孫川喻 郝超寶 王宏偉

日照市人民醫(yī)院1臨床營養(yǎng)科，2神經(jīng)外科，山東日照 276800

隨著生活水平的提升，飲食結(jié)構(gòu)、生活方式的改變，高脂血癥的發(fā)病率逐年攀升。高血脂癥是指人體脂質(zhì)代謝障礙導(dǎo)致的血漿膽固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白膽固醇和(或)低密度脂蛋白膽固醇等異常的現(xiàn)象，與心腦血管疾病、動(dòng)脈粥樣硬化等的發(fā)生密切相關(guān)[1]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全世界每年死于高脂血癥及其相關(guān)疾病的人數(shù)近2000萬，流行病學(xué)研究顯示相關(guān)死亡人數(shù)將越來越多，可見高脂血癥嚴(yán)重危害居民生命健康。臨床實(shí)踐表明，單純應(yīng)用藥物治療高脂血癥難以達(dá)到理想的效果，且長期藥物治療對(duì)人體有一定的毒副作用。因此，應(yīng)用藥食同源植物調(diào)節(jié)血脂具有較好的市場價(jià)值和發(fā)展前景。有研究表明，許多天然中草藥在調(diào)控血脂方面具有顯著的效果和極強(qiáng)的優(yōu)勢，且食用安全、不良反應(yīng)小、資源廣泛、成本低廉，可用于降血脂保健食品的開發(fā)。為此，本研究以葛根提取物、絞股藍(lán)提取物與紅曲配伍制成膠囊，觀察其對(duì)高脂血癥大鼠血脂的影響，以期為開發(fā)安全有效的降血脂保健食品提供參考和依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 樣品

受試膠囊由山東蓬萊深?yuàn)W生物科技研究所提供，由葛根提取物、絞股藍(lán)提取物、紅曲混合制成(其中含葛根素1.8%、總皂苷1.1%、洛伐他丁0.16%)，人體每日推薦量為2.4 g/60 kg·bw，即每日40 mg/kg·bw(受試物相當(dāng)于生藥用量：葛根4.82 g/d、絞股藍(lán)2.45 g/d、紅曲0.73 g/d)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供：SPF級(jí)健康SD雄性大鼠40只，體質(zhì)量150～183 g，生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(京)2005-0013。飼養(yǎng)環(huán)境為屏障級(jí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK(魯)2008-0005。

1.3 高脂飼料

由基礎(chǔ)飼料78.8%、膽固醇1%、豬油10%、蛋黃粉10%、膽鹽0.2%，加入適量的酪蛋白、磷酸氫鈣、石粉、食鹽等組成，各項(xiàng)指標(biāo)達(dá)到維持飼料的國家標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)準(zhǔn)飼料由山東省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào)：SCXK(魯)2004-0014號(hào)。

1.4 主要儀器

HITACHI7180型全自動(dòng)血液生化儀(日本日立公司)，CP225D電子天平(德國Sartorius公司)，YP2001N電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)等。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

以基礎(chǔ)飼料喂飼大鼠7 d后，編號(hào)稱重，取尾靜脈血，測定總膽固醇(total cholesterol，TC)、三酰甘油(triglyceride，TG)、高密度脂蛋白膽固醇(high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C)水平，然后將大鼠隨機(jī)分為4組：高脂模型對(duì)照組，低、中、高劑量受試物組(200 mg/kg·bw、400 mg/kg·bw、800 mg/kg·bw，分別相當(dāng)于人體推薦量的5倍、10倍、20倍)。自正式實(shí)驗(yàn)開始，各組換用高脂飼料喂養(yǎng)。高脂模型對(duì)照組喂飼高脂飼料以誘導(dǎo)高脂血癥模型大鼠，連續(xù)喂養(yǎng)30 d后，測定血清中的TC、TG含量。如果造模干預(yù)后大鼠血清TC、TG含量顯著高于干預(yù)前，表明高脂血癥大鼠造模成功[2]。各劑量組在喂飼高脂飼料的同時(shí)給予不同濃度的受試物，受試物采用0.5%的羧甲基纖維素鈉配制，灌胃體積為10 mL/kg·bw，低、中、高劑量組的受試物濃度分別為20.0 mg/mL、40.0 mg/mL、80.0 mg/mL；模型對(duì)照組則給予同等體積的0.5%羧甲基纖維素鈉灌胃；1次/d，連續(xù)給予30 d，每15 d測量1次體質(zhì)量。30 d后取大鼠尾靜脈血測定血清TC、TG、HDL-C水平，采血前禁食12 h。

1.6 評(píng)價(jià)依據(jù)

按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》[3]中降血脂檢測評(píng)價(jià)方法進(jìn)行評(píng)定：①各劑量組與模型對(duì)照組比較，任一劑量組血清TC降低，且任一劑量組血清TG降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)各劑量組血清HDL-C不顯著低于模型對(duì)照組，可判定該受試樣品輔助降低血脂動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。②各劑量組與模型對(duì)照組比較，任一劑量組血清TC降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)各劑量組血清TG不顯著高于模型對(duì)照組，各劑量組血清HDL-C不顯著低于模型對(duì)照組，可判定該受試樣品輔助降低膽固醇動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。③各劑量組與模型對(duì)照組比較，任一劑量組血清TG降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，同時(shí)各劑量組血清TC不顯著高于模型對(duì)照組，血清HDL-C不顯著低于模型對(duì)照組，可判定該受試樣品輔助降低三酰甘油動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。

1.7 數(shù)據(jù)處理與分析

2 結(jié)果

2.1 受試物對(duì)大鼠體質(zhì)量的影響

大鼠初始體質(zhì)量各組間比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。經(jīng)口給予大鼠不同劑量的受試物30 d后，模型對(duì)照組和各劑量組體質(zhì)量比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組大鼠體質(zhì)量變化

2.2 受試物對(duì)大鼠血脂的影響

給予高脂飼料后，模型對(duì)照組大鼠血清TC、TG均明顯升高(P<0.01)，HDL-C明顯降低(P<0.01)。給藥結(jié)束后，與模型對(duì)照組比較，中劑量組大鼠血清TG水平顯著降低；高劑量組血清TC和TG均降低，且HDL-C水平升高，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 受試物對(duì)高血脂大鼠血脂水平的影響

此外，與模型對(duì)照組相比，低、中、高劑量組大鼠血清TC下降百分率分別為5.31%、8.38%、16.48%，血清TG下降百分率分別為6.54%、23.53%、28.10%，血清HDL-C上升百分率分別為0.03%、0.10%、0.17%。見表3。

表3 各組血清TC、TG、HDL-C的變化率

3 討論

中醫(yī)理論認(rèn)為高脂血癥是脾虛痰盛、肝脾不調(diào)所致，飲食不節(jié)，恣食肥甘導(dǎo)致痰積血瘀，化為脂濁。而高血脂既是病理產(chǎn)物，亦是致病因素。高脂血癥會(huì)引起血液黏稠度升高，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化，導(dǎo)致腦中風(fēng)和冠心病等的發(fā)生，故降血脂對(duì)機(jī)體健康十分重要。臨床上雖有較多治療高脂血癥的西藥，但大都具有毒副作用，運(yùn)用中藥等天然藥物調(diào)節(jié)血脂有著化學(xué)合成物不可比擬的優(yōu)勢。因此，為控制心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展，選擇天然降血脂藥食同源植物來調(diào)節(jié)血脂逐漸成為趨勢，也是今后研究的熱點(diǎn)[4-5]，這符合中醫(yī)“未病先防、即病防變”的治療原則。本研究經(jīng)口給予實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠不同劑量受試物30 d后，高劑量組大鼠血清TG、TC顯著下降且HDL-C升高，證明高劑量組葛根提取物、絞股藍(lán)提取物與紅曲配伍制劑具有較好的降血脂作用。

葛根中的主要有效成分為葛根素，研究顯示葛根素有助于降低TC及動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)，其機(jī)制可能與其增加膽汁酸的排出、抑制膽固醇在腸內(nèi)的吸收以及促進(jìn)膽固醇的降解和排泄等有關(guān)；葛根素還能抑制內(nèi)源性膽固醇及TG的合成，調(diào)節(jié)膽固醇代謝轉(zhuǎn)化酶CYP7A1的分泌[6]，促進(jìn)膽固醇在肝臟中轉(zhuǎn)化為膽酸，減少脂肪在冠狀動(dòng)脈壁沉積，從而減少動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生[7]。另外，葛根素還能顯著上調(diào)血漿一氧化氮水平及主動(dòng)脈內(nèi)皮一氧化氮合酶活性[8]，提示葛根素有助于改善動(dòng)脈粥樣硬化血管舒張反應(yīng)。此外，葛根素還有較強(qiáng)的清除自由基能力，能提高體內(nèi)超氧化物歧化酶、過氧化氫酶和過氧化物酶活性，并降低丙二醛含量，間接抑制動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)展[9]。大量研究顯示，絞股藍(lán)中的皂苷、紅曲中的洛伐他汀可抑制脂肪細(xì)胞的合成及體內(nèi)膽固醇的產(chǎn)生，修護(hù)肝臟損傷，從而起到改善脂質(zhì)代謝紊亂的作用[10-11]。另有文獻(xiàn)報(bào)道，絞股藍(lán)的活性物質(zhì)能減少膽固醇在動(dòng)脈壁的沉積及脂質(zhì)過氧化物的生成，延緩動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展[12]。

在傳統(tǒng)中醫(yī)藥領(lǐng)域，葛根、絞股藍(lán)、紅曲等被廣泛用于輔助降血脂。本研究初步探討了葛根提取物、絞股藍(lán)提取物與紅曲配伍制成的膠囊制劑對(duì)實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠的降血脂作用。由于葛根、絞股藍(lán)和紅曲的藥食同源性，對(duì)于高血脂者，提倡經(jīng)常攝入適量的葛根、絞股藍(lán)和紅曲制品，可在一定程度上改善血脂水平。另外，本次研究雖證實(shí)葛根提取物、絞股藍(lán)提取物與紅曲配伍制劑具有降血脂作用，但關(guān)于其配伍作用機(jī)理的研究仍相對(duì)表淺，其量效關(guān)系、構(gòu)效關(guān)系尚不明確。因此，繼續(xù)開展有關(guān)基礎(chǔ)研究及臨床試驗(yàn)來深入探討葛根提取物、絞股藍(lán)提取物與紅曲的配伍效應(yīng)與作用機(jī)理顯得十分必要。