉成蟲和卵保留若蟲，插入裝有10ml水培營養(yǎng)液的離心管中，離心管底部固定在邊長 8cm正方形珍珠棉上，珍珠棉正下方鋪上一張白紙，然后用無菌噴霧器向香櫞枝條噴灑藥液（噴霧需保證均勻一致），再套上 5 L的透明塑料瓶（該塑料瓶兩端開口，一端為80目紗網(wǎng)），防止木虱若蟲羽化后逃逸，然后置于溫度26℃人工氣候箱中。試驗(yàn)每個處理 3個重復(fù)，以清水做對照。 7 d后在體視顯微鏡下調(diào)查死亡頭數(shù)和存活頭數(shù)，計算死亡率，并統(tǒng)計對照死亡率，最后計算校正死亡率。

表1 7種殺蟲劑對柑橘木虱若蟲殺效果

2 結(jié)果與分析

試驗(yàn)結(jié)果見下表，從表中看出，真菌殺蟲劑ZJPL08孢子懸浮液對木虱防治效果顯著，隨著孢子濃度的升高，柑橘木虱若蟲死亡率逐漸升高，在濃度108spores/mL時，木虱若蟲死亡率達(dá)到92%。植物源殺蟲劑 0.5%藜蘆堿500倍時 7 d后死亡率達(dá)到100%,效果較理想，1000倍時死亡率92.86%,2000倍效果不理想，建議使用500～1000倍。懷農(nóng)特高效植物油助劑對柑橘木虱若蟲有一定的殺蟲效果，濃度100～200倍時，死亡率大約在60%左右。選用的 4種化學(xué)殺蟲劑均屬于低毒或微毒農(nóng)藥，每個農(nóng)藥設(shè)置 3個濃度，無論低濃度還是高濃度在 7 d死亡率均到達(dá)100%，表現(xiàn)較為理想。另外本次試驗(yàn)中清水對照組沒有發(fā)現(xiàn)若蟲死亡，因此處理組死亡率不需要校正。

3 討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，選用的 7種殺蟲劑中ZJ-PL08孢子懸浮液殺蟲效果顯著，濃度108spores/mL時，木虱若蟲死亡率到達(dá)90%以上，雖然與其他 4種化學(xué)殺蟲劑效果存在較小差異，但是ZJPL08孢子懸浮液作為一種真菌殺蟲劑，對環(huán)境非常友好，不存在環(huán)境污染和害蟲抗藥行的問題，因而可以考慮進(jìn)一步開發(fā)利用。藜蘆堿(Veratrine)殺蟲劑是以天然植物藜蘆為原料，采取生物生化法炮制而成的植物源農(nóng)藥，是新一代高效、低毒、廣譜殺蟲劑。在本次試驗(yàn)中藜蘆堿500倍 7 d對木虱若蟲死亡率達(dá)到100%,因此可以推薦使用柑橘木虱若蟲的防治。懷農(nóng)特高效植物油助劑是用橙皮通過專業(yè)的冷壓技術(shù)收集的天然產(chǎn)物，微毒無殘留，可用作常規(guī)農(nóng)藥產(chǎn)品和葉面肥的桶混劑，提高噴霧藥液在作物表面的附著、濕潤、展布、傳導(dǎo)以及滲透性，促進(jìn)作物對農(nóng)藥和葉面肥的吸收利用，且產(chǎn)品本身具有較好的殺蟲殺菌功效，該藥在在本次試驗(yàn)中對柑橘木虱若蟲有一定的殺蟲效果，200倍濃度時，木虱若蟲死亡率在60%左右，可考慮與其他殺蟲劑混用，以提高防治效果。

1.5 %精高效氯氟氰菊酯CS、10%溴氰蟲酰胺OD、25%呋蟲胺WP和50%氟啶蟲胺腈WG 4種化學(xué)殺蟲劑對柑橘木虱若蟲效果均較理想， 7 d后死亡率均達(dá)到100%，本文作者在以前試驗(yàn)中做過 8種殺蟲劑對柑橘木虱成蟲的室內(nèi)效果測定［3］，其中 1.5%精高效氯氟氰菊酯CS、25%呋蟲胺WP和50%氟啶蟲胺腈WG 3種藥劑在上次的室內(nèi)試驗(yàn)中表現(xiàn)較好，在 7 d后死亡率均達(dá)到100%，說明無論木虱若蟲還是成蟲對選用 3種化學(xué)殺蟲劑都較敏感，在低劑量低濃度的情況下也容易導(dǎo)致柑橘木虱的死亡。

另外由于柑橘木虱若蟲體型較小，必須體視顯微鏡下才能觀察清楚，在觀察過程中低齡若蟲很多靜止不動，無法確定死活，故需要借助挑針翻開若蟲蟲體觀察腳是否在動，從而確定蟲體的死亡或存活，如果在噴藥后24 h或者48 h就進(jìn)行調(diào)查，翻動蟲體有可能會導(dǎo)致木虱若蟲意外受傷或死亡，為了保證試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，故選擇 7 d后統(tǒng)一調(diào)查。