劉 丹,賀 彬,何 怡,吳茂宏
(1.銅仁市林業(yè)科學(xué)院,貴州 銅仁 554300;2.銅仁市林業(yè)局,貴州 銅仁 554300 )
果蠅為雙翅目果蠅科果蠅屬昆蟲,體型非常之小。雌蟲體型較雄蟲大,幼蟲體長3~4 mm。藍(lán)莓園果蠅有:黑腹果蠅、斑翅果蠅(Dros-ophilasuzukiiMatsumura)等。貴州省藍(lán)莓主要發(fā)現(xiàn)斑翅果蠅和黑腹果蠅,但是黑腹果蠅的數(shù)目多,危害最為嚴(yán)重。黑腹果蠅,又稱醋蠅,是一種常用的實(shí)驗(yàn)昆蟲,它10 d的生命周期和巨大的染色體,尤其是幼蟲唾液腺的染色體,使得它在遺傳學(xué)研究中具有不可估量的價值。果蠅的成蟲并沒有幼蟲的危害作用大。果蠅在多雨高溫季節(jié)將卵產(chǎn)于藍(lán)莓果皮下方,孵化成幼蟲后,幼蟲會原地取食,開始取食汁液然后由表皮移動至果實(shí)中心,但實(shí)際果蠅是取食酵母菌的,被害處果面稍凹陷,有針尖大小的蟲眼在果面上,幼蟲孵化后蛀食危害,果內(nèi)有蟲糞;受害果實(shí)變軟,果汁外溢和落果,使產(chǎn)量下降,品質(zhì)變劣,同時被果蠅卵危害的果實(shí)其安全性和商品價值以及鮮銷、貯藏、加工等都收到嚴(yán)重影響[1,2]。
藍(lán)莓(Vacciniumspp).為越橘屬,灌木類,多年生落葉或常綠樹種(蘇佳明等,2012)。已知現(xiàn)有450種,主要種植18種,藍(lán)莓果實(shí)的化學(xué)成分主要包括飛燕草素、錦葵花素、芍藥素、矮牽牛素、花青素等[3]。藍(lán)莓中的花青素,具有增強(qiáng)免疫、抗氧化、促進(jìn)視紅素再合成、抗心血管疾病、抗衰老等多種生理活性功能,在食品、化妝品、藥品等領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。藍(lán)莓葉總黃酮也有一定的體外抗炎作用。藍(lán)莓果實(shí)能夠改善視力、強(qiáng)抗氧化性和自由基清除能力、預(yù)防和抵抗疾病、預(yù)防和治療癌癥及腫瘤[4]。不同藍(lán)莓品質(zhì)特性的差異,使得藍(lán)莓有不同的食用方法,有的可用于釀酒,有的可以直接食用[5]。
貴州省黔東南州藍(lán)莓種植基地是我國西南地區(qū)最大的有機(jī)藍(lán)莓種植區(qū),隨著有機(jī)藍(lán)莓產(chǎn)業(yè)的擴(kuò)大,黑腹果蠅仍然是危害藍(lán)莓果實(shí)品質(zhì)的主要害蟲之一,根據(jù)實(shí)地調(diào)查,貴州省麻江縣有機(jī)藍(lán)莓果園中黑腹果蠅危害率在90%以上,關(guān)于藍(lán)莓的不同部位對黑腹果蠅的引誘試驗(yàn)及不同果實(shí)成熟度對果蠅的引誘性目前多靠經(jīng)驗(yàn),沒有具體數(shù)據(jù)支撐。本實(shí)驗(yàn)確定了藍(lán)莓果實(shí)對黑腹果蠅引誘效果最明顯,因此可以確定藍(lán)莓果實(shí)自身的某些成分對黑腹果蠅有很好的引誘效果。
麻江縣位于貴州省中部,黔東南苗族自治州西部,清水江上游。地處東經(jīng)107°17′~107°53′、北緯26°17′~26°36′之間。東西長58.2 km,南北寬36.7 km,總面積1225.95 km2。東鄰凱里市、丹寨縣,南與黔南州都勻市毗鄰,西接貴定縣,北交福泉市。距南海500 km,為近海內(nèi)陸縣??h境地勢西南高、東北低,處于云貴高原向湘桂丘陵過度的斜坡地帶。屬與亞熱帶濕潤季風(fēng)氣候,無嚴(yán)寒少酷暑,日照充足,雨熱同季,年平均氣溫14~16 ℃;年降雨量1200~1500 mm,相對濕度80%左右,無霜期長達(dá)270~301 d。全縣以山地為主。低山、低中山、丘陵、河谷及盆地占全縣總面積的78.4%。縣城海拔930 m,縣內(nèi)最低海拔576 m,最高海拔1862 m,土壤多為酸性土,非常適合藍(lán)莓的種植。
貴州省麻江縣藍(lán)夢谷藍(lán)莓基地采集的黑腹果蠅,于貴州大學(xué)林學(xué)院森保實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行人工擴(kuò)繁,實(shí)驗(yàn)采用的是剛孵化一日的果蠅。實(shí)驗(yàn)的黑腹果蠅利用玉米粉培養(yǎng)基培養(yǎng),置于恒溫培養(yǎng)箱中,溫度25 ℃,濕度60%,光照350 lx,觀感周期光/暗=12 h/12 h。
培養(yǎng)基成分:蔗糖13 g,瓊脂1.5 g,玉米粉17 g,蒸餾水180 mL,乙酸2 mL,酵母粉1.4 g。培養(yǎng)基配制步驟:①稱取玉米粉17 g裝入500 mL燒杯A中,量取蒸餾水90 mL。蒸餾水邊加邊攪拌,攪拌成均勻的糊狀。隨后電爐上加熱,均勻攪拌,直到玉米粉完全溶解。②稱取蔗糖13g,瓊脂1.5 g裝入500 mL燒杯B,量取蒸餾水90 mL。邊加熱邊攪拌,直至瓊脂完全溶解。③將燒杯B中煮溶的蔗糖和瓊脂倒入燒杯A中,攪拌均勻并小火煮沸。燒杯A稍涼后將 1.4 g酵母粉加入燒杯A中攪勻,并將配置好的培養(yǎng)基倒入大試管中。④將含有培養(yǎng)基的大試管置于超凈工作臺中,48 h后等待試管內(nèi)壁的水分充分揮發(fā)后,將果蠅轉(zhuǎn)至含有培養(yǎng)基的試管中。
新鮮的藍(lán)莓果實(shí)、枝條及葉片,塑封袋、泡沫保溫箱、冰袋、標(biāo)簽紙、記號筆、四臂嗅覺儀。
提前將冰袋放入冷藏室,用記號筆在標(biāo)簽紙上表明標(biāo)簽信息,并將標(biāo)簽紙貼到塑封袋上。采摘藍(lán)莓葉片、藍(lán)莓枝條、藍(lán)莓果實(shí),隨后放入貼有標(biāo)簽紙的塑封袋中,并置于泡沫箱內(nèi),用冰袋保鮮。
四臂嗅覺儀的使用:利用空氣壓縮機(jī)將經(jīng)過空氣過濾器過濾過的干凈空氣以恒定的壓力、流速通過誘集瓶的進(jìn)氣口(或聯(lián)結(jié)管的進(jìn)口孔),在誘集瓶內(nèi)信息氣味物質(zhì)與干凈空氣混合而形成帶有不同氣味的空氣流,通過4個臂進(jìn)入到中央活動室混合后,由頂端出氣口流出。在測試前,將生理指標(biāo)一致的測試?yán)ハx由出氣口放入中央活動室,當(dāng)氣路開通時,測試?yán)ハx在中央活動室與帶有信息物質(zhì)的氣體湍流相遇,而后逆風(fēng)飛行進(jìn)入特定的臂內(nèi),再沿著氣味的濃度梯度進(jìn)入只能進(jìn)不能出的誘集瓶內(nèi)。測試一定時間后,檢查各誘集瓶內(nèi)的測試?yán)ハx數(shù)量,并對處理和對照的誘集率進(jìn)行測驗(yàn)(百分率數(shù)據(jù)做平方根轉(zhuǎn)換)。
使用四臂嗅覺儀時,將四臂嗅覺儀的活性炭空氣凈化裝置、空氣流量計、原味瓶、橡膠管、氣泵等安裝完畢,并調(diào)試四臂嗅覺儀是否有漏氣現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)有漏氣現(xiàn)象及時處理。實(shí)驗(yàn)前,先將氣泵打開15 min,祛除裝置內(nèi)的氣味,將流速記調(diào)成相同的速率,250 mL/min,將實(shí)驗(yàn)材料放入原味瓶中,將50頭黑腹果蠅放入裝置中,10 min后記錄各端口果蠅數(shù)目。實(shí)驗(yàn)完畢后,及時清洗原味瓶并曬干,本實(shí)驗(yàn)重復(fù)3次。
通過測試不同藍(lán)莓生長部位對果蠅的引誘效果(表1),研究發(fā)現(xiàn)藍(lán)莓葉引誘率為13.89%,藍(lán)莓枝條引誘率為5.56%,藍(lán)莓果實(shí)引誘率為66.67%,對照組水引誘率為13.89%。藍(lán)枝莓果實(shí)與藍(lán)莓葉、藍(lán)莓枝條、對照組差異顯著。對照組與藍(lán)莓葉、藍(lán)莓枝條差異不顯著。
表1 不同藍(lán)莓生長部位對果蠅的引誘效果
藍(lán)莓果實(shí)對果蠅的引誘率[6~8]遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于藍(lán)莓葉、藍(lán)莓枝條,藍(lán)莓果實(shí)對黑腹果蠅的引誘作用最顯著,藍(lán)莓葉、藍(lán)莓枝條對黑腹果蠅的引誘作用極小。本實(shí)驗(yàn)排除了藍(lán)莓葉、藍(lán)莓果實(shí)的影響。確定了藍(lán)莓植株引誘果蠅的主要部分是藍(lán)莓果實(shí)。
自然狀態(tài)下果蠅可以利用嗅覺器官在復(fù)雜的氣味環(huán)境中直接找到藍(lán)莓并對其危害[9],在藍(lán)莓成熟過程中,不僅藍(lán)莓果實(shí)散發(fā)氣味,藍(lán)莓葉、藍(lán)莓枝條也同樣散發(fā)氣味,本試驗(yàn)利用四臂嗅覺儀,研究發(fā)現(xiàn)藍(lán)莓的不同生長部位中藍(lán)莓果實(shí)的引誘效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過藍(lán)莓葉、藍(lán)莓枝條,由此排除了葉片和枝條對果蠅的引誘能力,確定藍(lán)莓果實(shí)才是引誘果蠅的關(guān)鍵。