李 敏，李 爽，張忠信，杜鵬強(qiáng)，周 琳，董文召

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 植物保護(hù)學(xué)院/河南省新型農(nóng)藥創(chuàng)制與應(yīng)用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/河南省綠色農(nóng)藥創(chuàng)制工程技術(shù)研究中心，河南 鄭州 450002；2.河南省作物分子育種研究院/河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 經(jīng)濟(jì)作物研究所，河南 鄭州 450002)

花生白絹病是由齊整小核菌(SclerotiumrolfsiiSacc.)引起的土傳真菌病害，亦稱莖腐病、腳腐病、南方枯萎病等。該病原菌以菌核和菌絲在土壤中或植株病殘?bào)w上越冬，在適宜的條件下，菌絲或萌發(fā)的菌核從花生植株莖基部侵入，導(dǎo)致受侵染植株變黃、枯萎，根莖部變褐、腐爛[1-3]；亦可侵染花生莢果和果仁，影響產(chǎn)量?；ㄉ捉伈≡谑澜绺骰ㄉa(chǎn)區(qū)均有發(fā)生[1]。近年來(lái)，隨著我國(guó)花生種植面積的增加，連作重茬及秸稈還田等耕作方式日益普遍，導(dǎo)致花生白絹病在我國(guó)各花生產(chǎn)區(qū)發(fā)生危害日趨嚴(yán)重、分布區(qū)域逐年擴(kuò)大，山東、河南和湖北等省[4-10]均有大面積暴發(fā)流行的報(bào)道，地塊發(fā)病株率為10%～30%，嚴(yán)重地塊達(dá)40%以上；發(fā)病田塊減產(chǎn)10%～20%，病重田塊減產(chǎn)50%以上，甚至造成絕收，該病害已成為限制我國(guó)花生生產(chǎn)的一個(gè)重要因子。

控制花生白絹病菌侵染將是花生生產(chǎn)中持續(xù)面對(duì)的問(wèn)題。雖然作物輪作是病害治理的重要基礎(chǔ)，但由于白絹病菌有500多種寄主植物以及菌核在土壤中可存活3～5 a，極大地限制了采用與非寄主作物輪作或整地時(shí)用土深埋受侵染作物殘?bào)w等物理和栽培措施[11]。再者，持久的寄主抗性可能是最有效的病害管理手段之一，但目前市面上缺乏抗白絹病的花生品種。盡管有報(bào)道稱美國(guó)花生田白絹病菌種群對(duì)五氯硝基苯、氟酰胺和戊唑醇的敏感性下降[12-13]，但施用化學(xué)殺菌劑仍是目前防治花生白絹病最常用的措施。

利用化學(xué)防治和生物防治控制花生白絹病菌，必須了解該病原菌的分布和多樣性。菌絲親和群(MCG)是一種廣泛用于研究病原真菌的遺傳多樣性、地理分布、病害流行規(guī)律和病原致病性變異等的重要手段[14-15]。NALIM等[16]和XIE等[17]分別通過(guò)MCG分析對(duì)美國(guó)德克薩斯州和美國(guó)南部6州花生白絹病菌田間種群進(jìn)行了多樣性評(píng)估；OKABE等[18]亦采用MCG分析了日本茨城縣花生白絹病菌田間種群的多樣性；CILLIERS等[19]對(duì)非洲南部15個(gè)地區(qū)7種寄主上分離的121株白絹病菌進(jìn)行MCG分析的結(jié)果表明，白絹病菌在MCG、寄主和資源分布上存在巨大的變異和聯(lián)系。LE等[11]結(jié)合MCG和核糖體DNA-ITS序列分析，證實(shí)了分離自越南中部花生、番茄和芋頭上的103株白絹病菌菌株的菌絲相容性、生長(zhǎng)速率和菌核特性等遺傳和表型性狀上表現(xiàn)出多樣性。作為花生種植面積和總產(chǎn)量均居全國(guó)前列的河南省，近年來(lái)花生白絹病嚴(yán)重威脅著省內(nèi)南陽(yáng)、駐馬店、商丘、周口、新鄉(xiāng)等主產(chǎn)區(qū)的花生生產(chǎn)。但目前關(guān)于河南省花生白絹病菌群體多樣性及分布尚缺乏系統(tǒng)研究。截至2020年12月21日，我國(guó)登記用于防治花生白絹病的化學(xué)殺菌劑僅有7種(http://www.chinapesticide.gov.cn /)，其中萎銹靈(Carboxin)是一種內(nèi)吸性較強(qiáng)的琥珀酸脫氫酶抑制劑類(lèi)殺菌劑(SDHIs)，國(guó)外亦早已登記用于防治由齊整小核菌引起的多種植物白絹病[2,20-21]。由于其作用靶標(biāo)單一，有關(guān)萎銹靈及結(jié)構(gòu)相似化合物的抗藥性在多種致病真菌，如灰霉病菌(Botrytiscinerea)、瓜類(lèi)白粉病菌(Podosphaeraxanthii)和西瓜蔓枯病菌(Didymellabryoniae)[22-24]等上已有報(bào)道。但花生白絹病菌對(duì)萎銹靈的敏感性變化在我國(guó)尚未見(jiàn)研究報(bào)道。因此，在對(duì)河南省5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)花生白絹病系統(tǒng)調(diào)查的基礎(chǔ)上，對(duì)采集的28株代表性菌株進(jìn)行形態(tài)學(xué)特征研究和MCG分析，測(cè)定萎銹靈對(duì)28株菌株的毒力，旨在明確河南省主要花生產(chǎn)區(qū)白絹病菌群體的多樣性、分布及對(duì)萎銹靈的敏感性，為科學(xué)制定和成功實(shí)施花生白絹病的生物防控和化學(xué)防控策略提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

培養(yǎng)基為PDA培養(yǎng)基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、瓊脂20 g，蒸餾水定容至1 L。

試劑與儀器：95%萎銹靈(Carboxin)，廣西田園生化有限公司生產(chǎn)；二甲基亞砜(分析純)，北京索萊寶科技有限公司生產(chǎn)；吐溫-80(分析純)，北京索萊寶科技有限公司生產(chǎn)；RXZ型智能人工氣候箱，寧波江南儀器廠生產(chǎn)；GXZ型智能光照培養(yǎng)箱，寧波江南儀器廠生產(chǎn)；SW-CJ-2FD潔凈工作臺(tái)，蘇凈集團(tuán)蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司生產(chǎn)；ME104E/02電子天平，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司生產(chǎn)；游標(biāo)卡尺，香港杭泰(國(guó)際)集團(tuán)有限公司生產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 田間發(fā)病率調(diào)查和菌株采集 2019年7—8月，在河南省南陽(yáng)、駐馬店、商丘、鄭州和新鄉(xiāng)5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)，隨機(jī)選取23塊花生田對(duì)花生白絹病的發(fā)病率進(jìn)行調(diào)查。每個(gè)田塊之間至少相隔10 km上。每個(gè)田塊采用五點(diǎn)取樣法進(jìn)行調(diào)查，每點(diǎn)調(diào)查50株，記錄病株數(shù)，并計(jì)算發(fā)病率。發(fā)病率=病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100%。在23個(gè)田塊中，每個(gè)病株上的菌核視為1份樣本，每個(gè)田塊均采集15份樣本，并將其分別放于塑料袋中，帶回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行菌株分離。

1.2.2 菌株的分離和保存 將每份菌核樣本先用30%次氯酸鈉溶液浸泡30 s，再用75%乙醇浸泡30 s，之后用無(wú)菌水沖洗3遍，最后用無(wú)菌濾紙吸干菌核表面的水分后轉(zhuǎn)接到PDA平板上，置于30 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)。2 d后挑取單菌核萌發(fā)的單菌絲進(jìn)行純化培養(yǎng)，此過(guò)程重復(fù)3次。收集已純化菌株產(chǎn)生的菌核，一份置于滅菌的2 mL 離心管中于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆茫涣硪环葜糜跍缇?0%甘油管中于-80 ℃長(zhǎng)期保存。

1.2.3 形態(tài)學(xué)特征觀察 將已活化的28株花生白絹病菌菌株分別置于PDA平板上，于30 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)，2 d后，在菌落邊緣打取直徑為6 mm的菌餅，轉(zhuǎn)接于另一PDA平板(直徑90 mm)中央，在25 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2 d后，用十字交叉法測(cè)量菌株的菌落直徑，并計(jì)算每株菌株的菌絲生長(zhǎng)速率。菌落直徑測(cè)量后，各PDA平板繼續(xù)置于相同條件下培養(yǎng)，期間觀察并記錄菌落特征。28 d后，記錄每個(gè)培養(yǎng)皿中的菌核數(shù)量，收集每個(gè)PDA平板中的所有菌核，置于30 ℃培養(yǎng)箱中風(fēng)干24 h后，隨機(jī)抽取20個(gè)成熟菌核，用游標(biāo)卡尺測(cè)量菌核直徑；用電子天平稱量每個(gè)平板中所有菌核的總干質(zhì)量，并根據(jù)每個(gè)平板中菌核的數(shù)量計(jì)算單個(gè)菌核的干質(zhì)量。每株菌株設(shè)置3個(gè)重復(fù)。

1.2.4 MCG測(cè)定及其多樣性分析 MCG測(cè)定參照XIE等[17]的方法，略作修改：將所有菌株的菌核置于PDA平板上，于30 ℃培養(yǎng)箱中黑暗活化，2～3 d后，在菌落邊緣打取直徑為6 mm的菌餅，轉(zhuǎn)接到PDA平板(直徑90 mm)中。每個(gè)PDA平板中包含2株菌株共3個(gè)菌餅，其中，1株菌株轉(zhuǎn)接2個(gè)菌餅作為親和對(duì)照，另1株菌株轉(zhuǎn)接1個(gè)菌餅，菌餅之間距離為4～5 cm。轉(zhuǎn)接后的PDA平板放置于25 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)，14 d后觀察并記錄各PDA平板上菌株間菌絲交匯處的反應(yīng)情況。當(dāng)2株配對(duì)菌株的菌絲交匯處相互融合，則記為親和，并被劃分為相同的親和群；當(dāng)2株配對(duì)菌株的菌絲交匯處產(chǎn)生1條明顯的壞死帶或空白帶時(shí)，則記為不親和，并被劃分為不同的親和群。本試驗(yàn)中，28株花生白絹病菌菌株在所有可能的情況下兩兩組合進(jìn)行配對(duì)，每個(gè)配對(duì)重復(fù)3次。

花生白絹病菌MCG的多樣性水平高低以香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)(H)來(lái)表示，香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)是考慮到個(gè)體數(shù)量及種類(lèi)數(shù)量的一個(gè)多樣性指數(shù)，其計(jì)算公式為：H=-∑[pi×lnpi]，pi為第i個(gè)MCG類(lèi)群中各菌株所占的頻率，香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)的數(shù)值越大，代表多樣性水平越高[25]。

1.2.5 菌株對(duì)萎銹靈的敏感性測(cè)定 采用菌絲生長(zhǎng)速率抑制法[26]測(cè)定花生白絹病菌對(duì)萎銹靈的敏感性。稱取一定量的95%萎銹靈原藥溶于少量二甲亞砜中，再用含2%吐溫-80的無(wú)菌水配制成100 mg/L的母液，并稀釋成系列濃度的藥液，使其中的二甲亞砜和吐溫-80的終濃度分別控制在6%和2%。分別取1 mL藥液和9 mL PDA培養(yǎng)基于直徑9 cm的培養(yǎng)皿中混勻，制成終質(zhì)量濃度分別為1、0.5、0.25、0.125、0.062 5和0.031 25 mg/L的含藥PDA平板。將各供試菌株的菌核置于PDA平板上于30 ℃培養(yǎng)箱中黑暗活化，2～3 d后，在菌落邊緣打取直徑為6 mm的菌餅，并轉(zhuǎn)接于含有萎銹靈系列質(zhì)量濃度的PDA平板上，以含0.6%二甲亞砜和0.2%吐溫-80的無(wú)藥PDA平板為相應(yīng)的溶劑對(duì)照，每處理3次重復(fù)。置于30 ℃培養(yǎng)箱中黑暗培養(yǎng)，3 d后，用十字交叉法測(cè)量菌落直徑，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制率，并根據(jù)概率值分析法求得毒力回歸方程和有效中濃度(EC50值)。菌絲生長(zhǎng)抑制率=[(對(duì)照菌落直徑-菌餅直徑)-(處理菌落直徑-菌餅直徑)]/(對(duì)照菌落直徑-菌餅直徑)×100%。

1.3 數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Excel 2010和SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，應(yīng)用Duncan’s新復(fù)極差法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，利用Pearson相關(guān)系數(shù)法進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 田間發(fā)病率和代表性菌株

通過(guò)對(duì)5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)田間隨機(jī)調(diào)查(圖1)，發(fā)現(xiàn)被調(diào)查的23個(gè)田塊中花生白絹病均有發(fā)生。其中，2個(gè)田塊(5和18)的發(fā)病率分別高達(dá)50.4%和47.2%；10個(gè)田塊的發(fā)病率為10.4%～28.4%；其余11個(gè)田塊的發(fā)病率相對(duì)較低，介于3.6%～8.8%。此外，還發(fā)現(xiàn)13個(gè)春播花生田塊中白絹病的發(fā)病率均高于10個(gè)夏播花生地塊。從河南省5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)采集的345份樣本中成功分離到253株花生白絹病菌株，并分別從5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)隨機(jī)選取其中的28株作為代表性菌株進(jìn)行MCG分析和形態(tài)學(xué)特征研究(表1)。

表1 河南省23個(gè)采樣田塊28株花生白絹病菌株信息Tab.1 Information on the 28 isolates of Sclerotium rolfsii from different peanut fields in Henan Province

2.2 形態(tài)學(xué)特征

2.2.1 菌落特征 對(duì)28株花生白絹病菌菌株的菌落特征觀察結(jié)果表明，所有的菌株均產(chǎn)生白色的菌絲和形成褐色或深褐色的菌核，但這些菌株的菌核在PDA平板上的分布存在差異，其中，8株菌株產(chǎn)生的菌核分布在PDA平板的邊緣(圖2a)，其余20株菌株產(chǎn)生的菌核則隨機(jī)分布在PDA平板上(圖2b)。

2.2.2 菌絲生長(zhǎng)速率 從表2可以看出，花生白絹病菌不同菌株的菌絲生長(zhǎng)速率存在差異。28株菌株的菌絲生長(zhǎng)速率在0.55～1.31 mm/h，其中采自南陽(yáng)的菌株NYXYWJ-4菌絲生長(zhǎng)速率最小(0.55 mm/h)，而采自新鄉(xiāng)的菌株XXYYJZ-3菌絲生長(zhǎng)速率最大(1.31 mm/h)。對(duì)于不同采樣地的菌株來(lái)說(shuō)(因鄭州和駐馬店均只有2株菌株，故未做比較)，南陽(yáng)、商丘和新鄉(xiāng)的菌株在菌絲生長(zhǎng)速率上沒(méi)有顯著差異(表3)。

表2 不同采樣地的28株花生白絹病菌菌株的表型特征

2.2.3 菌核特征 在離體條件下，28個(gè)花生白絹病菌菌株的菌核干質(zhì)量、菌核直徑和菌核數(shù)量均存在差異，菌核干質(zhì)量為0.50～2.04 mg，菌核直徑為0.91～1.47 mm，每皿菌核數(shù)量為25～186個(gè)(表2)。分析不同采樣地的菌株可知(因鄭州和駐馬店均只有2個(gè)菌株，故未做比較)，南陽(yáng)、商丘和新鄉(xiāng)的菌株在菌核數(shù)量上不存在顯著差異；新鄉(xiāng)和商丘的菌株菌核干質(zhì)量明顯比南陽(yáng)的大；南陽(yáng)、新鄉(xiāng)和商丘菌株的菌核直徑存在顯著差異(表3)。

表3 河南省不同采樣地花生白絹病菌的形態(tài)學(xué)特征Tab.3 Morphological characteristics of Sclerotium rolfsii from different locations in Henan Province

2.3 菌株的菌絲生長(zhǎng)速率、菌核數(shù)量、菌核干質(zhì)量、菌核直徑的相關(guān)性分析

對(duì)28株菌株的菌絲生長(zhǎng)速率、菌核數(shù)量、菌核干質(zhì)量、菌核直徑進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析的結(jié)果(表4)表明，菌絲生長(zhǎng)速率與菌核數(shù)量(r=0.097，P>0.01)沒(méi)有相關(guān)性，而菌絲生長(zhǎng)速率與菌核干質(zhì)量(r=0.350，P>0.01)、菌核直徑(r=0.219，P>0.01)呈正相關(guān)，但沒(méi)有達(dá)到顯著水平；菌核數(shù)量與菌核干質(zhì)量(r=-0.623，P<0.01)、菌核直徑(r=-0.648，P<0.01)呈顯著負(fù)相關(guān)；菌核干質(zhì)量與菌核直徑(r=0.937，P<0.01)呈顯著正相關(guān)。

表4 28株花生白絹病菌的菌絲生長(zhǎng)速率、菌核數(shù)量、菌核干質(zhì)量及菌核直徑的相關(guān)性分析Tab.4 Correlation analysis of mycelial growth rate,number,dry weight,diameter of sclerotia among 28 Sclerotium rolfsii isolates from peanut

2.4 菌株的MCG及其多樣性分析

根據(jù)2株配對(duì)菌株間菌絲交匯處的反應(yīng)，28株花生白絹病菌菌株共劃分為5個(gè)MCG(表5)，并隨機(jī)命名為MCG1、MCG2、MCG3、MCG4、MCG5。5個(gè)MCG的頻率和地理分布存在差異。MCG1是最大的親和群，包含15株菌株，占總菌株數(shù)的53.57%，分布于除駐馬店外的所有采樣地；MCG2的菌株數(shù)量?jī)H次于MCG1，包含9株菌株，占總菌株數(shù)的32.14%，分布于南陽(yáng)、新鄉(xiāng)和駐馬店3個(gè)采樣地；其余3個(gè)MCG占總菌株數(shù)的14.29%，其中MCG3、MCG4、MCG5分別包含2、1、1株菌株，其分布均局限于1個(gè)采樣地，分別為南陽(yáng)、鄭州和駐馬店。在這5個(gè)MCG中，僅來(lái)自商丘的菌株被劃分到1個(gè)親和群中，而其他采樣地的菌株分別被劃分到不同的親和群中，說(shuō)明除商丘外，其他采樣地出現(xiàn)的MCG與菌株的地理來(lái)源無(wú)相關(guān)性。

表5 28株花生白絹病菌菌株的MCG及其多樣性指數(shù)Tab.5 Mycelial compatibility groups and MCGs-related diversity index of 28 Sclerotium rolfsii isolates from peanut

菌株的MCG多樣性分析結(jié)果表明(表5)，28株花生白絹病菌菌株的香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)(H)為1.13。其中，來(lái)自商丘的菌株H為0，來(lái)自南陽(yáng)的菌株H為0.98，來(lái)自新鄉(xiāng)的菌株H為0.41，來(lái)自鄭州和駐馬店的H均為0.69，說(shuō)明這5個(gè)采樣地花生白絹病菌MCG的多樣性水平不一致。

2.5 28株菌株對(duì)萎銹靈的敏感性

采用菌絲生長(zhǎng)速率抑制法測(cè)定了28株花生白絹病菌株對(duì)萎銹靈的敏感性(表 6)，其中最大值(0.299 0 mg/L)是最小值(0.114 4 mg/L)的2.61倍，平均EC50值為0.182 8 mg/L。上述結(jié)果表明，28株花生白絹病菌株對(duì)萎銹靈均表現(xiàn)為敏感，且不同菌株對(duì)萎銹靈的敏感性存在一定的差異。

表6 28株花生白絹病菌菌株對(duì)萎銹靈的敏感性Tab.6 Sensitivity of 28 Sclerotium rolfsii isolates from peanut to carboxin

續(xù)表6 28株花生白絹病菌菌株對(duì)萎銹靈的敏感性Tab.6(Continued) Sensitivity of 28 Sclerotium rolfsii isolates from peanut to carboxin

分析不同采樣地的花生白絹病菌對(duì)萎銹靈的敏感性可知，不同地區(qū)菌株的EC50平均值間存在差異，但未達(dá)到顯著水平(表7)。其中，鄭州的菌株最敏感，EC50平均值為0.144 7 mg/L，而駐馬店的菌株最不敏感，EC50平均值為0.206 7 mg/L，后者EC50平均值是前者的1.43倍。

表7 河南省不同采樣地花生白絹病菌菌株對(duì)萎銹靈的敏感性比較Tab.7 Comparison of sensitivity of Sclerotium rolfsii to carboxin from different locations in Henan Province

從敏感性頻率分布圖(圖3)可以看出，供試花生白絹病菌對(duì)萎銹靈的敏感性分布呈單側(cè)峰曲線分布，說(shuō)明供試菌株中沒(méi)有出現(xiàn)敏感性下降的群體。

3 結(jié)論與討論

齊整小核菌作為花生白絹病的致病因子，了解花生田中齊整小核菌群體多樣性和流行病學(xué)的基本知識(shí)，有助于制定和采取有效的防治措施對(duì)花生白絹病進(jìn)行可持續(xù)性治理。本課題組(河南農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院花生病蟲(chóng)害課題組)于2019年對(duì)河南省5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)23個(gè)花生田塊的實(shí)地調(diào)查顯示，花生白絹病的發(fā)病率為3.6%～50.4%，與我國(guó)其他多個(gè)省份的報(bào)道基本一致[5-8]。調(diào)查還發(fā)現(xiàn)，夏播花生田塊白絹病的發(fā)病率均低于春播花生田塊，且前茬作物為小麥和大蒜的田塊發(fā)病率較低。ZEIDEN等[27]和MINTON等[28]也報(bào)道了花生與大蒜、小麥輪作可降低花生白絹病的發(fā)病率。但也有報(bào)道齊整小核菌可侵染小麥，引起麥苗猝倒、腐爛，不能作為花生輪作作物[29]。

本研究發(fā)現(xiàn)，河南省不同采樣地的28株花生白絹病菌株在菌落特征、菌絲生長(zhǎng)速率及菌核的數(shù)量、干質(zhì)量和直徑等形態(tài)學(xué)特征上存在著一定差異，說(shuō)明河南省5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)的花生白絹病菌菌株具有多樣性，這與宋萬(wàn)朵等[30]對(duì)我國(guó)12個(gè)省市的39株花生白絹病菌株形態(tài)學(xué)研究結(jié)果一致。LE等[11]研究發(fā)現(xiàn)，越南偏遠(yuǎn)地區(qū)的3個(gè)花生白絹病菌菌株產(chǎn)生的菌核顯著大于其他地區(qū)菌株產(chǎn)生的菌核，本研究也發(fā)現(xiàn)，新鄉(xiāng)菌株的菌核顯著大于其他地區(qū)菌株的菌核，推測(cè)花生白絹病菌的菌核大小可能與地理位置有關(guān)。此外，本研究對(duì)28株菌株的菌絲生長(zhǎng)速率、菌核數(shù)量、菌核干質(zhì)量和菌核直徑兩兩進(jìn)行相關(guān)性分析，發(fā)現(xiàn)菌株的菌核數(shù)量、干質(zhì)量和直徑之間存在顯著相關(guān)性，證實(shí)和擴(kuò)展了前人對(duì)齊整小核菌形態(tài)學(xué)特征中各測(cè)量值間關(guān)系的研究結(jié)果[7,31]。

早期關(guān)于白絹病菌MCG分析的研究表明，在一個(gè)特定的寄主或在一個(gè)有限的地理區(qū)域內(nèi)白絹病菌群體能夠被劃分為不同的MCG[17,31-32]；來(lái)自同一MCG的菌株在遺傳上比來(lái)自不同親和群的菌株更為相似[19,33-34]。本研究中,采自河南省5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)的28株花生白絹病菌株被劃分為5個(gè)MCG，進(jìn)一步表明這28株菌株間存在多樣性。其中，最大的MCG1中菌株分布于除駐馬店外的其他4個(gè)采樣地，表明MCG1中的菌株可能通過(guò)種子調(diào)運(yùn)、雨水、昆蟲(chóng)和農(nóng)事操作等方式在河南省多數(shù)花生產(chǎn)區(qū)已廣泛傳播，REMESAL等[32]對(duì)甜菜白絹病菌MCG的研究也得出了類(lèi)似的結(jié)論。宋萬(wàn)朵等[30]研究發(fā)現(xiàn)，駐馬店的7株花生白絹病菌株被劃分為6個(gè)親和群，而本研究中采自駐馬店的2株菌株被劃分為2個(gè)親和群，推測(cè)該區(qū)花生白絹病菌群體多樣性水平較高。值得注意的是，本研究中還發(fā)現(xiàn)MCG與菌株的地理位置似乎沒(méi)有相關(guān)性，與前人的研究結(jié)果一致[19,30]?；贛CG的測(cè)定結(jié)果，香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)(H)被廣泛用于測(cè)定病原菌群體多樣性水平的高低[25,31,35]。本研究中28株花生白絹病菌株總的香農(nóng)-威納多樣性指數(shù)(H)為1.13，與前人的研究結(jié)果相比[31-32,35]，其多樣性水平相對(duì)較低。

本研究結(jié)果表明，采自河南省5個(gè)花生主產(chǎn)區(qū)的28株白絹病菌株對(duì)SDHIs殺菌劑萎銹靈均很敏感，且不同菌株間敏感性無(wú)顯著差異，28株供試菌株對(duì)萎銹靈的敏感性呈單側(cè)峰曲線分布，未檢測(cè)到有敏感性明顯分化的群體存在，該結(jié)果能反映出田間自然情況下病原菌對(duì)SDHIs類(lèi)殺菌劑的敏感性特征。但由于SDHIs殺菌劑靶標(biāo)的作用位點(diǎn)單一，已被殺菌劑抗性行動(dòng)委員會(huì)(Fungicides Resistance Action Committee)歸為中等至高抗性風(fēng)險(xiǎn)[36]，且FRANKE等[12]報(bào)道了美國(guó)喬治亞州花生白絹病菌對(duì)SDHIs類(lèi)殺菌劑氟酰胺已產(chǎn)生抗藥性，因此，有必要進(jìn)一步加強(qiáng)河南省花生白絹病菌對(duì)萎銹靈的抗性監(jiān)測(cè)、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及治理措施研究。