張向超，李小珍

食管癌(esophageal cancer，EC)是我國發(fā)生率較高的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率分居第六位和第四位[1]。EC的發(fā)生是一個(gè)復(fù)雜的、多因素的過程，其發(fā)生可能與環(huán)境、飲食、吸煙、遺傳等因素有關(guān)，但具體病因仍不清楚[2]。醌氧化還原酶1(quinone oxidoreductase 1,NQO1)是一種黃素酶，可以充當(dāng)輔酶Q的還原酶，催化醌雙電子還原反應(yīng)，防止細(xì)胞膜被氧自由基破壞，具有較強(qiáng)的抗氧化作用[3]。NQO1作為重要的化學(xué)致癌物代謝酶與食管癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌和前列腺癌等腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)[4-6]，這可能與NQO1活力降低有關(guān)，而NQO1基因C609T多態(tài)性可以導(dǎo)致其編碼蛋白質(zhì)上第187位脯氨酸/絲氨酸的轉(zhuǎn)變，從而使其活性下降或消失，進(jìn)而導(dǎo)致相關(guān)腫瘤的發(fā)生。故本研究對NQO1基因C609T(rs1800566，Pro187Ser)多態(tài)性與EC發(fā)生易感性關(guān)系的相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析，探討兩者之間的關(guān)系，為下一步研究方向或臨床決策提供科學(xué)依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 文獻(xiàn)檢索途經(jīng)和策略由兩位檢索人員獨(dú)立檢索NQO1基因C609T多態(tài)性與EC發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系的相關(guān)文獻(xiàn)，檢索的期刊數(shù)據(jù)庫為中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)庫、維普資訊、PubMed和Medline。其中中文主題詞或關(guān)鍵詞為：醌氧化還原酶或NQO、基因、多態(tài)性、食管癌。英文主題詞或關(guān)鍵詞為：quinone oxidoreductase or NQO，gene，polymorphism or variant，esophageal cancer。檢索日期自建庫至2021年1月25日，檢索語種為中文和英文。

1.2 文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)①病例-對照研究；②病例組食管癌診斷明確；③病例組和對照組的各基因型數(shù)據(jù)能夠有效的計(jì)算OR和95%CI；④對照組的基因型分布滿足Hardy-weinberg平衡(Hardy-Weinberg equilibrium, HWE)；⑤以紐卡斯?fàn)?渥太華量表(Newcastle-Ottawa Scale，NOS)評價(jià)文獻(xiàn)，文獻(xiàn)質(zhì)量評分需≥5分。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法通過OR值和95%CI評價(jià)NQO1基因C609T多態(tài)性與EC發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)關(guān)系的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度，共包括5種基因型模型：純合子模型(TT VS CC)、雜合子模型(CT VS CC)、顯性模型(TT+CT VS CC)、隱性模型(TT VS CT+CC)和直接比較基因頻率(T VS C)。數(shù)據(jù)的合并采用Review Manager 5.3軟件進(jìn)行，對照組HWE的評估采用χ2檢驗(yàn)，異質(zhì)性的評估采用Q檢驗(yàn)。其中，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，若P≥0.05，表示對照組的基因分布符合HWE，采用固定效應(yīng)模型合并數(shù)據(jù)，否則，表示對照組的基因分布不符合HWE，采用隨機(jī)效應(yīng)模型合并數(shù)據(jù)。應(yīng)用漏斗圖評估發(fā)表性偏倚。

2 結(jié)果

2.1 納入文獻(xiàn)的基本情況經(jīng)過文獻(xiàn)檢索，去除重復(fù)文獻(xiàn)后共檢索到17篇文獻(xiàn)(具體情況見圖1、表1)，其中有2篇文獻(xiàn)對照組的基因型分布不符合HWE，將其剔除，最終納入研究的文獻(xiàn)共15篇，包括16個(gè)病例-對照研究，其中EC患者3 186例，對照組4 075例。

圖1 文獻(xiàn)檢索流程圖

2.2 Meta分析結(jié)果根據(jù)異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果選擇不同的效應(yīng)模型合并OR值，Meta分析結(jié)果顯示，在整體人群中，NQO1基因C609T純合子模型(TT VS CC)、顯性模型(TT+CT VS CC)和等位基因模型(T VS C)與EC有關(guān)，其他模型與EC均無關(guān)。根據(jù)地域人種的不同進(jìn)行亞組分析，結(jié)果顯示，在亞洲人群中NQO1基因C609T純合子模型(TT VS CC)、雜合子模型(CT VS CC)、顯性模型(TT+CT VS CC)和等位基因模型(T VS C)與EC有關(guān)，而隱性模型(TT VS CT+CC)與EC無關(guān)；在高加索人群中NQO1基因C609T各基因模型與EC均無關(guān)。具體結(jié)果見表2。

表2 NQO1基因C609T各基因模型的異質(zhì)性檢驗(yàn)結(jié)果及Meta分析結(jié)果

CI：confidence interval；df：degrees of freedom；M-H：Mantel-Haenszel method。

2.3 發(fā)表性偏倚與敏感度分析漏斗圖中各點(diǎn)分布基本對稱(見圖3)，說明無明顯的發(fā)表性偏倚。在敏感度分析過程，依次剔除每一組病例-對照研究后重新合并OR值，各模型剔除前后的結(jié)果并不一致，說明目前所得結(jié)果并不穩(wěn)定。

OR：odds ratio；SE：standard error。

3 討論

NQO1又稱為D-硫辛酰胺脫氫酶，其基因位于人類染色體16q22.1上，共包括6個(gè)外顯子和5個(gè)內(nèi)含子[24]。在NQO1基因中發(fā)現(xiàn)了多種多態(tài)性，如C465T、G406C和C609T，其中NQO1基因C609T位于第六外顯子，等位基因C/T的轉(zhuǎn)變可以導(dǎo)致蛋白質(zhì)序列中第187位氨基酸由脯氨酸變?yōu)榻z氨酸，其中由CC純合基因型編碼的NQO1蛋白質(zhì)具有完整的酶促活性，由TT基因型編碼的蛋白質(zhì)活性消失，由CT雜合子基因型編碼的蛋白質(zhì)活性降低。NQO1蛋白質(zhì)是一種多功能的抗氧化劑，在細(xì)胞的抗氧化應(yīng)激中起到重要的保護(hù)作用，而NQO1蛋白質(zhì)活性的降低可能與腫瘤的發(fā)生有關(guān)[25-26]。既往已有很多關(guān)于NQO1基因C609T多態(tài)性與EC發(fā)病相關(guān)性的研究，但是各研究間的結(jié)果并不一致。因此，通過研究NQO1基因C609T各基因模型與EC之間的關(guān)系，為將來進(jìn)行有效的EC防治提供重要的理論基礎(chǔ)，進(jìn)而降低EC的發(fā)生率。

本Meta分析共包括16個(gè)病例-對照研究，其中EC患者3 186例，對照組4 075例。Meta分析結(jié)果顯示：在總體人群，NQO1基因C609T純合子模型(TT VS CC)、顯性模型(TT+CT VS CC)和等位基因模型(T VS C)與EC易感性有關(guān)；亞組分析顯示，在亞洲人群，除了隱性模型(TT VS CT+CC)外，NQO1基因C609T其余各模型均與EC有關(guān)，而在高加索人群NQO1基因C609T各模型均與EC無關(guān)。同時(shí)，漏斗圖未檢測出顯著的發(fā)表性偏倚，而敏感度分析過程顯示目前所得的結(jié)果并不穩(wěn)定，原因可能是有限的研究也使得按種族劃分的亞組分析的結(jié)果不太可靠。此外，遺傳背景和所居住環(huán)境的差異可能會影響NQO1基因C609T多態(tài)性與EC風(fēng)險(xiǎn)之間的關(guān)聯(lián)。因此，本結(jié)果應(yīng)謹(jǐn)慎解釋。值得注意的是，與既往Meta分析相比，本文通過增大樣本容量，同時(shí)剔除對照組基因型分布不符合HWE的病例-對照研究，使得結(jié)果更加可信。但是，進(jìn)一步深入的研究仍有一定的必要性?？傊?，本研究表明NQO1基因C609T多態(tài)性與EC易感性有關(guān)，可作為進(jìn)一步研究的基礎(chǔ)，以期為EC早期診斷、篩查、治療和預(yù)后評估提供新思路和手段。

本研究的優(yōu)越性和局限性：①與單項(xiàng)研究相比，本文通過增加樣本量而增加了統(tǒng)計(jì)學(xué)效能，使研究結(jié)果更加可靠；②在Meta分析之前制定完善的研究方案，盡量減少可能的偏倚；③本研究顯示，充分了解NQO1基因單核苷酸多態(tài)性的作用可能為檢測早期EC提供有希望的方法，而針對NQO1基因靶點(diǎn)所研究的藥物有望未來在治療EC中發(fā)揮一定的作用，為治療EC提供了新的研究思路；④盡管使用了適當(dāng)?shù)臋z索策略來檢索文獻(xiàn)，但本文納入的研究僅為中文和英文文獻(xiàn)，仍有少數(shù)符合條件的文獻(xiàn)未包含在內(nèi)，存在一定的發(fā)表性偏倚；⑤本Meta分析未考慮混雜因素，如年齡、性別、環(huán)境等，所得結(jié)果可能存在一定的片面性。