李淑琴，陳振江，陳泰祥，李秀璋，慕彪彪，李春杰*

（1.蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蘭州大學(xué)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部草牧業(yè)創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)教育部工程研究中心，蘭州大學(xué)甘肅省西部草業(yè)技術(shù)創(chuàng)新中心，蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，甘肅 蘭州730020；2.青海大學(xué)畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，青海省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，青海西寧810016；3.蘭州市生態(tài)林業(yè)試驗(yàn)總場(chǎng)，甘肅 蘭州730085）

De Bary［1］于1866年最早提出內(nèi)生菌（endophyte）的概念，用以區(qū)別植物表面的表生菌［1-2］，他將生活在植物組織內(nèi)的微生物統(tǒng)稱為內(nèi)生菌。1898年Vogl從黑麥草（Lolium perenne）種子內(nèi)分離出來(lái)第一株內(nèi)生真菌［3］，國(guó)內(nèi)外學(xué)術(shù)界對(duì)于內(nèi)生真菌的研究已經(jīng)有一百多年的歷史，但直到八十年代初才開(kāi)始被重視［4-5］。從目前的研究結(jié)果來(lái)看，內(nèi)生真菌在植物體內(nèi)普遍存在［2］，包括禾草［6-8］與非禾草［9-11］。

禾草內(nèi)生真菌是指生長(zhǎng)在禾本科草類植物體內(nèi)并完成全部或大部分生活周期，但不導(dǎo)致禾草外部癥狀的一類真菌［12-13］，主要是指子囊菌綱（Ascomycetes），麥角菌科（Clavicipitaceae），瘤座菌族（Balansieae）的香柱菌屬（Epichlo?）［13-15］。主要通過(guò)種子進(jìn)行垂直傳播而侵染新的宿主禾草，與禾草形成互惠共生的關(guān)系。李翠英［16］于1989年首次對(duì)31份高羊茅（Festuca arundanacea）和21份多年生黑麥草進(jìn)行了內(nèi)生真菌的檢測(cè)。后續(xù)我國(guó)學(xué)者對(duì)醉馬草（Achnatherum inebrians）、野大麥（Hordeum brevisubulatum）、鵝觀草（Roegneria kamoji）、雀麥草（Bromusjaponicus）和中華羊茅（Festuca elata）等禾草的Epichlo?屬內(nèi)生真菌進(jìn)行了一系列研究報(bào)道，主要集中在內(nèi)生真菌多樣性、次生代謝產(chǎn)物、抗逆生物學(xué)以及生態(tài)學(xué)等方面。到目前為止，我國(guó)學(xué)者至少已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了21個(gè)屬，77種禾草中存在Epichlo?屬內(nèi)生真菌［17］。Epichlo?屬內(nèi)生真菌是一類特殊的微生物，一方面，在調(diào)節(jié)植株生長(zhǎng)中發(fā)揮著重要作用，它可以促進(jìn)禾草的生長(zhǎng)，提高宿主禾草對(duì)多種非生物脅迫和生物脅迫的抗性［18-19］，例如，抗旱［20］、耐鹽［19］、耐金屬［21］、抗?。?2］、抗蟲(chóng)［23］等。另一方面，由于內(nèi)生真菌能夠產(chǎn)生生物堿，主要有吲哚雙萜類（indolditerpenes），麥角堿類（ergot）、黑麥草堿（peramine）以及波胺（lolines），其中前兩種生物堿能夠?qū)倚螽a(chǎn)生毒性，引起取食了內(nèi)生真菌侵染的禾草的家畜中毒，給畜牧業(yè)造成重大損失，影響草地畜牧業(yè)的健康發(fā)展。而波胺和黑麥草堿能夠?qū)ハx(chóng)產(chǎn)生毒性，提高了宿主植物的抗蟲(chóng)性。

非禾草內(nèi)生真菌對(duì)它們的宿主植物的生長(zhǎng)發(fā)育同樣發(fā)揮著重要作用，非禾草內(nèi)生真菌共生體同樣能夠提高宿主植物抗逆性。在非禾草中，內(nèi)生真菌是某些特殊植物的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，是植株正常生長(zhǎng)發(fā)育、生殖發(fā)育必不可少的條件［24］，其次利用內(nèi)生真菌生產(chǎn)植物原藥、功能化合物方面顯示出巨大潛力，以及內(nèi)生真菌代謝產(chǎn)物可能具有抗菌活性［25］、抗腫瘤活性［26］、抗HIV活性［27］、抗氧化活性［28］等特點(diǎn)。例如紫杉醇，最初從短葉紅豆杉（Taxuschinensis）樹(shù)皮中分離出來(lái)，能阻止癌細(xì)胞的擴(kuò)散，是一種著名的抗腫瘤劑，并經(jīng)相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，可以利用內(nèi)生真菌來(lái)合成紫杉醇，又因該方法生長(zhǎng)速率高，培養(yǎng)條件易掌握，易獲得大量培養(yǎng)物而被廣泛關(guān)注［26，29-30］。

我國(guó)幅員遼闊，生態(tài)系統(tǒng)豐富多彩，空間格局復(fù)雜多樣，是世界上物種資源最豐富的國(guó)家。其中動(dòng)物、植物、微生物以及環(huán)境所構(gòu)成的生態(tài)系統(tǒng)中，微生物發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，我國(guó)擁有豐富的草地資源，分布于東北平原、內(nèi)蒙古高原、鄂爾多斯高原、黃土高原以及青藏高原等各類天然草地，約有4億hm2，占全國(guó)國(guó)土面積的41.7%［31］。內(nèi)生真菌分布廣、種類多，普遍存在于每種植物中，此外內(nèi)生真菌所產(chǎn)生的次生代謝物也是多種多樣，這對(duì)于內(nèi)生真菌的研究和開(kāi)發(fā)提供了巨大的空間。

近年來(lái)，大量相關(guān)科技文獻(xiàn)的涌現(xiàn)，使得文獻(xiàn)計(jì)量得到重視。文獻(xiàn)計(jì)量學(xué)是指利用科技文獻(xiàn)和信息科學(xué)，統(tǒng)計(jì)相關(guān)文獻(xiàn)的數(shù)據(jù)，并對(duì)其進(jìn)行定量分析，來(lái)明確某一研究領(lǐng)域的發(fā)展趨勢(shì)，能夠?yàn)橄嚓P(guān)研究人員提供所在領(lǐng)域的發(fā)展現(xiàn)狀以及研究趨勢(shì)，能夠更好地為研究領(lǐng)域和研究方向的選擇提供參考。隨著科學(xué)研究和技術(shù)的不斷發(fā)展，內(nèi)生真菌在農(nóng)業(yè)科技應(yīng)用、綠色農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等方面的重要性日益凸顯出來(lái)。我國(guó)在內(nèi)生真菌方面發(fā)表了大量的研究論文，但到目前為止，缺乏對(duì)內(nèi)生真菌以及禾草與非禾草內(nèi)生真菌發(fā)展進(jìn)程的差距相關(guān)文獻(xiàn)的系統(tǒng)解讀。因此，將基于CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)禾草Epichlo?屬內(nèi)生真菌和非禾草內(nèi)生真菌的文獻(xiàn)進(jìn)行計(jì)量分析，以明確國(guó)內(nèi)對(duì)內(nèi)生真菌相關(guān)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)、研究空白、存在的問(wèn)題以及與國(guó)際上內(nèi)生真菌相關(guān)研究存在的差距，為內(nèi)生真菌的進(jìn)一步深入研究提供良好的借鑒與參考。

1 材料與方法

以中國(guó)知網(wǎng)數(shù)據(jù)庫(kù)（China National Knowledge Infrastructure，CNKI）為數(shù)據(jù)來(lái)源，選用內(nèi)生真菌為關(guān)鍵詞，發(fā)表年份為1999年10月31日—2019年10月31日，進(jìn)行高級(jí)檢索，共檢索到相關(guān)的文獻(xiàn)5333篇，以此作為文獻(xiàn)數(shù)據(jù)來(lái)源，手動(dòng)挑選與禾草Epichlo?屬內(nèi)生真菌研究相關(guān)的論文，共挑選到377篇文獻(xiàn)?；谖墨I(xiàn)計(jì)量法分析，從論文的發(fā)表年份、數(shù)量、發(fā)表期刊、文獻(xiàn)科研機(jī)構(gòu)、所屬的學(xué)科、研究機(jī)構(gòu)和關(guān)鍵詞詞頻等方面進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和比較［32］。其中，對(duì)于禾草內(nèi)生真菌關(guān)鍵詞的統(tǒng)計(jì)與比較，利用Citespace對(duì)377篇的關(guān)鍵詞頻度進(jìn)行分析，并構(gòu)建關(guān)系圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 全國(guó)禾草與非禾草內(nèi)生真菌論文發(fā)表情況及分析

1999-2019 年，共檢索到內(nèi)生真菌相關(guān)文獻(xiàn)5333篇，其中禾草內(nèi)生真菌相關(guān)文獻(xiàn)377篇。內(nèi)生真菌年發(fā)文量總體呈現(xiàn)不斷上升的趨勢(shì)（圖1），但禾草內(nèi)生真菌的年發(fā)文量，變化趨勢(shì)較小，2014年以前整體呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，其中2015年達(dá)到峰值，年發(fā)文量為69篇。從2015年以后又呈現(xiàn)出逐漸降低的趨勢(shì)。擬合方程為y=2.1558x-4299.2，（其中x為發(fā)表文獻(xiàn)年份，y為年發(fā)文量），R2為0.6457，可表示發(fā)表年份與年發(fā)文量的關(guān)系。而非禾草內(nèi)生真菌研究相關(guān)文獻(xiàn)在20年內(nèi)發(fā)文量呈現(xiàn)較大幅度的增加，2016年以前呈現(xiàn)出線性增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)，在2016年達(dá)到一個(gè)峰值，之后稍微有所降低。將非禾草內(nèi)生真菌文獻(xiàn)數(shù)量根據(jù)所在年度進(jìn)行數(shù)據(jù)擬合，得到的擬合方程為y=24.406x-48811，（其中x為發(fā)表文獻(xiàn)年份，y為年發(fā)文量），R2=0.9022，線性擬合程度較好，表明國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)界對(duì)非禾草內(nèi)生真菌研究的重視程度越來(lái)越明顯。從20年發(fā)文量來(lái)看，國(guó)內(nèi)禾草內(nèi)生真菌的發(fā)文數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于非禾草內(nèi)生真菌。

圖1 1999-2019年在CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)中禾草內(nèi)生真菌與非禾草內(nèi)生真菌相關(guān)研究論文年發(fā)文量Fig.1 Annual publications of research paper s r elated to endophytic fungi of grass and endophytic fungi of non grass in CNKI database during 1999-2019

2.2 發(fā)文學(xué)科分布

對(duì)檢索出的5333篇內(nèi)生真菌相關(guān)文獻(xiàn)按照一級(jí)學(xué)科進(jìn)行分類的結(jié)果表明（表1），在生物、作物、中藥與方劑研究領(lǐng)域的學(xué)科分布相對(duì)較高，分別為21.62%，15.58%，14.16%，涉及的學(xué)科較為廣泛。其次377篇禾草內(nèi)生真菌相關(guān)文獻(xiàn)按照一級(jí)學(xué)科分類的結(jié)果發(fā)現(xiàn)（表1），在作物、草學(xué)、生物、植物保護(hù)4個(gè)研究方向的論文分別占禾草內(nèi)生真菌文獻(xiàn)總數(shù)的20.69%，18.83%，11.94%，10.34%。從以上結(jié)果可知，禾草內(nèi)生真菌與非禾草內(nèi)生真菌的學(xué)科分布在作物學(xué)和生物學(xué)中都有較大分布。禾草內(nèi)生真菌的研究由于其宿主都為禾本科草類植物，且禾草內(nèi)生真菌的有性態(tài)表現(xiàn)為香柱病菌，在草學(xué)學(xué)科和植物保護(hù)學(xué)科中有較大分布。而非禾草內(nèi)生真菌的研究有很大一部分來(lái)源于次生代謝產(chǎn)物的藥物開(kāi)發(fā)，因此在中藥與方劑學(xué)科中也有較大分布。

表1 1999-2019年期間在CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)中關(guān)于內(nèi)生真菌與禾草內(nèi)生真菌相關(guān)研究論文的主要學(xué)科分布Table 1 Main discipline distribution of research paper s on endophyte and grass endophyte in CNKI database during 1999-2019

2.3 文獻(xiàn)期刊分析

對(duì)檢索到的5333篇內(nèi)生真菌的文獻(xiàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，其中發(fā)文期刊超過(guò)總文獻(xiàn)10%的有天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)、安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)、菌物學(xué)報(bào)以及中國(guó)中藥雜志（表2），其中禾草內(nèi)生真菌的發(fā)文期刊主要分布在草業(yè)科學(xué)、草業(yè)學(xué)報(bào)、生態(tài)學(xué)報(bào)等雜志。由此可知，發(fā)文期刊種類較為狹小，內(nèi)生真菌主要發(fā)文期刊基本為同一類型的期刊，反映了關(guān)于內(nèi)生真菌的研究較為局限，存在較大的發(fā)展空間。

表2 1999-2019年期間在CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)中內(nèi)生真菌研究載文量排名前10位的期刊Table 2 Top 10 journals in the CNKI database for endophytic fungi research during 1999 to 2019

2.4 發(fā)文量前10位的科研機(jī)構(gòu)或單位

對(duì)發(fā)文機(jī)構(gòu)和單位統(tǒng)計(jì)分析（表3）發(fā)現(xiàn)：發(fā)文量排在前10位的機(jī)構(gòu)或單位包括：西北農(nóng)林科技大學(xué)、蘭州大學(xué)、云南大學(xué)、海南大學(xué)、南京師范大學(xué)、中山大學(xué)、浙江大學(xué)、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)、貴州大學(xué)和吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，其中排在第1位的是西北農(nóng)林科技大學(xué)，論文數(shù)量為240篇，占所有文獻(xiàn)的4.50%，其次是為蘭州大學(xué)，論文數(shù)量為126篇，占2.36%。關(guān)于發(fā)表禾草內(nèi)生真菌的機(jī)構(gòu)或單位，排名前兩位的分別為蘭州大學(xué)和南開(kāi)大學(xué)，蘭州大學(xué)發(fā)表禾草內(nèi)生真菌論文數(shù)量109篇，占86.51%。南開(kāi)大學(xué)發(fā)表禾草內(nèi)生真菌的論文占內(nèi)生真菌論文總數(shù)的22.28%。非禾草內(nèi)生真菌研究論文發(fā)文量較多的機(jī)構(gòu)和單位研究機(jī)構(gòu)主要包括西北農(nóng)林科技大學(xué)、云南大學(xué)、海南大學(xué)和南京師范大學(xué)等。通過(guò)計(jì)量分析可知內(nèi)生真菌的研究主要集中在一些高校，且非禾草內(nèi)生真菌的研究機(jī)構(gòu)相較于禾草內(nèi)生真菌的研究機(jī)構(gòu)廣泛。

表3 1999-2019年期間在CNKI數(shù)據(jù)中與內(nèi)生真菌相關(guān)研究論文數(shù)量排名前10位的機(jī)構(gòu)Table 3 Top 10 institutions in the number of papers related to endophytic fungi in CNKI data during 1999-2019

2.5 排名前7位的資助項(xiàng)目

各發(fā)表論文所獲得的資助項(xiàng)目（表4）表明，資助論文超過(guò)100篇的基金項(xiàng)目有3個(gè)，分別為：國(guó)家自然科學(xué)基金、國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃以及國(guó)家高科技研究發(fā)展計(jì)劃。此外，高等學(xué)校博士學(xué)科點(diǎn)專項(xiàng)科研基金、國(guó)家科技支撐計(jì)劃、廣東省自然科學(xué)基金和海南省自然科學(xué)基金等也資助了一定數(shù)量?jī)?nèi)生真菌的研究。國(guó)家自然科學(xué)基金資助論文數(shù)量為1163篇，包括141篇禾草內(nèi)生真菌論文，以及1022篇非禾草內(nèi)生真菌論文，表明國(guó)家自然科學(xué)基金在我國(guó)內(nèi)生真菌的研究發(fā)展上起著舉足輕重的地位。

表4 1999-2019年期間在CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)中與內(nèi)生真菌研究相關(guān)論文的主要基金項(xiàng)目Table 4 The main fund pr ojects of paper s related to endophyte r esearch in CNKI database dur ing 1999-2019

2.6 單篇論文被引次數(shù)排名前10位論文

在檢索到的5333篇關(guān)于內(nèi)生真菌的研究論文中，被引頻次最高的論文為郭良棟［2］于2001年發(fā)表于《菌物系統(tǒng)》的《內(nèi)生真菌研究進(jìn)展》一文，被引頻次高達(dá)819次（表5）。其次為張集慧等［11］于1999年發(fā)表于《中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報(bào)》的《蘭科藥用植物的5種內(nèi)生真菌產(chǎn)生的植物激素》一文，被引頻次為446次。其他被引頻次較高的論文分別發(fā)表于《中草藥》《微生物通報(bào)》《中國(guó)藥學(xué)雜志》《西北植物學(xué)報(bào)》和《中山大學(xué)學(xué)報(bào)》等雜志。

表5 1999-2019年期間在CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)中發(fā)表關(guān)于禾草內(nèi)生真菌與非禾草內(nèi)生真菌相關(guān)研究論文中單篇被引用次數(shù)排名前10位的論文Table 5 Top 10 papers on the number of citations of a single paper related to endophytic fungi of grass and endophytic fungi of non gr ass in CNKI database in 1999-2019

關(guān)于禾草內(nèi)生真菌的研究論文，被引頻次最高的論文為南志標(biāo)等［14］于2004年發(fā)表于《生態(tài)學(xué)報(bào)》的《禾草-內(nèi)生真菌共生體在草地農(nóng)業(yè)系統(tǒng)中的作用》一文，被引頻次為172次。其次為陳世蘋(píng)等［33］于2001年發(fā)表于《應(yīng)用于環(huán)境生物學(xué)報(bào)》的《水分脅迫下內(nèi)生真菌感染對(duì)黑麥草葉內(nèi)保護(hù)酶系統(tǒng)活力的影響》一文，被引頻次為142次，其他被引頻次較高的論文分別發(fā)表于《江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)》《植物生態(tài)學(xué)報(bào)》和《微生物學(xué)通報(bào)》等雜志。引用次數(shù)排名前10的禾草內(nèi)生真菌研究論文中，有5篇是關(guān)于黑麥草內(nèi)生真菌的研究，表明黑麥草內(nèi)生真菌共生體是國(guó)內(nèi)關(guān)于禾草內(nèi)生真菌研究起步較早的共生體。

2.7 禾草內(nèi)生真菌高頻關(guān)鍵詞

關(guān)鍵詞是對(duì)論文的研究?jī)?nèi)容、方法、對(duì)象等的高度總結(jié)，關(guān)鍵詞分布可知相關(guān)研究領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)以及發(fā)展趨勢(shì)。利用Citespace軟件對(duì)377篇禾草內(nèi)生真菌文獻(xiàn)的關(guān)鍵詞構(gòu)建了知識(shí)圖譜，結(jié)果表明，目前國(guó)內(nèi)關(guān)于禾草內(nèi)生真菌的研究對(duì)象多集中在醉馬草、黑麥草、野大麥、高羊茅、羊草（Leymus chinensis）、中華羊茅等幾種禾草（圖2）。其他高頻詞包括了“抗逆性”和“多樣性”等，表明目前國(guó)內(nèi)關(guān)于禾草共生體的研究多集中在禾草內(nèi)生真菌共生體的生物抗逆和非生物抗逆機(jī)理，以產(chǎn)生生物堿的功能為研究基礎(chǔ)，通過(guò)菌株多樣性的研究篩選獲得優(yōu)良的內(nèi)生真菌菌株以及新的禾草-內(nèi)生真菌共生體的挖掘。

圖2 1999-2019年期間在CNKI數(shù)據(jù)庫(kù)中與禾草內(nèi)生真菌研究相關(guān)的高頻關(guān)鍵詞網(wǎng)絡(luò)關(guān)系圖Fig.2 Network diagram of high frequency keywords related to the study of endophytic fungi of grass in CNKI database during 1999-2019

3 討論與展望

文獻(xiàn)作為信息、科技的載體，其數(shù)量可反映研究人員對(duì)內(nèi)生真菌相關(guān)研究領(lǐng)域的關(guān)注程度和投入程度，我國(guó)非禾草內(nèi)生真菌年發(fā)文量遠(yuǎn)大于禾草內(nèi)生真菌，在國(guó)際上，關(guān)于禾草內(nèi)生真菌的發(fā)文量在1996-2016年達(dá)到1042篇，其中我國(guó)含有66篇［32］，占到國(guó)內(nèi)發(fā)文量的27.5%，對(duì)我國(guó)禾草內(nèi)生真菌研究占有重要影響。本研究發(fā)現(xiàn)對(duì)于內(nèi)生真菌的研究局限于少數(shù)幾個(gè)學(xué)科，急需更加深入地交叉研究以推動(dòng)研究思維的變革和創(chuàng)新，來(lái)挖掘研究領(lǐng)域的巨大潛力。此外任何一個(gè)領(lǐng)域的研究都離不開(kāi)國(guó)家的支持，而在內(nèi)生真菌的研究上，尤其是禾草內(nèi)生真菌，基金項(xiàng)目較為缺乏且研究機(jī)構(gòu)較為集中，主要為西北地區(qū)，使得研究的廣度、深度都有待加強(qiáng)。2018年師茜等［32］基于Web of Science數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)禾草內(nèi)生真菌研究論文進(jìn)行計(jì)量分析，列出了引用頻次排名前10論文的關(guān)鍵詞，研究對(duì)象主要是醉馬草和羽茅（Achnatherum sibiricum），研究?jī)?nèi)容主要為內(nèi)生真菌提高宿主植物的抗旱性、抗寒性、抗鹽性的生理生化機(jī)制，本研究發(fā)現(xiàn)與其較為一致。

在20年的研究中我國(guó)取得了巨大進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)了越來(lái)越多的Epichlo?屬［47-48］內(nèi)生真菌，深入了解和認(rèn)識(shí)到內(nèi)生真菌的系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程，分子生物學(xué)技術(shù)、基因組學(xué)、蛋白組學(xué)和代謝組學(xué)以及信息生物技術(shù)的應(yīng)用加快了內(nèi)生真菌的研究，其次內(nèi)生真菌全基因族測(cè)序的測(cè)定，更是明確了次生代謝物多樣性及其基因的關(guān)系［49-50］。在目前，禾草內(nèi)生真菌的研究主要集中在黑麥草、高羊茅等，對(duì)于其他菌株還需要深入研究其進(jìn)化起源以及與宿主植物的關(guān)系［51-52］。我國(guó)加大了對(duì)禾草內(nèi)生真菌多樣性的研究，但仍較為局限，且鑒定的精確度不高。其次，我國(guó)對(duì)于內(nèi)生真菌的研究主要集中在內(nèi)生真菌提高宿主對(duì)環(huán)境抗逆性的生理生化機(jī)制，以及生物堿對(duì)生態(tài)系統(tǒng)的影響和內(nèi)生真菌所產(chǎn)生的次生代謝物的作用等方面。而在國(guó)際內(nèi)生真菌的研究更多集中在內(nèi)生真菌與寄主相互作用的分子機(jī)制，以及利用內(nèi)生真菌來(lái)進(jìn)行育種等方面［51］，并已經(jīng)選育出禾草內(nèi)生真菌共生體新品種并應(yīng)用于市場(chǎng)，而我國(guó)起步較晚，投入程度還遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠。再者，利用內(nèi)生真菌共生體所產(chǎn)生的次生代謝物將其開(kāi)發(fā)成殺菌劑，殺蟲(chóng)劑等，內(nèi)生真菌共生體所產(chǎn)生的麥角新堿具有消炎、止痛等功效，可用于藥物的制作等［8］都具有巨大的研究潛力。

續(xù)表5 Continued Table 5

內(nèi)生真菌是一類應(yīng)用前景廣闊的資源微生物，從長(zhǎng)春花（Catharanthus roseus）所分離出的內(nèi)生真菌菌株中，可發(fā)現(xiàn)含有長(zhǎng)春新堿成分，這種成分具有抗腫瘤活性，且對(duì)白血病具有顯著療效［41，53］。此外內(nèi)生真菌可能通過(guò)分泌2，3-丁二醇以及類似物來(lái)調(diào)控?cái)M南芥（Arabidopsis thaliana）自 身 合 成 生 長(zhǎng) 素（auxin，IAA），調(diào)節(jié)生長(zhǎng)素相關(guān)運(yùn)輸?shù)鞍走\(yùn)輸生長(zhǎng)素到指定位置以促進(jìn)擬南芥的生長(zhǎng)［54］，在未來(lái)可以利用該特性開(kāi)發(fā)生物菌肥，對(duì)提高品種及產(chǎn)量具有巨大潛力。一些內(nèi)生真菌能夠產(chǎn)生細(xì)胞壁分解酶，能用于克服宿主防御異物的天然屏障，還可產(chǎn)生果膠酶等胞外酶［55］，產(chǎn)生較高的商業(yè)價(jià)值。植物內(nèi)生真菌是一個(gè)特殊的真菌類群，而目前對(duì)于非禾草內(nèi)生真菌的研究主要集中在藥用植物。近年來(lái)，我國(guó)已從數(shù)百種藥用植物中分離鑒定出大量的內(nèi)生真菌，主要研究?jī)?nèi)生真菌對(duì)宿主的生長(zhǎng)發(fā)育、種子萌發(fā)、有效成分積累等方面的作用［56-57］，但對(duì)于內(nèi)生真菌與宿主相互關(guān)系的分子機(jī)制研究成果較少以及對(duì)于內(nèi)生真菌的研究主要集中在實(shí)驗(yàn)階段，實(shí)際應(yīng)用還需深入研究和實(shí)踐。因此同樣要加強(qiáng)非禾草內(nèi)生真菌的共生機(jī)制和抗逆機(jī)制的研究，加強(qiáng)內(nèi)生真菌與藥用植物天然產(chǎn)物的研究，加強(qiáng)內(nèi)生真菌同預(yù)防醫(yī)學(xué)、中醫(yī)藥學(xué)和林學(xué)等相關(guān)學(xué)科和團(tuán)隊(duì)的研究。

內(nèi)生真菌共生體對(duì)其他微生物同樣也產(chǎn)生一定影響，Márquez等［58］在研究中發(fā)現(xiàn)，只有被病毒感染的內(nèi)生真菌才能提高寄主植物的耐熱性，這揭示了真菌病毒能影響內(nèi)生真菌共生體系，但病毒對(duì)內(nèi)生真菌以及共生體的影響仍不清晰。菌根真菌同樣能與植物根系建立互惠共生關(guān)系，而內(nèi)生真菌與菌根真菌雙重感染時(shí)對(duì)寄主植物所產(chǎn)生的影響研究較為缺乏。有研究表明內(nèi)生真菌與菌根真菌存在拮抗作用［59］，但在某些情況下反而促進(jìn)菌根真菌的侵染［60］。兩種真菌是否形成雙重共生體以對(duì)寄主達(dá)到多方面的保護(hù)，仍需更深入的探索。因此對(duì)于我國(guó)內(nèi)生真菌的相關(guān)研究需要加大投入，以不斷提升該領(lǐng)域的研究水平，推動(dòng)我國(guó)內(nèi)生真菌的發(fā)展。