王益 劉萬(wàn)平 何興林 官念 楊小芳 袁偲旖 彭川 陳倩

近年來(lái)，腦血管疾病已成為嚴(yán)重危害人類生命健康的重大疾病之一［1］。急性腦出血作為腦血管疾病中最常見(jiàn)的類型，占急性腦血管疾病的40%以上，具有極高的死亡率及致殘率，嚴(yán)重威脅患者生命安全［2］。隨著神經(jīng)生化標(biāo)志物的研究開(kāi)展，急性腦出血進(jìn)展及預(yù)后與生化標(biāo)志物引起廣泛關(guān)注。S100β 蛋白（S100βprotein，S100β）是鈣結(jié)合蛋白家族之一，在各種原因所致的腦組織損傷中呈高表達(dá)狀態(tài)，與腦組織損傷情況、腦梗死面積及預(yù)后關(guān)系密切［3］。巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子（macrophage migration inhibition factor，MIF）作為神經(jīng)損傷重要標(biāo)志，與炎性反應(yīng)及免疫應(yīng)答有關(guān)，可激活細(xì)胞因子引起泡沫細(xì)胞聚集，加速巨噬細(xì)胞遷移，刺激血管硬化及斑塊形成［4］。而Wang 等［5］發(fā)現(xiàn)，血清鐵蛋白（serum ferritin，SF）介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡及氧化損傷在腦部損傷機(jī)制中起到十分重要的作用，是加重急性腦出血關(guān)鍵因素之一。本研究就急性腦出血患者M(jìn)IF、S100β 蛋白及SF 的表達(dá)情況及病情、預(yù)后的相關(guān)性進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年8月至2018年8月于本院就診的72 例急性腦出血患者的臨床資料作為研究組，納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者臨床表現(xiàn)及影像學(xué)檢查確診，符合中國(guó)腦出血診治指南（2014）診斷標(biāo)準(zhǔn)［6］；②臨床資料完整且真實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并血液疾病者；②嚴(yán)重精神疾患或癡呆等無(wú)法配合本研究者；③存在其他原發(fā)性惡性腫瘤者。其中男37 例，女35 例，平均年齡（67.71±4.82）歲。根據(jù)患者預(yù)后情況分為生存組（n=46）及死亡組（n=26）。

選取同期61 例本院進(jìn)行健康體檢者作為對(duì)照組，其中男32 例，女29 例，平均年齡（67.75±4.79）歲。兩組性別、年齡等一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書，本研究已獲得院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

①收集所有患者臨床資料，比較研究組及對(duì)照組MIF、S100β 蛋白及SF 的表達(dá)情況；記錄所有患者在出院時(shí)預(yù)后（存活及死亡）情況。

②對(duì)照組于體檢當(dāng)日、研究組于入院24 h 內(nèi)采用強(qiáng)生Vitros350 全自動(dòng)干式化學(xué)分析儀檢測(cè)，以酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定S-100β 蛋白及SF，試劑盒由上海江萊食物科技有限公司提供。采用免疫放射分析法測(cè)量MIF，試劑盒由美國(guó)BioSource 公司提供。檢測(cè)過(guò)程嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作流程進(jìn)行。

1.3 診斷標(biāo)準(zhǔn)

由本科室兩名副主任級(jí)別以上醫(yī)師進(jìn)行GCS評(píng)分［7］：根據(jù)患者睜眼、語(yǔ)言、肢體運(yùn)動(dòng)等方面進(jìn)行評(píng)分，總分15 分，當(dāng)患者<9 分時(shí)為高，其余均為低。

MIF參考范圍：34～48 ng/L，當(dāng)MIF>48.89 ng/L提示異常升高；S100β 參考范圍：0.18～0.22 μg/L，S100β蛋白水平>0.22 μg/L提示異常升高；SF參考范圍：138～149 ng/mL，SF>149.08 ng/mL提示異常升高［7］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（）表示，行t檢驗(yàn)。采用多元Logistic 回歸分析影響急性腦出血患者預(yù)后死亡的危險(xiǎn)因素，采用ROC 曲線分析研究MIF、S100β 蛋白及SF 對(duì)患者預(yù)后死亡的影響。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組及對(duì)照組MIF、S100β 蛋白及SF 的表達(dá)水平比較

研究組患者M(jìn)IF、S100β 蛋白及SF 水平均明顯高于對(duì)照組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

表1 研究組及對(duì)照組MIF、S100β 蛋白及SF 的表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Compare the expression of MIF，S100 β protein and SF in the study group and the control group（±s）

表1 研究組及對(duì)照組MIF、S100β 蛋白及SF 的表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Compare the expression of MIF，S100 β protein and SF in the study group and the control group（±s）

組別研究組對(duì)照組t 值P 值72 61 MIF（ng/L）58.42±8.76 41.55±7.34 11.909<0.001 S-100β 蛋白（μg/L）0.98±0.28 0.20±0.02 21.697<0.001 SF（ng/mL）182.34±12.76 143.24±5.84 22.046<0.001

2.2 生存組及死亡組MIF、S100β 蛋白及SF 的表達(dá)水平比較

死亡組患者M(jìn)IF、S100β 蛋白及SF 水平高于生存組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表2。

表2 生存組及死亡組MIF、S100β 蛋白的表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Compare the expression of MIF，S100 β protein and SF in survival group and death group（±s）

表2 生存組及死亡組MIF、S100β 蛋白的表達(dá)水平比較（±s）Table 1 Compare the expression of MIF，S100 β protein and SF in survival group and death group（±s）

組別生存組死亡組t 值P 值n 46 26 MIF（ng/L）41.72±7.94 61.77±5.41 11.444<0.001 S-100β 蛋白（μg/L）0.51±0.19 1.05±0.21 11.150<0.001 SF（ng/mL）154.33±15.25 189.67±5.43 11.385<0.001

2.3 急性腦出血患者預(yù)后死亡的單因素和多因素分析

MIF、S100β 蛋白及SF 異常升高與急性腦出血患者預(yù)后死亡相關(guān)（P<0.05）。見(jiàn)表3。

表3 影響急性腦出血患者預(yù)后死亡的單因素和多因素分析Table 3 univariate and multivariate analysis of prognosis and survival in patients with acute cerebral hemorrhage

2.4 MIF、S100β 蛋白及SF 對(duì)急性腦出血患者預(yù)后死亡的預(yù)測(cè)價(jià)值

采用ROC 曲線分析MIF、S100β 蛋白及SF 及三者聯(lián)合對(duì)急性腦出血患者預(yù)后死亡的預(yù)測(cè)價(jià)值，各指標(biāo)曲線下面積以聯(lián)合檢測(cè)最大0.95，故聯(lián)合檢測(cè)的預(yù)測(cè)價(jià)值最佳。見(jiàn)表4、圖1。

表4 MIF、S100β 蛋白及SF 對(duì)急性腦出血患者預(yù)后死亡的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 4 the prognostic value of MIF，S100 β protein and SF in patients with acute cerebral hemorrhage

圖1 MIF、S100β 蛋白及SF 對(duì)急性腦出血患者預(yù)后死亡的預(yù)測(cè)價(jià)值Figure 1 The predictive value of MIF，S100 β protein and SF in the prognosis of patients with acute cerebral hemorrhage

3 討論

目前臨床上對(duì)于急性腦出血的發(fā)病機(jī)制尚未明確，相關(guān)研究顯示，急性腦出血與凝血酶、血紅蛋白、炎性因子等血清生化標(biāo)志物密切相關(guān)［8］。

MIF 是臨床上第一個(gè)發(fā)現(xiàn)具有炎性介質(zhì)的細(xì)胞因子，一方面能抑制巨噬細(xì)胞從T 細(xì)胞激活區(qū)向外移動(dòng)，并激活附近的巨噬細(xì)胞增強(qiáng)吞噬作用；另一方面，可抑制炎性細(xì)胞活性劑反向調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素達(dá)到促炎的目的［9］。研究發(fā)現(xiàn)，MIF 與動(dòng)脈粥樣硬化、腎小球腎炎、潰瘍性結(jié)腸炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡及腫瘤等疾病密切相關(guān)［10］。Dzmitry 等［11］對(duì)敗血癥患者研究顯示，在敗血癥休克時(shí)炎癥細(xì)胞胞漿內(nèi)MIF 合成加強(qiáng)、聚集增加，與炎癥部位炎癥細(xì)胞的聚集呈現(xiàn)平行相關(guān)關(guān)系。相關(guān)學(xué)者［12］對(duì)急性呼吸窘迫綜合征患者研究發(fā)現(xiàn)，MIF 可能通過(guò)中性細(xì)胞趨化性巨噬細(xì)胞炎性因子2 的上調(diào)而發(fā)揮作用。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)，腦出血后，血腫周圍腦組織受壓、缺血缺氧、受到損傷，大量炎癥細(xì)胞釋放，加上急性腦出血后，患者機(jī)體處于應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致MIF在循環(huán)中水平顯著上升［13］。本研究結(jié)果說(shuō)明MIF水平與急性腦出血患者預(yù)后關(guān)系密切。

既往文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，S100β 蛋白與中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤或腦血管病密切相關(guān)，其峰值濃度與急性腦缺血后的梗死體積呈正相關(guān)狀態(tài)［14］。同時(shí)，近年來(lái)相關(guān)研究表示，S100β 蛋白濃度的變化可作為反映中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害程度及判斷預(yù)后腦損傷的特異性標(biāo)志［15］。本文發(fā)現(xiàn)，研究組S100β 蛋白明顯較正常人群高，且S100β 蛋白異常升高為影響急性腦出血患者預(yù)后生存的危險(xiǎn)因素。分析其原因與急性腦出血患者出血量大，壓迫腦組織，致使血腫周圍水腫體積增大，腦組織缺血缺氧加重，大量星形膠質(zhì)細(xì)胞壞死，細(xì)胞膜完整性被破壞，S100β 蛋白溢出多，致使血清S100β 蛋白濃度增高有關(guān)［15］。

研究指出，鐵離子是加重急性腦出血形成的關(guān)鍵因素［16］。SF 是體內(nèi)鐵的主要貯存形式，急性腦損傷時(shí)，會(huì)產(chǎn)生大量自由基，SF 易受氧攻擊從而進(jìn)入鐵蛋白內(nèi)，將鐵蛋白中三價(jià)鐵還原成二價(jià)鐵使儲(chǔ)存鐵釋放；還可催化Haber-weiss 反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基及催化脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，生成丙二醛，破壞血腦屏障，造成腦水腫加重神經(jīng)損傷［16］。Sorour 等［17］發(fā)現(xiàn)，SF 參與腦梗死后的腦組織病理?yè)p傷過(guò)程，SF 濃度越高，腦梗死體積越大，神經(jīng)功能缺損評(píng)分越高。本研究結(jié)果顯示，SF 與急性腦出血患者預(yù)后關(guān)系密切，考慮與急性腦出血患者腦組織細(xì)胞受損，使SF水平濃度升高，影響體內(nèi)代謝能力，導(dǎo)致自我調(diào)節(jié)能力降低，使鐵離子水平異常升高，破壞神經(jīng)及血管內(nèi)皮細(xì)胞受體，使鈣離子三磷酸腺苷酶失活，破壞細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)，對(duì)患者預(yù)后造成影響有關(guān)。另本研究通過(guò)ROC曲線分析顯示，MIF、S100β 蛋白及SF 對(duì)急性腦出血患者預(yù)后死亡的預(yù)測(cè)價(jià)值最佳，進(jìn)一步提示聯(lián)合檢測(cè)三指標(biāo)可作為預(yù)測(cè)患者預(yù)后死亡的有效手段。

綜上所述，MIF、S100β 蛋白及SF 在急性腦出血患者中呈高表達(dá)狀態(tài)，可作為預(yù)測(cè)急性腦出血患者診療及預(yù)后的分子標(biāo)志物。