王麗麗 徐曙光 章潔琳 林蘇瑜

宮頸上皮內(nèi)病變是婦科常見疾病,根據(jù)2014 版WHO 分類,分為LSIL 和HSIL。其中LSIL 包括低度上皮內(nèi)瘤變(CINⅠ)、輕度不典型增生和扁平濕疣等。HSIL 包括中度上皮內(nèi)瘤變(CINⅡ)、高度上皮內(nèi)瘤變(CINⅢ)及原位癌。宮頸上皮內(nèi)病變是與宮頸癌緊密聯(lián)系的一組癌前病變的統(tǒng)稱［1］,其為宮頸癌防治的重要階段。目前宮頸上皮內(nèi)病變的診斷和分級(jí)依然存在諸多主觀因素,進(jìn)而影響臨床治療方案［2］。有研究表明,P16 基因又叫MTS 基因,是抗癌基因,其是細(xì)胞周期中的一種基本基因,直接參與細(xì)胞周期的調(diào)節(jié),P16基因一旦失控,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞惡性增殖,導(dǎo)致惡性腫瘤發(fā)生［3］。Ki67 是一種與增殖相關(guān)的核蛋白,表達(dá)于細(xì)胞周期的G1、S、G2和M 期,是顯示腫瘤細(xì)胞增殖的重要標(biāo)記之一［4］。P16 和Ki67 的陽性表達(dá)對(duì)診斷宮頸上皮內(nèi)病變有指導(dǎo)意義。同時(shí)又有研究發(fā)現(xiàn),陰道鏡檢查可以獲取患者活組織,從而較準(zhǔn)確地診斷宮頸病變,同時(shí)還可以排除癌前病變［5］。本文通過分析P16 和Ki67 檢測及陰道鏡檢查對(duì)宮頸上皮內(nèi)病變的診斷情況,旨在為臨床早期判斷和治療宮頸上皮內(nèi)病變提供參考。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2019 年1 月～2020 年1 月在江門市婦幼保健院250 例經(jīng)組織活檢病理學(xué)診斷為慢性宮頸炎或?qū)m頸上皮內(nèi)病變的患者,患者年齡24～65 歲,平均年齡(43.4±7.6)歲；其中將60 例確診為慢性宮頸炎的患者作為對(duì)照組,將190 例確診為宮頸上皮內(nèi)病變的患者作為觀察組。對(duì)照組患者年齡24～63 歲,平均年齡(42.6±7.2)歲。觀察組患者年齡26～65 歲,平均年齡(44.7±7.4)歲。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。組織病理學(xué)結(jié)果按參照2014 版WHO 診斷標(biāo)準(zhǔn),均由病理科一位主治醫(yī)師及一位副主任醫(yī)師診斷。

1.2方法

1.2.1檢測儀器和試劑 即用型單克隆抗體P16、即用型單克隆抗體Ki67、SP 試劑盒及及二氨基聯(lián)苯胺(DAB)顯色劑均購自福建邁新公司。陰道鏡為飛利浦金科威SLC-3000 電子陰道鏡數(shù)字成像系統(tǒng)。

1.2.2P16 和Ki67 檢測 患者的活檢組織均由10%中性福爾馬林固定,石蠟包埋,4 μm 厚連續(xù)切片,按照試劑盒說明書進(jìn)行SP 法P16 和Ki-67 的免疫組化染色。P16 表達(dá)定位在細(xì)胞核和(或)細(xì)胞質(zhì)。鱗狀上皮無表達(dá)時(shí)為(-),僅少數(shù)散在上皮細(xì)胞陽性時(shí)為局灶陽性(+),10%～90%的上皮細(xì)胞表達(dá)時(shí)為部分陽性(++),≥90%的上皮表達(dá)時(shí)為彌漫陽性(+++)。Ki67 表達(dá)定位在細(xì)胞核。陽性細(xì)胞僅位于基底層為(-),陽性細(xì)胞位于上皮內(nèi)下1/3 層為(+),陽性細(xì)胞位于上皮內(nèi)下2/3 層為(++),陽性細(xì)胞位于上皮內(nèi)全層為(+++)。

1.2.3陰道鏡檢查 患者的陰道鏡檢查按照2011 版的國際子宮頸病理與陰道鏡聯(lián)盟協(xié)會(huì)術(shù)語評(píng)價(jià)宮頸情況。正常陰道鏡形態(tài)及慢性炎癥改變?yōu)?-),低級(jí)別病變形態(tài)為(+),高級(jí)別病變形態(tài)為(++),可疑癌(+++),其他征象(0)。所有結(jié)果均由宮頸?？贫桓敝魅吾t(yī)師診斷。

1.3觀察指標(biāo) 比較兩組P16、Ki-67 的表達(dá)情況及陰道鏡檢查情況。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差 ()表示,采用t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1兩組P16 的表達(dá)情況比較 對(duì)照組的P16 陽性率為6.67%(4/60),觀察組的P16 總陽性率為84.74%(161/190)；觀察組的P16 總陽性率明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組LSIL 患者的P16陽性率78.79%(33/57)明顯低于HSIL 患者的96.24%(128/133),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組P16 的表達(dá)情況比較(n)

2.2兩組Ki-67 的表達(dá)情況比較 對(duì)照組的Ki-67陽性率為15.00%(9/60),觀察組的Ki-67 總陽性率為92.11%(175/190)；觀察組的Ki-67 總陽性率明顯高于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組LSIL患者的Ki-67 陽性率77.19%(44/57)明顯低于HSIL 患者的98.50%(131/133),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組Ki-67 表達(dá)情況比較(n)

2.3兩組陰道鏡檢查情況比較 對(duì)照組的陰道鏡檢查陽性率為18.33%(11/60),觀察組的陰道鏡檢查總陽性率為92.11%(175/190)；觀察組的陰道鏡檢查總陽性率明顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。觀察組LSIL 患者陰道鏡檢查陽性率77.19%(44/57)明顯低于HSIL 患者的98.50%(131/133),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表3。

表3 兩組陰道鏡檢查情況比較(n)

3 討論

宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤。據(jù)世界范圍統(tǒng)計(jì),其發(fā)病率在女性惡性腫瘤中居第4 位,僅次于乳腺癌、結(jié)直腸癌和肺癌［6］。而宮頸上皮內(nèi)病變是宮頸癌的癌前病變,所以明確診斷宮頸上皮內(nèi)病變對(duì)患者至關(guān)重要。

P16 基因作為抗癌基因之一,其產(chǎn)物可以直接作用于細(xì)胞周期中抑制增殖。如果由于某些原因使P16 基因發(fā)生變化,會(huì)引起細(xì)胞分裂加速,導(dǎo)致惡性增殖［7］。在本次研究中,觀察組的P16 總陽性率84.74%明顯高于對(duì)照組的6.67%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組LSIL 患者的P16 陽性率78.79%明顯低于HSIL患者的96.24%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。因此推測,宮頸上皮內(nèi)病變與P16 有聯(lián)系,P16 的表達(dá)為宮頸上皮內(nèi)病變的危險(xiǎn)因素之一,并且可以隨著宮頸上皮內(nèi)病變的程度加深而升高。Ki-67 為細(xì)胞增殖標(biāo)記之一,表達(dá)在所有活動(dòng)的細(xì)胞周期(G1、S、G2和有絲分裂期)中［8］。本次研究結(jié)果顯示,觀察組的Ki-67 總陽性率92.11%明顯高于對(duì)照組的15.00%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組LSIL 患者的Ki-67 陽性率77.19%(44/57)明顯低于HSIL 患者的98.50%(131/133),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。由此推測,Ki-67 的顯色程度隨著宮頸上皮內(nèi)病變的級(jí)別提高而提高。

目前陰道鏡已成為宮頸癌防治不可或缺的重要組成部分。本次研究結(jié)果顯示,觀察組的陰道鏡檢查總陽性率92.11%明顯高于對(duì)照組的18.33%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。觀察組LSIL 患者陰道鏡檢查陽性率77.19%(44/57)明顯低于HSIL 患者的98.50%(131/133),差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。陰道鏡檢查結(jié)果的陽性率隨著宮頸上皮內(nèi)病變的程度的增加而提高。

綜上所述,P16 和Ki-67 檢測有助于宮頸上皮內(nèi)病變的判斷,同時(shí)在高級(jí)別上皮內(nèi)病變中表現(xiàn)更加顯著。P16 和Ki67 聯(lián)合檢測可以作為診斷宮頸上皮內(nèi)病變的有效指標(biāo),陰道鏡檢查對(duì)發(fā)現(xiàn)宮頸上皮內(nèi)病變有十分重要的作用。