姜 順

（長(zhǎng)安大學(xué)，陜西西安 710064）

釀酒酵母培養(yǎng)物中含有大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，其中豐富的菌體蛋白、維生素和大量的營(yíng)養(yǎng)因子能作為微生態(tài)制劑應(yīng)用到動(dòng)物生產(chǎn)中，以提高機(jī)體抗氧化和免疫力，產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益（楊東吉等，2020）。其作為一種新型的日糧添加劑被廣泛應(yīng)用（柴鴻勛等，2018；邵廣等，2011）。

賽馬運(yùn)動(dòng)作為一種精神文化活動(dòng)在世界范圍內(nèi)廣受推行。在賽馬運(yùn)動(dòng)中，馬匹的體況、體能與飼養(yǎng)管理體現(xiàn)了重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。相關(guān)研究表明，不同品種的賽馬在比賽前后的體能狀態(tài)、血液學(xué)狀態(tài)及耐受力不盡相同（楊煜林等，2020）。因此，如何通過(guò)飼養(yǎng)管理和添加功能性添加劑來(lái)提高賽馬體能成為當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。釀酒酵母對(duì)反芻動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育可起到較好的促進(jìn)作用，因此，本文研究不同水平的釀酒酵母探究對(duì)賽馬體能的影響，為賽馬能量補(bǔ)充劑的開(kāi)發(fā)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)馬匹由內(nèi)蒙古賽馬協(xié)會(huì)提供。釀酒酵母由內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)提供（含量≥98%）。將18匹健康且體況相近的蒙古馬隨機(jī)分為試驗(yàn)1、2組和對(duì)照組。其中試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中分別添加釀酒酵母培養(yǎng)物50和100 g/d），試驗(yàn)共持續(xù)20 d。1.2 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)階段所有馬匹均按照日常飼養(yǎng)管理方式進(jìn)行，訓(xùn)練時(shí)在圈舍外進(jìn)行活動(dòng)?；A(chǔ)日糧參考雷耿華的配方配制，所有試驗(yàn)馬匹均為自由飲水，采食方式按照馬場(chǎng)進(jìn)行，飼料配方如表1所示。

表1 補(bǔ)充料組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干水平）

1.3 指標(biāo)測(cè)定

1.3.1 抗氧化指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束后，使用一次性采血針對(duì)賽馬進(jìn)行靜脈采血10 mL，在室溫下靜置1 h后，3000 r/min離心10 min取上清。使用SOD、CAT、GSH-Px、MDA、GSH試劑盒檢測(cè)血清抗氧化水平，試劑盒購(gòu)于碧云天生物科技有限公司。

1.3.2 血液生化指標(biāo) 使用試劑盒檢測(cè)乳酸脫氫酶、肌酸激酶、肌紅蛋白水平，試劑盒購(gòu)于索萊寶、上海酶免；使用高效液相色譜檢測(cè)血液中氨基酸含量水平。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 試驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Excel記錄，通過(guò)SPSS 22.0軟件進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較。組間比較方差齊性時(shí)采用LSD模塊進(jìn)行檢驗(yàn)，若方差不齊時(shí)采用T3模塊進(jìn)行檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 釀酒酵母對(duì)賽馬抗氧化水平的影響 由表2可知，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)1、2組中的MDA水平明顯下降，SOD、CAT、GSH-Px水平抗氧化酶活性明顯升高（P＜0.05或P＜0.01），且呈現(xiàn)劑量依賴(lài)性。結(jié)果表明，釀酒酵母可以降低賽馬血清MDA含量，提高其抗氧化能力。

表2 釀酒酵母對(duì)賽馬抗氧化水平的影響（n=6）

2.2 釀酒酵母對(duì)賽馬血液生化指標(biāo)的影響 由表3可知，通過(guò)對(duì)賽馬日糧中添加釀酒酵母20 d后發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，試驗(yàn)組1、2組血清乳酸脫氫酶LDH、肌酸激酶CK和肌紅蛋白水平均有所升高；但僅有肌酸激酶和肌紅蛋白水平呈顯著差異（P＜0.05）。除此之外，在肌酸激酶水平變化中表現(xiàn)為釀酒酵母劑量依性。

表3 釀酒酵母對(duì)賽馬血液生化指標(biāo)的影響（n=6）

由表4可知，試驗(yàn)1、2組賽馬血液中甘氨酸、絲氨酸、瓜氨酸的含量顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）；且亮氨酸與組氨酸均高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05），可能是由于釀酒酵母飼喂時(shí)間過(guò)短造成。

表4 釀酒酵母對(duì)賽馬血液氨基酸含量的影響（n=6，單位：μmoL/L）

3 討論

3.1 不同水平釀酒酵母對(duì)賽馬抗氧化水平的影響 賽馬比賽后體內(nèi)的抗氧化平衡被打破，劇烈的運(yùn)動(dòng)增加了機(jī)體耗氧量，使得機(jī)體短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量的活性氧自由基，造成氧化損傷（Hood等，2018）。在氧化應(yīng)激條件下，細(xì)胞內(nèi)將存在較高濃度的自由基，這些自由基會(huì)損傷細(xì)胞內(nèi)（包括核酸、蛋白質(zhì)）的生物大分子物質(zhì)。除此之外，細(xì)胞內(nèi)線(xiàn)粒體的氧化反應(yīng)也會(huì)導(dǎo)致胞內(nèi)遺傳物質(zhì)突變及DNA損傷，形成大量的DNA單鏈（Sheweita等，2020）。當(dāng)DNA斷裂后會(huì)形成8-羥基脫氧鳥(niǎo)苷，且該物質(zhì)的含量可以直接反映出機(jī)體氧化應(yīng)激對(duì)DNA的損傷程度（Lee等，2018；高玉楠等，2012）。同時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)被氧化后將會(huì)改變細(xì)胞膜的流動(dòng)性及磷脂結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞功能減弱或喪失，無(wú)法及時(shí)進(jìn)行物質(zhì)交換，又會(huì)使細(xì)胞內(nèi)的ROS濃度進(jìn)一步增加，形成惡性循環(huán)。蛋白質(zhì)極易受到自由基和ROS的作用，從而產(chǎn)生各種不同的氧化產(chǎn)物。因此，要想提高賽馬體能，增強(qiáng)其運(yùn)動(dòng)能力，就要在日糧基礎(chǔ)上提高其抗氧化能力，減少賽馬劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)自由基對(duì)機(jī)體造成的氧化損傷。商健等（2020）研究發(fā)現(xiàn)，維生素E與硫酸鋅能明顯提高賽馬的運(yùn)動(dòng)能力，減少劇烈運(yùn)動(dòng)后對(duì)馬匹的氧化損傷。除此之外，馬騰等（2020）發(fā)現(xiàn)，甜菜粕能明顯改善賽馬運(yùn)動(dòng)后30min內(nèi)的心率水平，且能通過(guò)增強(qiáng)血清超氧化物歧化酶水平，降低丙二醛含量，減少氧化應(yīng)激，提高賽馬的運(yùn)動(dòng)性能。

在本研究中，與對(duì)照組相比，添加不同劑量的釀酒酵母可顯著降低賽后血清的丙二醛含量，并使血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和過(guò)氧化氫酶水平顯著提升，增強(qiáng)了機(jī)體抗氧化能力，減少氧化損傷。

3.2 不同水平釀酒酵母對(duì)賽馬血液生化指標(biāo)的影響 賽馬在劇烈運(yùn)動(dòng)前后其血液學(xué)指標(biāo)會(huì)發(fā)生明顯變化。血清乳酸脫氫酶、肌酸激酶水平均能反應(yīng)出在劇烈運(yùn)動(dòng)后，動(dòng)物機(jī)體運(yùn)動(dòng)能力狀況和恢復(fù)能力。其中肌酸激酶與能量代謝密切相關(guān)，能調(diào)控糖酵解途徑、線(xiàn)粒體呼吸鏈功能，為機(jī)體提供能量（劉振玉，1999）。因此，在正常狀態(tài)下，血清肌酸激酶水平能反應(yīng)肌細(xì)胞對(duì)運(yùn)動(dòng)能力的耐受度。有相關(guān)研究表明，肌細(xì)胞與血清中的肌酸激酶水平差異較大，血清肌酸激酶含量可以較為敏感的反應(yīng)出肌肉對(duì)外界刺激的承受能力（袁青，2007）。在本研究中，通過(guò)對(duì)賽馬飼喂釀酒酵母后發(fā)現(xiàn)，試驗(yàn)組中賽馬血清肌酸激酶、肌紅蛋白水平明顯升高，證明釀酒酵母可以增強(qiáng)賽馬體內(nèi)血清肌酸激酶含量，提高其能量利用率，從而增強(qiáng)賽馬的運(yùn)動(dòng)能力。

除此之外，賽馬運(yùn)動(dòng)前后血液氨基酸水平也能反應(yīng)出其體能恢復(fù)和運(yùn)動(dòng)能力。在高強(qiáng)度訓(xùn)練中，馬匹體能恢復(fù)速度與能量物質(zhì)的轉(zhuǎn)化效率也是反映出賽馬體能的重要指標(biāo)。有研究指出，在耐力賽馬運(yùn)動(dòng)中，高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)下，賽馬的能量來(lái)源主要從糖類(lèi)消化轉(zhuǎn)變?yōu)橹鞠?，因此，在日糧補(bǔ)充中應(yīng)添加較高濃度的脂肪物質(zhì)來(lái)提高能量利用，緩解賽馬在劇烈運(yùn)動(dòng)后的血糖不足情況（Laurence等，2019）。但Dunstan等（2019）研究發(fā)現(xiàn)，血液氨基酸水平也是影響賽馬體能恢復(fù)的重要因素，通過(guò)對(duì)賽馬長(zhǎng)期跟蹤8個(gè)月以上的結(jié)果顯示，甘氨酸是賽馬休息期水平含量最高的氨基酸。且也有研究結(jié)果表明，瓜氨酸、胱氨酸、絲氨酸和亮氨酸也可能是賽馬休息階段恢復(fù)體能的重要氨基酸。在本研究中發(fā)現(xiàn)，對(duì)蒙古馬添加釀酒酵母后，賽馬運(yùn)動(dòng)后試驗(yàn)組血液中甘氨酸、絲氨酸、瓜氨酸、組氨酸含量高于對(duì)照組，但僅有甘氨酸、絲氨酸、瓜氨酸具有顯著差異。結(jié)果證明，釀酒酵母能顯著增加賽馬休息期內(nèi)對(duì)體能恢復(fù)有利的氨基酸含量，從而增強(qiáng)賽馬的運(yùn)動(dòng)能力。

4 結(jié)論

在本試驗(yàn)中，在日糧中添加釀酒酵母能顯著增強(qiáng)蒙古賽馬血清抗氧化能力，降低丙二醛含量，提高血清肌酸激酶、肌紅蛋白水平和休息期內(nèi)必需氨基酸水平，從而提高賽馬體能，增強(qiáng)其運(yùn)動(dòng)能力。