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        花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬生長性能、血清生化指標(biāo)、小腸組織形態(tài)及經(jīng)濟(jì)效益的影響

        2021-06-28 11:01:52藍(lán)婧婷任瑞周瑞戴洪偉舒文秀朱凱王略宇徐紅偉臧榮鑫
        草業(yè)學(xué)報(bào) 2021年6期
        關(guān)鍵詞:生長血清

        藍(lán)婧婷,任瑞,周瑞,戴洪偉,舒文秀,朱凱,王略宇,徐紅偉*,臧榮鑫*

        (1.西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院,甘肅蘭州730100;2.南江縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,四川 巴中635600)

        發(fā)酵飼料作為一種綠色、環(huán)保的新型飼料[1],在生產(chǎn)過程中不僅能夠通過降解飼料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子減少對動物的不利影響[2-3]。同時(shí),發(fā)酵過程中產(chǎn)生的大量有益菌和代謝產(chǎn)物,可以改善飼料的營養(yǎng)組成和適口性,促進(jìn)動物對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收,提高飼料轉(zhuǎn)化效率[4-6],抑制有害微生物的繁殖,進(jìn)而提高動物的生產(chǎn)性能和抗病力[7-8]。因此,在畜牧生產(chǎn)中,發(fā)酵飼料的研發(fā)與推廣受到了廣泛的關(guān)注[9]。地方性飼料資源具有營養(yǎng)價(jià)值獨(dú)特、不易加工處理、流通成本高、易變質(zhì)、季節(jié)性強(qiáng)和有一定地理范圍等特點(diǎn),合理的發(fā)酵利用,不僅可以降低飼料成本,提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益,還有助于實(shí)現(xiàn)生態(tài)循環(huán)、健康養(yǎng)殖[10-12]?;ㄒ耍˙rassica oleraceavar.botrytis)又名花菜,不僅營養(yǎng)豐富,而且風(fēng)味鮮美。近年來,作為甘肅省高原夏菜產(chǎn)業(yè)的主要葉菜類蔬菜之一,花椰菜的栽培面積和消費(fèi)量也迅速增加。然而,花椰菜在加工過程中產(chǎn)生的葉、根、莖等形成的大量蔬菜廢棄物卻成了主要的農(nóng)業(yè)面源污染之一。因此,本研究利用花椰菜尾菜、玉米(Zea mays)、豆粕、米糠等與復(fù)合益生菌菌劑進(jìn)行全價(jià)飼料固態(tài)微生物發(fā)酵,研究花椰菜發(fā)酵飼料對保育豬的生長性能、血液生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)、小腸組織形態(tài)及經(jīng)濟(jì)效益的影響,為花椰菜尾菜發(fā)酵飼料在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)動物、試驗(yàn)飼糧及試驗(yàn)設(shè)計(jì)

        試驗(yàn)于2019年4-5月在蘭州瑞源農(nóng)業(yè)科技有限公司的豬場進(jìn)行。試驗(yàn)采用完全隨機(jī)分組設(shè)計(jì),選取40日齡體況良好、體重相近(11.40±1.36)kg的“杜×長×大”保育豬42頭,隨機(jī)分為2組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)7頭?;A(chǔ)飼糧參照NRC(2012)豬的營養(yǎng)需要配制,飼糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

        表1 飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of diets(air-dry basis)

        花椰菜尾菜發(fā)酵飼料的制作采用全發(fā)酵方式:將花椰菜尾菜粉碎成3 cm顆粒大小后與基礎(chǔ)飼糧其他原料按比例混合,添加0.35%的復(fù)合菌劑,混合均勻后裝至發(fā)酵袋中,室溫下經(jīng)厭氧發(fā)酵25 d后得到花椰菜尾菜發(fā)酵飼料,具有弱酸味,呈黃褐色,色澤均一,氣味柔和,質(zhì)地松軟[13]。復(fù)合菌劑由西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院研制,主要成分為:植物乳桿菌、動物雙歧桿菌、白地霉、產(chǎn)朊假絲酵母菌和釀酒酵母菌(比例為1∶1∶1∶1∶1)。

        1.2 飼養(yǎng)管理

        試驗(yàn)豬按照豬場免疫程序、驅(qū)蟲制度和消毒管理制度進(jìn)行。試驗(yàn)共30 d,其中預(yù)試期8 d,正試期22 d。試驗(yàn)期間,每日飼喂5次,采食、飲水自由。

        1.3 測定指標(biāo)與方法

        1.3.1生長性能 分別于試驗(yàn)的第1天和最后1 d晨飼前對保育豬進(jìn)行空腹稱重并記錄,且各重復(fù)初重差異不顯著,根據(jù)初重和末重計(jì)算平均日增重(average daily gain,ADG)。試驗(yàn)期間每天以重復(fù)為單位記錄各組飼料消耗情況并計(jì)算平均日采食量(average daily feed intake,ADFI)和料重比(feed/gain,F(xiàn)/G);另外,每天分別于第1次和最后1次飼喂時(shí)仔細(xì)觀察試驗(yàn)豬的糞便情況,并記錄每個(gè)重復(fù)的腹瀉頭次和評分。當(dāng)糞便黏稠、不成形,即腹瀉評分為2或者以上時(shí),則判定該試驗(yàn)豬發(fā)生腹瀉,保育豬腹瀉判定標(biāo)準(zhǔn)見表2。腹瀉率的計(jì)算公式如下:

        表2 腹瀉評分標(biāo)準(zhǔn)Table 2 Diarrhea score criteria

        1.3.2 腸道食糜pH采用PHS-3C型(上海佑科儀器儀表有限公司)酸度計(jì)測定十二指腸、空腸、回腸、盲腸、結(jié)腸和直腸食糜p H值。

        1.3.3 血清生化指標(biāo)及免疫指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇2頭保育豬進(jìn)行前腔靜脈采血10 mL,靜置30 min后3000 r·min-1離心15 min獲得血清,將血清分裝后于-20℃保存。利用日立7020全自動生化分析儀測定血清中的甘油三酯(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、總蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、球蛋白(globulin,GLB)、肌酐(creatinine,CRE)、尿素氮(urea nitrogen,UREA)和葡萄糖(glucose,GLU)的含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷氨酰轉(zhuǎn)酞酶(gamma glutamyl transpeptidase,GGT)和堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性。采用免疫投射比濁法測定免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)和免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)的含量。

        1.3.4 小腸組織形態(tài) 試驗(yàn)結(jié)束,保育豬禁食12 h后稱重,每組隨機(jī)選取6頭試驗(yàn)豬進(jìn)行屠宰,剖開腹腔,輕微且迅速取出小腸,截取十二指腸的中段約10 cm,空腸和回腸的截取部位及長度同十二指腸,輕輕排出食糜,用生理鹽水沖洗干凈,剪取2 cm左右無受損部位放入4%甲醛溶液中固定,分別做好標(biāo)記,將固定好的小腸組織進(jìn)行修塊、脫水、透明、浸蠟和包埋處理后用輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)切片,每個(gè)樣品約做5張切片,每張切片上放2張完好的小腸橫截面組織,經(jīng)蘇木精-伊紅染色后晾干封片,進(jìn)行切片觀察。采用OLYMPUS-CX31-DP72顯微成像系統(tǒng)采集約8個(gè)典型視野(絨毛和隱窩形態(tài)完整)的圖像,測量絨毛高度(villus height,VH)和隱窩深度(crypt depth,CD),標(biāo)準(zhǔn)參照孫大明等[14]的標(biāo)準(zhǔn),根據(jù)測量值計(jì)算出絨隱比,即絨毛高度/隱窩深度(villus height/crypt depth,V/C)。

        1.3.5 經(jīng)濟(jì)效益計(jì)算

        1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

        試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2010整理后,采用SPSS 21.0軟件進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)方法分析,結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤表示,以P<0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬生長性能的影響

        如表3所示,與對照組相比,試驗(yàn)組保育豬的ADFI和ADG分別顯著提高了16.50%和18.68%(P<0.05),試驗(yàn)組保育豬的末重比對照組升高了8.33%(P>0.05),料重比降低了20.61%(P>0.05),但兩組間差異不顯著,腹瀉率顯著降低了74.35%(P<0.05)。

        表3 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬生長性能的影響Table 3 Effects of cauliflower residue fer mented feed on growth performance of nursery pigs

        2.2 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬腸道食糜p H值的影響

        如表4所示,與對照組相比,試驗(yàn)組保育豬十二指腸、空腸、盲腸、結(jié)腸和直腸食糜pH值分別顯著降低了19.16%、11.59%、14.09%、15.95%和11.23%(P<0.05),而兩組間回腸食糜pH值無顯著差異(P>0.05)。

        表4 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬腸道食糜p H值的影響Table 4 Effects of cauliflower residue fermented feed on p H value of intestinal chyme of nursery pigs

        2.3 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬血清生化指標(biāo)和免疫指標(biāo)的影響

        如表5所示,與對照組相比,試驗(yàn)組保育豬血清中總膽固醇、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量分別顯著降低了29.43%、60.51%(P<0.05),甘油三酯、肌酐、葡萄糖、谷草轉(zhuǎn)氨酶含量均降低,但兩組間差異不顯著(P>0.05);試驗(yàn)組保育豬血清中尿素氮、白蛋白、免疫球蛋白M分別顯著升高了69.84%、5.22%、100.00%(P<0.05),總蛋白、球蛋白、免疫球蛋白G、堿性磷酸酶升高,但兩組間差異不顯著(P>0.05)。

        表5 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬血清生化指標(biāo)及免疫指標(biāo)的影響Table 5 Effects of cauliflower residue fermented feed on serum biochemical indices and immune indices of nursery pigs

        2.4 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬小腸組織形態(tài)的影響

        如表6所示,與對照組相比,試驗(yàn)組保育豬十二指腸絨毛高度和V/C值分別升高了3.24%、4.49%(P>0.05),十二指腸的隱窩深度降低了3.32%(P>0.05);空腸絨毛高度升高了3.21%(P>0.05),空腸的隱窩深度顯著降低了9.56%(P<0.05),空腸V/C值和回腸絨毛高度分別顯著升高了13.64%與11.49%(P<0.05),回腸的隱窩深度和回腸的V/C值分別升高了8.22%與1.18%(P>0.05)。

        表6 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬小腸組織形態(tài)的影響Table 6 Effects of cauliflower residue fermented feed on tissue morphology of small intestinal of nursery pigs(μm)

        2.5 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料飼喂保育豬經(jīng)濟(jì)效益分析

        如表7所示,與對照組相比,試驗(yàn)組保育豬的增重收益、毛利潤分別顯著提高了30.84%、44.48%(P<0.05),飼料成本顯著降低了21.58%(P<0.05)。整個(gè)試驗(yàn)過程中,兩組均未使用除了飼料成分以外的任何抗生素類藥品或添加劑,且兩組飼養(yǎng)管理費(fèi)用相同,故未列入表中進(jìn)行對比。

        表7 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料飼喂保育豬經(jīng)濟(jì)效益的影響Table 7 Effects of cauliflower residue fermented feed on economic returns of nursery pigs

        3 討論

        3.1 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬生長性能和腹瀉的影響

        生長性能決定保育豬的營養(yǎng)狀況和健康程度,是保育豬生長的一個(gè)重要標(biāo)志。大量研究表明[15-17],發(fā)酵飼料可以顯著提高動物ADG、ADFI,降低F/G。主要是由于發(fā)酵能夠消除飼料中部分植物性原料的抗?fàn)I養(yǎng)因子,起到一定的脫毒作用,且能夠?qū)⒃现械拇蠓肿游镔|(zhì)降解為小分子,使?fàn)I養(yǎng)成分更容易被動物消化吸收,進(jìn)而改善生長性能[18]。另外,發(fā)酵飼料具有天然的酸香味,有較好的誘食功效,保育豬特別喜歡采食,可有效改善飼料適口性,增加采食量,提高生長性能[19-20]。本試驗(yàn)中,飼喂添加花椰菜尾菜發(fā)酵飼料的保育豬ADG顯著高于對照組,末重也有所升高,表明花椰菜尾菜發(fā)酵飼料能夠顯著提高保育豬的生長性能,這與其他學(xué)者[21-24]的研究結(jié)果一致。周映華等[25]研究發(fā)現(xiàn),在飼糧中添加20%無抗發(fā)酵飼料能夠使育肥豬的ADG和ADFI顯著提高10.89%和5.86%,F(xiàn)/G顯著降低4.38%。本試驗(yàn)中,兩組保育豬的ADFI差異顯著,試驗(yàn)組ADFI比對照組顯著提高170 g·d-1,這可能有兩方面原因,一是經(jīng)微生物發(fā)酵后的飼料能產(chǎn)生有發(fā)酵香味的有機(jī)酸,既增強(qiáng)了動物的適口性,又有助于動物的采食[26];二是發(fā)酵飼料中含有的大量益生菌隨著保育豬的采食進(jìn)入腸道內(nèi)并定殖,將微生物產(chǎn)生的代謝物有效利用,幫助機(jī)體有效分解食物并促進(jìn)腸道消化吸收,進(jìn)而促進(jìn)保育豬的采食[27]。

        研究表明,飼料經(jīng)過微生物發(fā)酵后可以緩解保育豬的腹瀉,提高飼料利用率,進(jìn)而改善仔豬的生長性能[28]。李維炯等[29]研究指出,飼料發(fā)酵4 d后,有效微生物群發(fā)酵飼料組的p H值顯著降低了20.89%,p H值降低可抑制有害菌的生長,這表明有益菌發(fā)酵飼料可降低豬胃腸道內(nèi)pH值,降低腹瀉率,有效控制消化道疾病的發(fā)生率。本試驗(yàn)中,飼喂花椰菜尾菜發(fā)酵飼料顯著降低了保育豬的腹瀉率,與馮江鑫等[30]的研究結(jié)果一致。其原因可能與發(fā)酵飼料中的大量活性乳酸菌有關(guān),乳酸菌在動物體內(nèi)代謝產(chǎn)生的乳酸能夠降低腸道內(nèi)的氧化還原電位和p H值,抑制大腸桿菌和沙門氏菌等有害菌的生長,維持消化道的健康環(huán)境,降低保育豬的腹瀉率,進(jìn)而提高生長性能[30]。

        3.2 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬腸道食糜pH值的影響

        動物腸道適宜的酸度能保證其正常的消化功能,即腸道pH值是反映消化性能的重要指標(biāo),發(fā)酵飼料中的乳酸菌及產(chǎn)生的酸性物質(zhì)可降低豬腸道p H值[31]。在本試驗(yàn)中,飼喂花椰菜尾菜發(fā)酵飼料顯著降低保育豬十二指腸、空腸、盲腸、結(jié)腸和直腸p H值??赡艿脑蛴袃牲c(diǎn):1)花椰菜尾菜發(fā)酵飼料中的乳酸等酸性物質(zhì)進(jìn)入腸道改變其pH值;2)花椰菜尾菜發(fā)酵飼料中的大量益生菌定殖在腸道內(nèi),大量繁殖并生長產(chǎn)生了大量乳酸,降低了保育豬腸道pH值。

        3.3 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬血清生化及免疫指標(biāo)的影響

        血清ALB和UREA是機(jī)體新陳代謝尤其是氮代謝功能的重要標(biāo)志。朱坤等[32]研究發(fā)現(xiàn),給豬飼喂發(fā)酵飼料可以提高血清中TP和UREA的含量,有效促進(jìn)蛋白質(zhì)在體內(nèi)的整體代謝,而且能夠顯著促進(jìn)血清ALP的活性[33]。本試驗(yàn)結(jié)果中,試驗(yàn)組血清ALB和UREA含量均顯著提高,表明花椰菜尾菜發(fā)酵飼料能夠促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)的分解代謝,潛在促進(jìn)保育豬的生長發(fā)育。血清中TC和TG的濃度是衡量機(jī)體脂類代謝強(qiáng)弱的重要指標(biāo)[34-35]。血清中的TG水平可以決定脂肪組織發(fā)育和脂肪沉積,TG濃度越高說明脂肪的沉積越多。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組血清TC含量顯著低于對照組,表明尾菜發(fā)酵飼料具有調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝的作用。

        機(jī)體肝臟和心臟的健康狀況可以通過血清中ALT、AST和GGT活性的高低來評估[36-37]。血清中活性越低,表明臟器發(fā)育越健康。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組ALT顯著降低,表明飼喂花椰菜尾菜發(fā)酵飼料能夠一定程度保護(hù)保育豬的肝臟功能。肝膽系統(tǒng)的健康狀況可通過ALP來反映,血清ALP活性越高,動物的生長狀況越好,ALP活性隨著豬的日增重的升高而升高[37-38]。本試驗(yàn)中,試驗(yàn)組血清ALP顯著高于對照組,說明花椰菜尾菜發(fā)酵飼料可以提高保育豬血清中ALP活性,從而提高其生長性能。

        免疫球蛋白構(gòu)成機(jī)體的重要保護(hù)屏障,是動物機(jī)體免疫系統(tǒng)的重要組成部分[39-40],機(jī)體抗病能力的強(qiáng)弱可以通過免疫水平的高低間接反映。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,飼喂花椰菜尾菜發(fā)酵飼料提高了保育豬血清IgG和IgM,且IgM顯著高于對照組,表明保育豬飼糧中添加花椰菜尾菜發(fā)酵飼料有助于提高機(jī)體免疫能力,與眾多研究結(jié)果一致[41-43]。

        3.4 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬小腸組織形態(tài)的影響

        小腸組織形態(tài)的主要指標(biāo)為:絨毛高度、隱窩深度及兩者的比值,這些指標(biāo)可以反映腸道通透性、吸收性和腸道黏膜功能是否完善[44]。腸內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的消化功能可通過腸絨毛高度反映。腸道絨毛越高,說明腸道吸收面積越大,細(xì)胞越成熟,營養(yǎng)吸收能力也就越強(qiáng)[45-46]。細(xì)胞生產(chǎn)速率是由隱窩深度決定的。隱窩變深則不利于養(yǎng)分的消化吸收,隱窩越淺,即成熟細(xì)胞率越高,分泌功能越強(qiáng)[47]。V/C能全面反映小腸的功能,比值降低預(yù)示粘膜損傷,消化吸收能力下降,出現(xiàn)腹瀉情況,減緩生長[48]。Ding等[22]研究發(fā)現(xiàn)飼喂添加15%發(fā)酵茶渣可使豬回腸絨毛高度顯著提高,空腸隱窩深度顯著降低。本試驗(yàn)結(jié)果中,試驗(yàn)組保育豬空腸的V/C值和回腸的絨毛高度顯著高于對照組,空腸的隱窩深度顯著低于對照組,與前人研究結(jié)果基本一致[30,49],表明花椰菜尾菜發(fā)酵飼料能夠促進(jìn)保育豬小腸的生長發(fā)育,改善保育豬腸道功能,保障了腸道黏膜的完整性,這與生長性能的結(jié)果相對應(yīng),說明花椰菜尾菜發(fā)酵飼料可能是通過促進(jìn)腸道組織形態(tài)的發(fā)育進(jìn)而促進(jìn)了保育豬的生長。

        3.5 花椰菜尾菜發(fā)酵飼料對保育豬經(jīng)濟(jì)效益的影響

        研究表明,發(fā)酵飼料可提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益[50]。本試驗(yàn)中,花椰菜尾菜發(fā)酵飼料和基礎(chǔ)飼糧的成本分別為2.05和2.89元·kg-1。于對照組而言,試驗(yàn)組保育豬的增重收益和毛利潤分別顯著提高了30.84%和44.48%,而飼料成本則顯著降低了21.58%,這是由于花椰菜尾菜屬于農(nóng)業(yè)廢棄物資源,通過有效利用,不僅能夠節(jié)約飼養(yǎng)成本,而且還能保護(hù)生態(tài)環(huán)境,另外,發(fā)酵飼料的生產(chǎn)過程簡單,人工成本較低。因此,飼喂花椰菜尾菜發(fā)酵飼料可以降低保育豬的飼養(yǎng)成本,提高養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益。

        4 結(jié)論

        本試驗(yàn)結(jié)果表明,飼喂花椰菜尾菜發(fā)酵飼料能夠促進(jìn)保育豬生長,降低腹瀉率,進(jìn)而提高生長性能;也可調(diào)節(jié)脂肪代謝,增強(qiáng)免疫性能;促進(jìn)腸道發(fā)育,改善腸道健康;降低飼養(yǎng)成本,提高經(jīng)濟(jì)效益。

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