吳雙， 董海榮

(1.呼和浩特市第一醫(yī)院 皮膚科, 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050； 2.呼和浩特市第一醫(yī)院 科教科, 內(nèi)蒙古 呼和浩特 010050)

程序性細(xì)胞凋亡1(programmedcelldeath-1,PDCD1)與自身免疫、感染及腫瘤等疾病高度相關(guān)的基因，如在淋巴瘤、腦脊髓炎及系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)等疾病中都發(fā)揮著重要作用[1]。PDCD1基因表達(dá)使PDCD1分子通過其胞漿區(qū)的2個(gè)酪氨酸殘基與下游的信號(hào)分子作用而發(fā)揮對(duì)免疫應(yīng)答的負(fù)性調(diào)控作用，在免疫反應(yīng)的起始部位和效應(yīng)部位雙重抑制免疫反應(yīng)，可防止過度的免疫損傷及自身免疫性疾病的發(fā)生[2]。在PDCD1基因缺失的小鼠會(huì)出現(xiàn)類似SLE的癥狀，臨床將SLE的神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)歸納為中樞神經(jīng)、周圍神經(jīng)及精神癥狀3個(gè)方面，當(dāng)SLE導(dǎo)致健康狀況出現(xiàn)問題時(shí), 就會(huì)出現(xiàn)輕度的社會(huì)心理障礙包括焦慮和抑郁[2]。有研究報(bào)道，PDCD1基因低表達(dá)可能與神經(jīng)系統(tǒng)損傷有關(guān)，而且SLE患者往往有嚴(yán)重的心理障礙，常表現(xiàn)為焦慮、抑郁等[3]，目前SLE患者PDCD1基因表達(dá)是否與焦慮情緒相關(guān)未見報(bào)道。本研究通過探討SLE患者PDCD1基因表達(dá)與焦慮情緒的相關(guān)性，為緩解患者的焦慮情緒提供科學(xué)依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

隨機(jī)選取2018年1月1日—2021年1月1日收治的SLE患者100例。納入的所有對(duì)象為成年人，未患有其他免疫缺陷??；未患有交感性眼炎、強(qiáng)直性脊柱炎、乙型肝炎等可能與PDCD1基因表達(dá)有關(guān)的疾??；未患有疼痛疾病，如痛風(fēng)急性期等；未患有嚴(yán)重精神疾病，如精神分裂癥、狂躁癥等。所有研究對(duì)象均知曉本研究且同意參加調(diào)查。排除突然發(fā)生嚴(yán)重疾病的患者。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1外周血PDCD1 mRNA的表達(dá)水平[4]采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR (quantitative real-time PCR，qPCR)檢測(cè)，受試者于入院時(shí)抽取外周血5 mL，EDTA.2K抗凝，采用TRIzol法提取血液中的總RNA，利用primer 5.0進(jìn)行引物設(shè)計(jì)，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，反應(yīng)體系為10 μL，反應(yīng)條件為37 ℃ 15 min，85 ℃ 5 s；然后以cDNA為模板，采用SYBR Premix Ex Taq Ⅱ進(jìn)行qPCR，反應(yīng)體系為20 μL；反應(yīng)條件為在95 ℃預(yù)變性30 s，95 ℃變性5 s、60 ℃退火30 s，共40個(gè)循環(huán)；以GAPDH為內(nèi)參，采用2-ΔΔCt法表示PDCD1 mRNA的表達(dá)水平。qPCR試劑盒購(gòu)自日本TaKaRa公司。

1.2.2焦慮評(píng)估方法[5]采用焦慮自評(píng)量表(SAS)評(píng)分評(píng)估患者的焦慮狀態(tài)，該量表共有20個(gè)條目，每個(gè)條目滿分4分，最低1分，總條目粗分滿分80分，粗分乘于1.25得到標(biāo)準(zhǔn)分；標(biāo)準(zhǔn)分低于50分為正常、50～59分為輕度焦慮、60～69分為中度焦慮、≥70分為重度焦慮，≥50分為處于焦慮狀態(tài)。

1.3 觀察指標(biāo)

比較PDCD1低表達(dá)與PDCD1高表達(dá)患者焦慮的發(fā)生情況，比較無焦慮、輕度焦慮、中度焦慮以及重度焦慮患者外周血PDCD1基因表達(dá)水平；采用Logistic回歸評(píng)估SLE患者發(fā)生焦慮情緒的影響因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 SLE患者血液PDCD1表達(dá)水平與焦慮發(fā)生

結(jié)果顯示，PDCD1低表達(dá)組患者的焦慮發(fā)生率明顯高于PDCD1高表達(dá)組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001)，見表1。

表1 SLE患者血液PDCD1表達(dá)水平與焦慮發(fā)生情況[n(%)]

2.2 SLE患者焦慮程度與外周血PDCD1 mRNA表達(dá)水平

不同焦慮程度患者外周血PDCD1表達(dá)水平比較，無焦慮組>輕度焦慮組>中度及重度焦慮組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；中度焦慮組和重度焦慮組患者比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 不同焦慮程度的SLE患者外周血PDCD1 mRNA表達(dá)水平

2.3 SLE患者焦慮發(fā)生的影響因素

以焦慮(賦值：1=正常，2=焦慮)作為因變量，將年齡(賦值：1=<30歲，2=≥30歲)，性別(1=男，2=女)、家庭所在地(1=城鎮(zhèn)，2=農(nóng)村)、家庭年收入(1=≤20 000元，2=>20 000元)、文化程度(1=高中/中職及以下，2=大專/大學(xué)及以上)以及PDCD1表達(dá)水平(1=高表達(dá)，2=低表達(dá))作為自變量，采用Logistic逐步回歸分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，家庭年收入(OR=1.422，95%CI為1.067～1.893)、PDCD1低表達(dá)(OR=2.439，95%CI為1.286～3.153)是SLE患者焦慮發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表3。

表3 SLE患者焦慮程度影響因素的Logistic逐步回歸分析

3 討論

PDCD1及其配體結(jié)合后的抑制途徑在T細(xì)胞反應(yīng)階段起到關(guān)鍵作用重要，若阻斷PDCD1或者阻斷其與受體結(jié)合，T細(xì)胞將缺失有效的負(fù)性調(diào)節(jié)信號(hào)，可能會(huì)發(fā)生免疫功能障礙，導(dǎo)致免疫性疾病發(fā)生[6-10]。研究表明，PDCD1基因缺失的小鼠出現(xiàn)類似SLE的癥狀，而且發(fā)現(xiàn)人體PDCD1分子的基因多態(tài)性與其SLE相關(guān)[2,11]。但目前未見PDCD1表達(dá)與SLE患者焦慮情緒相關(guān)性的報(bào)道。因此，分析SLE患者PDCD1基因表達(dá)與焦慮情緒的相關(guān)性具有一定的探索性。

本研究中大多數(shù)SLE患者出現(xiàn)了焦慮現(xiàn)象，其發(fā)生率為73.0%，其中中度焦慮與重度焦慮的發(fā)生率分別為24.0%和28.0%。國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者的焦慮現(xiàn)象非常常見，其中SLE患者發(fā)生焦慮的概率為4.1%～84.9%[12-15]。

本研究發(fā)現(xiàn)，PDCD1低表達(dá)的SLE患者焦慮的發(fā)生率高于PDCD1高表達(dá)的SLE患者。朱騰等[16]發(fā)現(xiàn)泛發(fā)性膿皰性銀屑病患者的PDCD1表達(dá)水平明顯高于健康對(duì)照者；也有研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者的焦慮程度越嚴(yán)重，SLE患者的癥狀較嚴(yán)重[5, 17-18]。提示臨床上可以根據(jù)SLE患者的焦慮程度及時(shí)發(fā)現(xiàn)其病情的變化，并采取相應(yīng)的醫(yī)療措施，以更好地控制SLE患者的病情。

本研究Logistic回歸分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，家庭年收入、PDCD1低表達(dá)是SLE患者處于焦慮狀態(tài)的的危險(xiǎn)因素，家庭所在地不影響SLE患者的焦慮程度。即SLE患者家庭收入低的發(fā)生焦慮的風(fēng)險(xiǎn)是家庭收入高的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)的1.422倍，而PDCD1低表達(dá)的SLE患者發(fā)生焦慮的風(fēng)險(xiǎn)是PDCD1高表達(dá)的SLE患者的2.439倍。目前尚無根治SLE的藥物，而且SLE患者的病情容易反復(fù)，糖皮質(zhì)激素治療帶來的不良反應(yīng)多，而且SLE患者會(huì)出現(xiàn)脫發(fā)，臉浮腫等癥狀，也容易并發(fā)紅斑狼瘡腎炎，同時(shí)SLE患者的治療費(fèi)用昂貴，經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)較重，綜合上述因素導(dǎo)致焦慮的發(fā)生[5,19-20]。PDCD1表達(dá)水平以及經(jīng)濟(jì)因素與SLE患者的焦慮情緒相關(guān)，但PDCD1表達(dá)水平更能反映SLE患者的焦慮程度。

綜上所述，本研究分析了100例SLE患者的PDCD1表達(dá)水平與其焦慮狀態(tài)的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PDCD1低表達(dá)的SLE患者焦慮的發(fā)生率高于PDCD1高表達(dá)的SLE患者，因此可以根據(jù)SLE患者的焦慮情緒的變化，及時(shí)發(fā)現(xiàn)其病情變化，采取科學(xué)的醫(yī)療措施以控制病情，減輕患者生理和心理負(fù)擔(dān)。