馬馳，黃楊威，趙學(xué)清，林羽，徐偉

(1.福建中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，福建 福州 350122;2.福建省微生物研究所，福建 福州 350007)

免疫抑制劑嗎替麥考酚酯(Morphine Mycophenolate，1) 首次于1995年在美國(guó)上市，1997年在國(guó)內(nèi)上市。本品在體內(nèi)脫酯化后形成具有免疫抑制活性的代謝產(chǎn)物麥考酚酸。本品主要用于腎臟、心臟移植后器官排斥的預(yù)防。其作用機(jī)制是選擇性抑制與排斥反應(yīng)有關(guān)的T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞，并且有抑制動(dòng)脈平滑肌增生的作用，后者是目前其他免疫抑制劑所沒(méi)有的[1-2]。

目前文獻(xiàn)報(bào)道嗎替麥考酚酯的合成工藝主要有3種：①直接酯化法[3-5]即麥考酚酸在甲苯、二甲苯、丁醚等高沸點(diǎn)溶劑中與N-羥乙基嗎啉經(jīng)共沸脫水，生成嗎替麥考酚酯，此法反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)(通常需60～120 h)，產(chǎn)物顏色深，需要脫色及一系列的后處理；②生物酶法[6-7]，利用酶催化麥考酚酸與N-羥乙基嗎啉合成酯，缺點(diǎn)是反應(yīng)時(shí)間較長(zhǎng)、收率較低、有大量原料殘留，且生物發(fā)酵的廢水量也很大；③采用間接酯化法[8]，麥考酚酸與氯化亞砜(或草酰氯)生成酰氯，再與N-羥乙基嗎啉在有機(jī)堿存在下縮合成酯，此法缺點(diǎn)在于需要兩步合成步驟，副產(chǎn)物酸性氣體會(huì)對(duì)設(shè)備產(chǎn)生腐蝕，“三廢”難處理，反應(yīng)生成的雜質(zhì)較多。

上述酸性酯化的方法①和②中均產(chǎn)生大量的分子內(nèi)環(huán)合物(雜質(zhì) H)和雙鍵幾何構(gòu)型翻轉(zhuǎn)的異構(gòu)體(雜質(zhì) C)[9]；此外方法1由于長(zhǎng)時(shí)間的加熱，不僅使物料變黑，還會(huì)產(chǎn)生大量的N-氧化物雜質(zhì)。

光延反應(yīng)(Mitsunobu反應(yīng))是由日本化學(xué)家光延旺洋(Mitsunobu)等人于1967年發(fā)現(xiàn)，醇羥基在偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)和三苯基膦(Ph3P)的作用下經(jīng)由SN2親核試劑取代，同時(shí)跟羥基所連的碳原子構(gòu)型發(fā)生翻轉(zhuǎn)(瓦爾登翻轉(zhuǎn))生成多種化合物，如酯、胺等。此反應(yīng)的特點(diǎn)是條件溫和，產(chǎn)率高并帶有構(gòu)型翻轉(zhuǎn)。我們成功利用Mitsunobu反應(yīng)來(lái)制備嗎替麥考酚酯(見(jiàn)圖1)。

圖1 嗎替麥考酚酯(1)的合成路線

1 儀器設(shè)備及試劑

核磁共振儀：Bruker 500 MHz(11.7T)/AVANCE Ⅲ 500；熔點(diǎn)儀：Buchi Melting Point M-560。N-羥乙基嗎啉、麥考酚酸為工業(yè)級(jí)原料；偶氮二甲酸二異丙酯(DIAD)、三苯基膦(Ph3P)及其他溶劑均為試劑公司購(gòu)買(mǎi)。

2 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

在N2保護(hù)下，于三頸瓶中加入Ph3P (32.8 g，125 mmol)、N-羥乙基嗎啉(13.1 g，100 mmol)溶于四氫呋喃(200 mL)后，冷卻至-10 ℃，控制溫度不超過(guò)0 ℃，在20 min內(nèi)加入DIAD(28.3 g，140 mmol)的四氫呋喃(40 mL)溶液，加畢黃色溶液繼續(xù)攪拌10 min，再將此反應(yīng)物料經(jīng)保溫的鋼針雙通管由N2壓入預(yù)冷的麥考酚酸(33.6 g，105 mmol)的四氫呋喃(50 mL)溶液中，加畢于0 ℃以下攪拌4 h。將反應(yīng)物料倒入水(200 mL)中，攪拌5 min，分除水相，有機(jī)相濃縮，殘留物溶于二氯甲烷(200 mL)，用1 mol·L-1鹽酸(120 mL)溶液萃取一次，鹽酸溶液接著用二氯甲烷(50 mL)洗一次。水相以5 mol·L-1氫氧化鈉溶液調(diào)pH至8～9，有較多油狀物析出，依次用二氯甲烷(80 mL×2)二氯甲烷萃取，合并有機(jī)相，無(wú)水硫酸鈉干燥，在加活性炭脫色，過(guò)濾，濃縮得微紫色油狀物，純度：97.26%(HPLC條件及方法見(jiàn)藥典[8])。

趁熱立即在上述的淡紫色油狀液體中加入無(wú)水乙醇50 mL，振搖成均相，冷卻，于10 ℃左右析晶4 h，抽濾，以冷無(wú)水乙醇40 mL洗滌，得嗎替麥考酚酯(1)。白色粉末，36.9 g，收率81.2%(以麥考酚酸計(jì))，純度：99.78%；

1H-NMR(600 MHz,CDCl3) δ 7.97(s,1H),5.24(ddd,J=8.2,5.8,1.2 Hz,1H),5.21(s,2H),4.16(t,J=5.8 Hz,2H),3.78(s,3H),3.73-3.70(m,4H),3.39(d,J=6.9 Hz,2H),2.60(t,J=5.8 Hz,2H),2.52(s,4H),2.45-2.40(m,2H),2.31(t,J=7.7 Hz,2H),2.16(s,3H),1.81(s,3H);13C-NMR(151 MHz,CDCl3) δ 173.21,172.79,163.60,153.65,144.10,133.96,122.86,122.20,116.63,106.39,69.95,66.86,61.72,61.02,57.04,53.93,34.65,33.00,22.65,16.09,11.55。與文獻(xiàn)一致[12]。

3 結(jié)論

該方法反應(yīng)條件溫和、迅速，此堿性條件下的酯化，可避免酸性和長(zhǎng)時(shí)間高溫條件下的雜質(zhì) H、C及 N-氧化物雜質(zhì)。通常情況下，Mitsunobu 反應(yīng)的副產(chǎn)物(Ph3PO)及未反應(yīng)的 Ph3P 等有機(jī)雜質(zhì)，難以除去，常常需要柱層析[10]，最新有添加 ZnCl2除 Ph3PO的方法[11]。我們發(fā)現(xiàn)此產(chǎn)物1易與鹽酸成鹽后而溶于水，而未反應(yīng)的麥考酚酸、過(guò)量的 Ph3P、Ph3PO 等副產(chǎn)物或雜質(zhì)則可留在有機(jī)相(如二氯甲烷)中，利用酸堿處理很易將有機(jī)雜質(zhì)去除，此工藝簡(jiǎn)易、雜質(zhì)少、環(huán)保、收率高(81%)，是一種適合工業(yè)化生產(chǎn)的綠色高效方法。