李水霞，張 毅,王秀蓮，許 樂，白雪瑞,姚寶燕，呂云瑞

(包頭醫(yī)學(xué)院第二附屬醫(yī)院，內(nèi)蒙古包頭 014030)

慢性阻塞性肺病(簡稱COPD)在世界范圍內(nèi)備受關(guān)注，因為其高患病率、高發(fā)病率和高死亡率給衛(wèi)生保健系統(tǒng)帶來了巨大挑戰(zhàn)。我國的高吸煙率和空氣污染等其他因素，使COPD在21世紀(jì)繼續(xù)成為一個日益嚴(yán)重的問題。目前COPD的發(fā)病機制還沒有被完全了解。本課題研究的目的是探討CD34+細胞在慢性阻塞性肺病急性加重期(AECOPD)中的變化，及其變化是否與內(nèi)皮功能(VEGF)改變有關(guān)，進一步探討COPD中內(nèi)皮細胞的作用?，F(xiàn)報告如下。

1 對象與方法

1.1觀察對象 2016年10～2017年10月在包醫(yī)二附院呼吸科住院的COPD患者35例，COPD的診斷標(biāo)準(zhǔn)均符合人民衛(wèi)生出飯社第八版《內(nèi)科學(xué)》，選擇所有AECOPD患者的標(biāo)準(zhǔn)是至少在入選前3個月接受了吸入布地奈德、噻托溴銨、福莫特羅的治療。AECOPD患者的排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有細菌性肺炎，急性肺血栓栓塞，急性心腦血管疾病，腎功能不全，肝臟疾病，自身免疫疾病，任何來源的癌癥和/或所需的機械通氣的所有患者。

穩(wěn)定期COPD(n=35)的患者從本院門診患者中選取，在納入研究之前的12周內(nèi)未急性加重或治療未變化而定義的臨床穩(wěn)定期。在研究期間均未接受全身性類固醇藥物，并且未患有神經(jīng)肌肉病變、風(fēng)濕病和/或不穩(wěn)定的心血管或腦血管疾病，無吸煙史。

1.2方法 取四支 TruCOUNT 管，三支為對照管，一支為測定管，作好標(biāo)記后各加入抗凝血50 μL，測定管中加入CD34-PE，CD45-PerCP各10 μL，對照管中加入IgG1-PE，CD45-PerCP各10 μL，混合均勻，室溫下避光反應(yīng)15 min。紅細胞裂解劑450 μL分別加入四支試管中，混合均勻后，室溫下避光反應(yīng)15分鐘后流式細胞儀進行分析。

流式細胞儀分析樣本數(shù)據(jù)：用BD公司生產(chǎn)的流式細胞儀，以熒光校準(zhǔn)微球，自動校準(zhǔn)軟件設(shè)置儀器狀態(tài)，之后進入ProCOUNT自動分析軟件，對流式管和測定管進行檢測，選取60 000個以上的有核細胞作為有意義的信號，取得數(shù)據(jù)文件，自動分析其結(jié)果，測出CD34+細胞的絕對計數(shù)值，為了確保結(jié)果的準(zhǔn)確性，以上步驟在24 h內(nèi)完成。

使用市售試劑盒(BioSource，比利時)通過ELISA測定血漿VEGF的水平。 平均值用于分析。

2 結(jié)果

AECOPD患者的CD34+細胞水平顯著高于COPD穩(wěn)定期的患者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在AECOPD期間，外周血中CD34+細胞水平與VEGF水平呈正相關(guān)(P<0.05)。

表1 各組研究對象的血液變量的平均值

3 討論

慢性阻塞性肺病(COPD)是一種常見的慢性疾病，進展緩慢，其特征是阻塞性通氣功能障礙，這種病理過程很少可逆，通常與吸煙有關(guān)，并可導(dǎo)致慢性呼吸衰竭。而CD34 + 細胞水平在COPD中的變化以及在AECOPD(急性加重期)中數(shù)量的變化越來越引起很多國內(nèi)外學(xué)者的重視。AsaharaT和 PalangeP等發(fā)現(xiàn)COPD患者循環(huán)內(nèi)皮祖細胞水平減少[1-3]，Shintani S和Heeschen C等[4-6]發(fā)現(xiàn)COPD患者循環(huán)內(nèi)皮祖細胞增加。分析其不同結(jié)果的原因：(1)用于定義和分析COPD患者研究中循環(huán)內(nèi)皮祖細胞的標(biāo)記物不同，可能會顯著影響結(jié)果。本研究選用CD34+來標(biāo)志內(nèi)皮祖細胞。(2)以前研究中包含的健康對照受試者的吸煙狀況不匹配，這可能會顯著影響循環(huán)內(nèi)皮祖細胞數(shù)量。(3)不同的方法來量化內(nèi)皮祖細胞的表型細胞可能會影響細胞的數(shù)量。本研究發(fā)現(xiàn)與年齡，性別和吸煙狀況相匹配的對照組相比，急性期COPD患者的循環(huán)祖細胞數(shù)量明顯增高，并且循環(huán)CD34+細胞水平與VEGF水平呈正相關(guān)，表明AECOPD患者的CD34+細胞水平的升高，可能與VEGF的增高有關(guān)。

總之，我們發(fā)現(xiàn)，CD34+細胞水平在AECOPD患者中顯著高于對照組，而且循環(huán)CD34+細胞水平與VEGF水平呈正相關(guān)，AECOPD患者的CD34+細胞水平的升高，可能與VEGF的增高有關(guān)。