陳大芳，陳光侯，李 平，唐明宗，申金容，曾 金，張?jiān)其?/p>

(貴州省種畜禽種質(zhì)測定中心，貴州 貴陽 550018)

近年來，由于大型規(guī)模化豬場在我省的大量興起，豬人工授精技術(shù)在養(yǎng)豬生產(chǎn)中得到廣泛推廣和應(yīng)用。種豬常溫精液產(chǎn)品是開展人工授精技術(shù)的基礎(chǔ)，規(guī)范種豬常溫精液的生產(chǎn)保存及檢測技術(shù)，建立建全精液生產(chǎn)、保存、發(fā)放等過程的質(zhì)量監(jiān)管，才能保證優(yōu)秀種公豬的精液品質(zhì)，提高母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)，讓更多的養(yǎng)豬生產(chǎn)者或養(yǎng)殖戶受益，推進(jìn)養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。2020年，貴州省種畜禽種質(zhì)測定中心首次承接全國畜牧總站農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管項(xiàng)目“種畜禽質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗(yàn)工作——《種豬常溫精液》”的監(jiān)督檢查任務(wù)，針對全省9個(gè)地、州、市部分種公豬站及種豬生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的種豬常溫精液進(jìn)行質(zhì)量檢測，抽檢過程中發(fā)現(xiàn)有的場(站)在常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)方面還存在不足。本文按照《豬常溫精液生產(chǎn)與保存技術(shù)規(guī)范》(GB/T 25172—2010)[1]要求及在生產(chǎn)中的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)對種豬常溫精液產(chǎn)品的生產(chǎn)檢測及輸配技術(shù)進(jìn)行介紹，供參考。

1 公豬選擇與調(diào)教

1.1 公豬選擇原精液是指采集后未經(jīng)稀釋處理的精液，把好原精液的質(zhì)量關(guān)是生產(chǎn)常溫精液的前提，選好種公豬是生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)原精液的基礎(chǔ)[2]。選擇生產(chǎn)原精液的公豬要求品種特征明顯，睪丸對稱且較顯露，包皮不過長、不積尿，四肢開張有力，特別是后肢要健壯有力，性欲旺盛(比較騷動(dòng)、陰莖時(shí)常伸出)，能爬跨，眼亮有神，膘情適中，這樣的公豬利于調(diào)教采精。而眼無神、偏肥或偏瘦、嗜睡的公豬通常性欲差，不利于采精。

1.2 公豬調(diào)教種公豬一般在8月齡，體重100 kg左右開始調(diào)教。過早調(diào)教其生理未發(fā)育成熟，體形較小，爬跨困難，會(huì)使其產(chǎn)生畏懼心理，對調(diào)教造成不良影響；過晚調(diào)教則體格過大、性情暴躁，不易聽從調(diào)教員的指揮，嚴(yán)重的會(huì)攻擊調(diào)教人員，調(diào)教難度增加。調(diào)教時(shí)可讓待訓(xùn)公豬隔欄觀看采精公豬的爬跨和采精過程，使其有一個(gè)感觀的認(rèn)識(shí)。調(diào)教前收集發(fā)情母豬尿液噴灑于假母豬臺(tái)上，調(diào)教時(shí)把發(fā)情母豬趕入鄰近調(diào)教室的圈舍，使種公豬產(chǎn)生交配欲望，誘導(dǎo)其爬跨假畜臺(tái)。經(jīng)過2～3 d訓(xùn)練，即可正式調(diào)教種公豬爬跨假母豬臺(tái)。種公豬初次調(diào)教成功后，每隔1～2 d按照初次調(diào)教的方法進(jìn)行再次調(diào)教，經(jīng)過 7 d左右的調(diào)教就會(huì)形成固定的條件反射進(jìn)行正常采精。

2 精液生產(chǎn)及保存

2.1 精液采集常用徒手采精法。采精前對采精器皿進(jìn)行嚴(yán)格清洗、消毒、干燥。采精時(shí)手要進(jìn)行嚴(yán)格清洗、消毒并戴上無菌橡膠手套，待公豬爬上假母豬臺(tái)后采精員蹲于假母豬臺(tái)的左后方，當(dāng)公豬伸出陰莖時(shí)即用右手(手心向下)握住公豬陰莖前端的螺旋部，以拇指頂住陰莖的前端，手握松緊適宜，隨公豬陰莖抽動(dòng)時(shí)順勢把陰莖全部拉出包皮外。公豬射精時(shí)將拇指與食指稍微張開，露出陰莖前端，讓精液射出。先射出的精液易被污染不予收集，待射出乳白色精液時(shí)用左手持集精瓶在陰莖前端收集精液，當(dāng)排出膠樣物時(shí)停止采集。采精量：本地品種100～200 mL，國外引進(jìn)品種200～400 mL。采精頻率：每周2～3次。

2.2 精液稀釋精液采集后要盡快稀釋，放置時(shí)間不宜超過15 min，采用等溫(36～38 ℃)稀釋，高低溫差不得超過1 ℃。稀釋進(jìn)行時(shí)將備好的稀釋液(按配方配制或成品)緩慢加入精液中，輕輕搖動(dòng)混合均勻，靜置5 min后再作精子活力檢查。稀釋液有多種配方或產(chǎn)品，如“全能健”(長效)、“豬博士”(長效)、“紅嘉昊”(長效)等，短效稀釋液一般要求在3 d內(nèi)使用，長效稀釋液可保存5～7 d。

2.3 精液分裝精液分裝采用袋、瓶或管裝(一次性塑料制品要求對精子無毒害作用)，以每劑80～100 mL為單位裝入袋、瓶或管中，排出空氣后密封，包裝上標(biāo)明“產(chǎn)品名稱、生產(chǎn)單位、生產(chǎn)日期、批號(hào)、品種、耳號(hào)、保質(zhì)期”。

2.4 精液保存分裝好的精液置于22～25 ℃環(huán)境下1～2 h后再平放入16～18 ℃恒溫箱內(nèi)避光保存，也可用12～15層紗布(或干毛巾)包嚴(yán)直接放入16～18 ℃恒溫箱內(nèi)。保存的精液4～8 h搖動(dòng)1次并記錄，超過保質(zhì)期的精液不能使用和出售。

2.5 精液運(yùn)輸精液應(yīng)置于16～18 ℃的專用運(yùn)輸箱內(nèi)避光運(yùn)輸，運(yùn)輸過程中避免強(qiáng)烈震動(dòng)和碰撞。

3 精液檢測指標(biāo)

3.1 外觀、氣味肉眼觀察外觀應(yīng)為“呈乳白色，均勻一致”，鼻嗅氣味應(yīng)為“略帶腥味，無異味”。

3.2 采精量采用稱量法計(jì)算采精量(1 g≈1 mL)。

3.3 精子活力取中層精液15～25 μL置于200～400倍顯微鏡下觀察精子活力，每份精液取樣2次，每個(gè)樣品觀察3個(gè)視野，計(jì)算平均值。

3.4 精子密度采用精子密度儀或可見分光光度計(jì)法測定，并定期用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板法校正。

3.5 精子畸形率通常采用伊紅或姬姆薩染色法檢查，在400～600倍顯微鏡下觀察計(jì)數(shù)，左、中、右3個(gè)視野中的精子數(shù)不少于200個(gè)。也可采用相差顯微鏡直接觀察。每2個(gè)月抽檢1次。自檢能力不足時(shí)建議定期送至有資質(zhì)的相關(guān)單位檢測。

3.6 細(xì)菌數(shù)按《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 菌落總數(shù)測定》(GB 4789.2—2016)規(guī)定執(zhí)行，每2個(gè)月抽檢1次。自檢能力不足時(shí)建議定期送至有資質(zhì)的相關(guān)單位檢測)

4 精液品質(zhì)檢測

4.1 原精液品質(zhì)檢測原精液品質(zhì)檢測樣品各項(xiàng)指標(biāo)判定標(biāo)準(zhǔn)見表1。只有各項(xiàng)檢測數(shù)據(jù)達(dá)標(biāo)才能稀釋成常溫精液。

表1 原精液品質(zhì)指標(biāo)檢測[1]

4.2 稀釋頭份稀釋后的精液按每頭份劑量(瓶)80 mL，總精子數(shù)30×108個(gè)進(jìn)行分裝。計(jì)算公式： 稀釋頭份=采精量×原精子活力×精子密度÷總精子數(shù)。稀釋液劑量=稀釋頭份×每頭份劑量-采精量。稀釋比例=采精量∶稀釋液。示例見表2。

表2 原精液稀釋頭份示例

4.3 常溫精液品質(zhì)檢測常溫精液是原精液經(jīng)稀釋后常溫保存的精液，要求稀釋后精液(即常溫精液)指標(biāo)達(dá)到表3要求才能作為產(chǎn)品銷售和使用。

表3 稀釋后精液產(chǎn)品質(zhì)量檢測[1]

5 輸配母豬

5.1 發(fā)情鑒定母豬開始發(fā)情時(shí)興奮性逐漸增加，表現(xiàn)為頻繁走動(dòng)，不安，食欲下降，外陰發(fā)紅微腫，并流出少量透明黏液，此后性欲旺盛，爬欄、爬跨其他母豬或接受其他母豬爬跨，自動(dòng)接近其他公豬。當(dāng)陰戶紅腫達(dá)高峰時(shí)流出白色濃稠帶絲狀黏液，用力按壓母豬腰部表現(xiàn)靜立、兩耳豎立、尾向上翹，此時(shí)是對母豬進(jìn)行配種的最佳時(shí)期。

5.2 人工輸配輸精前先將發(fā)情母豬陰部清洗干凈，然后在輸精管頭上涂潤滑液，用手把陰唇分開，將輸精管略向上呈45°角插入陰道，再邊旋轉(zhuǎn)輸精管邊插入，慢慢平直推進(jìn)，經(jīng)抽送2～3次，直至不能前進(jìn)為止，判斷輸精管已進(jìn)入子宮內(nèi)，然后向外拉出一點(diǎn)，借助壓力或推力緩慢注入精液，當(dāng)有阻力或精液倒流時(shí)可將輸精管抽送、旋轉(zhuǎn)再注入精液。如果采用自流式輸精則應(yīng)將精液高置于母豬身體，使精液自動(dòng)流入。正常的輸精時(shí)間應(yīng)和自然交配一樣，一般為5～10 min。為了防止精液倒流，輸完精后不要急于拔出輸精管，將精液瓶或袋取下，將輸精管尾部打折，這樣既可防止空氣進(jìn)入，又能防止精液倒流。輸入深度：初產(chǎn)母豬15～20 cm，經(jīng)產(chǎn)母豬20～25 cm。

6 小結(jié)

豬常溫精液的生產(chǎn)與保存技術(shù)在養(yǎng)豬生產(chǎn)過程中被廣泛應(yīng)用，豬常溫精液產(chǎn)品的生產(chǎn)涉及種公豬精液的采集、稀釋、分裝、保存、檢測等多個(gè)環(huán)節(jié)[3]。抓好常溫精液產(chǎn)品的生產(chǎn)環(huán)節(jié)，必須加強(qiáng)種公豬選擇，做好種公豬飼養(yǎng)管理，建立健全精液生產(chǎn)、保存、發(fā)放等過程的質(zhì)量監(jiān)管，才能充分發(fā)揮優(yōu)秀種公豬的種用價(jià)值，提高母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)，讓更多的養(yǎng)豬生產(chǎn)者或養(yǎng)殖戶受益，助推養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。