蔣婭玲，陳振健，吳金慶，戴麗霞

（江門市第三人民醫(yī)院檢驗科 廣東 江門 529000）

重度抑郁癥（Major depressive disorder, MDD）是一種嚴重威脅人民身心健康的精神疾病，以抑郁心境或者興趣或愉悅感減退的發(fā)作持續(xù)至少2周為主要臨床特征，患者常伴有典型的相關癥狀如：睡眠紊亂，食欲或體重改變，思維活動遲緩或激越，疲勞感或注意力難以集中，無價值感或過度自責，反復的自殺觀念或行為。前列腺素為有五元脂肪環(huán)，帶有兩個側(cè)鏈的20碳不飽和脂肪酸衍生物，主要由花生四烯酸（ArachadonicAcid, AA；20:4 n-6）在環(huán)氧合酶（cyclooxygenases, COXs）的作用下分解成不穩(wěn)定的中間產(chǎn)物PGH2，再由不同的前列腺素合成酶合成更穩(wěn)定的PGD2、PGE2等二型前列腺素。生成的前列腺素再通過與各自的受體結(jié)合，在體內(nèi)主要發(fā)揮抗炎癥的作用。但在此之外，還存在以亞麻酸（Dihomo Gamma Linolenic Acid, DGLA; 20:3 n-6）為合成底物的一型前列腺素合成途徑[1]。研究顯示，一型前列腺素與二型前列腺素在相當程度上存在競爭和相互拮抗的關系，但是在常態(tài)下，一型前列腺素在生物體內(nèi)的含量極低，主要以二型前列腺素發(fā)揮生物學功能[2]。

前列腺素代謝的改變與重度抑郁癥密切相關[3]。一方面，體外研究發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者來源的單核細胞在受到刺激時PGE2表達水平明顯升高[4]，并且增高的PGE2之前已見諸于患者的唾液、血清、腦脊液中。另一方面，三環(huán)類抗抑郁劑（Tricycle Antidepressants, TCA）和選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑（Selective SeraloninRe-uptake Inhibitor, SSRIs）被表明能抑制PGE2的合成[5]。此外，臨床上COX-2抑制劑如塞來昔布（Celecoxib）用于抑郁癥患者治療的有效性也進一步說明了前列腺素可能參與了重度抑郁癥發(fā)病[6]。目前對于PGE1在抑郁癥中的改變及作用，鮮有文獻報道。

目前已知前列腺素可以通過直接或間接的方式影響神經(jīng)元的活性從而參加中樞神經(jīng)系統(tǒng)生理或病理過程的調(diào)節(jié)[7]。例如，中腦多巴胺能神經(jīng)元的激活在介導社會挫敗應激誘導趨避行為中發(fā)揮了重要作用，研究發(fā)現(xiàn)PGE2-EP1信號通路通過削弱中腦多巴胺能神經(jīng)元的功能介導了小鼠對慢性社會挫敗應激的易感性。具體表現(xiàn)在重復的社會挫敗應激使小鼠皮層和海馬的PGE2水平顯著上升，缺乏COX-1或EP1受體的小鼠經(jīng)歷了社會挫敗應激后則表現(xiàn)出逃避不能。而同樣有研究顯示，PGE1-EP4信號通路能夠可以通過與AP-1等信號分子結(jié)合從而直接阻斷PGE2-EP1信號通路。但對此在MDD疾病中的研究尚未見報道。

研究對MDD患者血漿中PGE1和PGE2的水平進行了檢測，發(fā)現(xiàn)PGE1在患者中顯著升高，而PGE2并沒有顯著改變。這一結(jié)果提示，在MDD的發(fā)病過程中，PGE1的升高可能部分阻斷了PGE2-EP1信號通路，從而影響了患者對壓力應激的保護性反應。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年1月—2019年12月在江門市第三人民醫(yī)院精神科門診募集的重度抑郁癥患者40例作為研究組，另選取同期40例健康體檢者作為對照組，所有研究組患者均接受兩名副主任及以上級別醫(yī)生確診，應用《DSM-Ⅳ定式臨床會談量表》（Structured Clinical Interview for DSM-Ⅳ, SCID）作為標準化臨床診斷工具，且《漢密爾頓抑郁量表》（17項）評分≥17分。健康對照人群募集于北京協(xié)和醫(yī)院體檢中心，經(jīng)《簡明抑郁自評量表》評估，無分項達到抑郁癥診斷級別。所有受試者均抽取5 mL外周靜脈血，經(jīng)離心分層后收集上層血漿，分裝編號后于-80℃保存。所有受試者，重度抑郁癥患者經(jīng)家屬同意簽署知情同意書，健康組簽署知情同意書。對兩組研究對象一般資料對比統(tǒng)計分析，差異無顯著性，有可比性。見表1。

表1 研究對象一般資料情況

1.2 方法

主要試劑：PGE1和PGE2同位素內(nèi)標及抗氧化劑BHT（美國Cayman Chemicals）；液相質(zhì)譜級甲醇、乙腈、水（美國Fisher Scientific）；高效液相級醋酸銨（美國Sigma-Aldrich）。

1.2.1試劑配制 抗氧化劑BHT的配置：準確稱取20 mg BHT，用水配置為10 mg/mL；穩(wěn)定性同位素內(nèi)標PGE1/PGE2母液的濃度為100μg/mL，用30%的乙腈稀釋成濃度為20 ng/mL的工作液。

1.2.2樣品前處理 取250 μL血清，加20 μL同位素內(nèi)標工作液，加5μL BHT，混勻。將混合液加到固相萃取柱（美國Waters），用1 mL 5%甲醇清洗后使用1 mL 100%甲醇洗脫。通過真空旋干法去除洗脫液，用40μL 30%乙腈復溶，上機檢測。

1.3 觀察指標

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）檢測樣本中的PGE1和PGE2含量：采用LC-20AD超高效液相色譜儀（日本島津）和QTRAP5500串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國AB SCIEX）對所有樣本進行檢測。數(shù)據(jù)采用AB SCIEX公司的MultiQuant 3.0軟件進行處理，色譜圖經(jīng)過人工手動校正確認后再進行積分。信噪比為3時的峰面積值設為方法的檢測限（limit of detection, LOD）。每個樣品的濃度用色譜峰的峰高與峰面積的比值來表示。

1.4 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用GraphPad Prism6.0軟件進行處理，使用Student-T檢驗比較組間受試者年齡差異以及PGE1和PGE2水平的差異性，使用χ2檢驗比較組間性別差異。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2.結(jié)果

血漿PGE水平在MDD患者中顯著升高

通過LC-MS系統(tǒng)對所有受試者的血漿PGE1和PGE2水平進行檢測，結(jié)果顯示，與健康對照相比，PGE1在MDD患者血漿中顯著上升[（22.21±18.37）ng/L vs.（13.34±11.05）ng/L,P=0.01]，PGE2也有顯著差異[（330.887±42.592）ng/L vs.（224.807±57.853）ng/L,P=0.00]，見圖1。

圖1 PGE1和PGE2的血漿含量水平

3.討論

MDD是一種多基因復雜疾病，具有高患病率、高復發(fā)率、高致殘率和高自殺率等特征。神經(jīng)內(nèi)分泌假說和神經(jīng)炎癥假說認為人體代謝產(chǎn)生的各種具有生物學活性的小分子物質(zhì)在MDD發(fā)生中發(fā)揮了至關重要的作用。前列腺素是廣泛分布于哺乳動物和人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周組織及體液中的一類不飽和脂肪酸衍生物，主要包含一型和二型兩大系列。研究表明，前列腺素代謝改變與重度抑郁癥密切相關，這一過程參與了中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一系列重要的生理功能的調(diào)節(jié)，比如促進睡眠、改善食欲、削弱疼痛反應等，這些生理功能與MDD患者的臨床癥狀緊密相關。另外，亦有報道顯示前列腺素的合成酶在MDD患者中存在著顯著下調(diào)[8]。這些信息提示，前列腺素合成途徑的異常與MDD的發(fā)生密切相關。但是，目前為止的相關研究都主要集中在二型前列腺素中，對于生物體內(nèi)含量較少的一型前列腺素關注很少。本研究在一個40例首發(fā)未用藥MDD患者和40例健康對照的隊列中證明了PGE在MDD患者血漿中顯著上升。這一結(jié)果提示，在MDD的疾病狀態(tài)中，前列腺素合成的最上游階段就已經(jīng)出現(xiàn)了異常。這種異常狀態(tài)可能直接或間接影響了MDD典型表型的發(fā)生，如失眠、食欲減退和軀體化疼痛等。后續(xù)的研究應進一步擴大樣本隊列以明確前列腺素合成途徑上各個節(jié)點分子在MDD中的改變程度，以及在動物模型中通過調(diào)控各型前列腺素的水平明確其對MDD表型的影響。