張惠芳 趙紅英 楊國(guó)濤 李英 劉云峰

吉蘭-巴雷綜合征（Guillain-Barre Syndrome，GBS）是一種人體自身免疫系統(tǒng)攻擊其周圍神經(jīng)的病癥，其主要病理特征為周圍神經(jīng)的髓鞘脫失和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，目前尚不清楚確切發(fā)病機(jī)制［1-2］。GBS 呈急性發(fā)病，癥狀與體征多于2 周達(dá)高峰，臨床表現(xiàn)輕重不一，多數(shù)患者起病時(shí)病情較輕，隨后病情逐漸加重，甚至可能發(fā)展至不能獨(dú)立行走或需要機(jī)械輔助通氣［3］。因此于發(fā)病早期預(yù)測(cè)疾病發(fā)展趨勢(shì)，對(duì)指導(dǎo)臨床開展有效的干預(yù)和治療、改善患者預(yù)后具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)在自身免疫性疾病的發(fā)病過程中發(fā)揮非常重要作用［4-5］。白細(xì)胞介素-27（Interleukin-27，IL-27）是近年新發(fā)現(xiàn)的一種細(xì)胞因子，報(bào)道指出IL-27 對(duì)Th1、Th2、Th17 細(xì)胞均具有廣泛的免疫抑制作用［6-7］。IL-27 在老年GBS 中的作用如何，目前國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)未見報(bào)道。本研究嘗試探究老年GBS 患者外周血IL-27 水平變化情況，并分析其作用機(jī)制。報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2020年7月本院老年GBS患者44 例作為GBS 組，男27 例，女17 例；平均年齡（82.24±2.93）歲；體質(zhì)量指數(shù)（Body mass index，BMI）平均（22.36±1.42）kg/m2。依據(jù)1∶1 配對(duì)原則，另選取同期健康體檢者44 例作為對(duì)照組，男22 例，女22 例；平均年齡（81.71±2.14）歲；平均（21.95±1.52）kg/m2。對(duì)比兩組性別、年齡、BMI，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

GBS 組納入標(biāo)準(zhǔn)：①明確診斷為GBS［8］；②年齡≥75 歲；③心肺等重要臟器功能良好；④發(fā)病前3 個(gè)月內(nèi)未使用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑；⑤患者及家屬知曉本研究，已簽署同意書。對(duì)照組納入標(biāo)準(zhǔn)：①全身體檢結(jié)果均正常，無自身免疫性疾病及家族史；②自主行為能力良好，無溝通交流障礙；③近3 個(gè)月內(nèi)未使用糖皮質(zhì)激素或免疫抑制劑；④研究對(duì)象本人及家屬知曉本研究，已簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①血液系統(tǒng)疾病患者；②慢性炎癥性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病患者；③脊髓灰質(zhì)炎患者；④就診時(shí)GBS 病情已明顯緩解者；⑤惡性腫瘤患者；⑥由重金屬、農(nóng)藥中毒引起的多發(fā)性神經(jīng)炎；⑦近3 個(gè)月內(nèi)有骨折史、嚴(yán)重創(chuàng)傷或手術(shù)史者；⑧合并明確顱內(nèi)病變的神經(jīng)炎患者；

1.2 方法

指標(biāo)檢測(cè)方法：所有研究對(duì)象均于入院當(dāng)天（治療前）采集空腹靜脈血3 mL，置于有肝素的抗凝管中，由專業(yè)檢測(cè)人員采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平，試劑盒購(gòu)自北京百奧萊博科技有限公司，檢測(cè)操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書完成。

GBS 疾病嚴(yán)重程度評(píng)定方法：所有患者均給予經(jīng)免疫球蛋白、激素、對(duì)癥等治療，根據(jù)發(fā)病高峰期（一般于患病2 周左右達(dá)到高峰）臨床癥狀評(píng)分（Hughes 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［9］）評(píng)估，分值范圍0～6 分，評(píng)分≤2 分判定為輕型，評(píng)分≥3 分判定為重型。

1.3 觀察指標(biāo)

①兩組外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平。②GBS 組不同病情患者臨床資料、外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平，臨床資料包括年齡、性別、BMI、上呼吸道感染、雙側(cè)面癱、腹瀉、自主神經(jīng)功能障礙、延髓功能障礙、軸索損傷。③分析外周血IL-27、IL-17、IL-10 與發(fā)病高峰期臨床癥狀評(píng)分的關(guān)系。④分析老年GBS 疾病嚴(yán)重程度的影響因素。⑤分析外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平對(duì)老年GBS 患者疾病嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)處理采用SPSS 22.0 軟件，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（）描述，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Pearson 相關(guān)系數(shù)模型，通過多元線性回歸分析評(píng)估關(guān)聯(lián)性，預(yù)測(cè)效能分析采用受試者工作特征（ROC）曲線，獲取曲線下面積（AUC），不同預(yù)測(cè)方案間曲線下面積比較采用DeLong 檢驗(yàn)，聯(lián)合預(yù)測(cè)實(shí)施Logistic 二元回歸擬合，返回預(yù)測(cè)概率logit（p）。以P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平

GBS 組外周血IL-27、IL-17 水平較對(duì)照組高（P<0.05），IL-10 水平較對(duì)照組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平比較（±s）Table 1 Comparison of IL-27、IL-17、IL-10 levels of peripheral blood between 2 groups（±s）

表1 兩組外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平比較（±s）Table 1 Comparison of IL-27、IL-17、IL-10 levels of peripheral blood between 2 groups（±s）

組別GBS 組對(duì)照組t 值P 值n 44 44 IL-27（pg/mL）185.69±35.46 115.24±23.58 10.974<0.001 IL-17（pg/mL）24.78±5.22 13.36±4.05 11.466<0.001 IL-10（pg/mL）40.25±10.06 55.18±12.37 6.211<0.001

2.2 GBS 組不同疾病嚴(yán)重程度患者臨床資料

不同疾病嚴(yán)重程度患者年齡、性別、BMI、上呼吸道感染、雙側(cè)面癱比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；GBS 組不同疾病嚴(yán)重程度患者腹瀉、自主神經(jīng)功能障礙、延髓功能障礙、軸索損傷比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 GBS 組不同疾病嚴(yán)重程度患者臨床資料［（±s），n（%）］Table 2 Clinical data of patients with different disease severity in GBS group［（±s），n（%）］

表2 GBS 組不同疾病嚴(yán)重程度患者臨床資料［（±s），n（%）］Table 2 Clinical data of patients with different disease severity in GBS group［（±s），n（%）］

資料年齡（歲）性別BMI（kg/m2）上呼吸道感染t/χ2值0.419 0.205 0.831 0.013 P 值0.677 0.651 0.411 0.911雙側(cè)面癱0.412 0.521腹瀉4.781 0.029自主神經(jīng)功能障礙延髓功能障礙4.841 0.028男女 有無是否有無有無有無有無重型患者（n=24）82.43±3.15 14（58.33）10（41.67）22.54±1.53 10（41.67）14（58.33）4（16.67）20（83.33）11（45.83）13（54.17）9（37.50）15（62.50）10（41.67）14（58.33）11（45.83）13（54.17）輕型患者（n=20）82.05±2.79 13（65.00）7（35.00）22.19±1.20 8（40.00）12（60.00）2（10.00）18（90.00）3（15.00）17（85.00）1（5.00）19（95.00）2（10.00）18（90.00）3（15.00）17（85.00）5.515 0.019軸索損傷4.781 0.029

2.3 GBS 組不同疾病嚴(yán)重程度患者外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平

GBS 組重型患者外周血IL-27、IL-17 較輕型患者高（P<0.05），IL-10 較輕型患者低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.638、4.238、4.132，P<0.05）。見圖1。

圖1 GBS 組不同疾病嚴(yán)重程度患者外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平Figure 1 GBS levels of peripheral blood IL-27、IL-17、IL-10 in patients with different disease severity

2.4 外周血IL-27、IL-17、IL-10 與發(fā)病高峰期臨床癥狀評(píng)分的關(guān)系

Pearson 相關(guān)性分析，外周血IL-27、IL-17 與發(fā)病高峰期臨床癥狀評(píng)分呈正相關(guān)，IL-10 與發(fā)病高峰期臨床癥狀評(píng)分呈負(fù)相關(guān)（r=0.554、0.594、-0.650，P<0.05）。

2.5 多元線性回歸分析

多元線性回歸分析，將雙側(cè)面癱、腹瀉、自主神經(jīng)功能障礙、延髓功能障礙、軸索損傷等其他因素控制后，外周血IL-27、IL-17、IL-10 仍與疾病嚴(yán)重程度（發(fā)病高峰期臨床癥狀評(píng)分）顯著相關(guān)（P<0.05）。見表3。

表3 多元線性回歸分析Table 3 Multiple linear regression analysis

2.6 外周血IL-27、IL-17、IL-10 對(duì)老年GBS 疾病嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC 曲線結(jié)果顯示，各指標(biāo)聯(lián)合預(yù)測(cè)老年GBS疾病嚴(yán)重程度的AUC 最大，為0.898，最佳預(yù)測(cè)敏感度、特異度分別為83.33%、90.00%。見表4、圖2。

表4 外周血IL-27、IL-17、IL-10 對(duì)老年GBS 疾病嚴(yán)重程度的預(yù)測(cè)價(jià)值Table 4 Predictive value of peripheral blood IL-27、IL-17、IL-10 on the severity of GBS diseases in the elderly

圖2 外周血IL-27、IL-17、IL-10 預(yù)測(cè)老年GBS 疾病嚴(yán)重程度的ROC 曲線Figure 2 ROC curve of peripheral blood IL-27、IL-17、IL-10 in predicting the severity of GBS disease in the elderly

3 討論

GBS 是一種細(xì)胞免疫、體液免疫共同參與的自身免疫性疾病，最近研究發(fā)現(xiàn)IL-27 對(duì)Th1、Th2、Th17 細(xì)胞均具有廣泛的免疫抑制作用，可抑制其產(chǎn)生促炎性細(xì)胞因子，并可用于多種實(shí)驗(yàn)性自身免疫性疾病［10］。但I(xiàn)L-27 在GBS 發(fā)生發(fā)展中的作用機(jī)制尚無臨床研究報(bào)道。本研究對(duì)此進(jìn)行探討，發(fā)現(xiàn)老年GBS 患者外周血IL-27 水平明顯高于健康體檢者，進(jìn)一步經(jīng)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)外周血IL-27 水平與老年GBS 患者發(fā)病高峰期臨床癥狀評(píng)分呈正相關(guān)，據(jù)此筆者推測(cè)IL-27 可能與GBS 的發(fā)生有關(guān)。IL-27 是一種具有多種生物學(xué)功能的因子，最近研究［11］證實(shí)IL-27 可以抑制Th1 型免疫反應(yīng)以調(diào)控免疫反應(yīng)的適度，是T 細(xì)胞介導(dǎo)炎癥的一個(gè)關(guān)鍵拮抗劑。IL-27 還對(duì)Th2和Th17 細(xì)胞具有抑制作用，正常情況下，Th2 效應(yīng)細(xì)胞在機(jī)體抵抗蠕蟲感染方面具有至關(guān)重要作用，但Th2 型免疫反應(yīng)失調(diào)可以導(dǎo)致多種疾病的發(fā)生，如哮喘和過敏等［12］。IL-27 還可抑制Th2 型免疫反應(yīng)，如國(guó)內(nèi)司馬宇彤等［13］報(bào)道指出可抑制Th2 細(xì)胞和Th17 細(xì)胞分化，同時(shí)上調(diào)調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞水平。

本研究還發(fā)現(xiàn)，老年GBS 患者外周血IL-17 水平明顯升高，IL-10 水平明顯降低。IL-17 是Th17細(xì)胞分泌的關(guān)鍵性因子之一，Th17 細(xì)胞參與了許多炎癥性疾病的發(fā)生如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、哮喘，在上述疾病中表達(dá)水平明顯增高［14］。IL-10 是一種多細(xì)胞源、多功能的細(xì)胞因子，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)與分化，參與炎性反應(yīng)和免疫反應(yīng)，被認(rèn)為是最主要的炎癥與免疫抑制細(xì)胞因子之一。人體內(nèi)單核巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞均可通過分泌IL-10 發(fā)揮抑制免疫反應(yīng)的作用。且本研究發(fā)現(xiàn)外周血IL-17、IL-10 均與老年GBS 患者發(fā)病高峰期臨床癥狀評(píng)分存在密切相關(guān)性，且與老年GBS 疾病嚴(yán)重程度顯著相關(guān)。進(jìn)一步證實(shí)外周血IL-27、IL-17、IL-10 可作為評(píng)估老年GBS 疾病嚴(yán)重程度的生物學(xué)指標(biāo)。且GBS 目前無特效治療方法，其主要包括血漿置換和免疫球蛋白，但僅對(duì)約1/3 的患者有效，并可能引起過敏反應(yīng)等多種副作用，甚至引發(fā)嚴(yán)重并發(fā)癥，皮質(zhì)類固醇則認(rèn)為對(duì)GBS 無效，并有不良反應(yīng)，而IL-27 已被用于多種實(shí)驗(yàn)性自身免疫性疾病的治療，且未發(fā)現(xiàn)明顯的副作用，因此筆者認(rèn)為IL-27 可能是治療包括GBS在內(nèi)的自身免疫性疾病的很好的細(xì)胞因子，IL-27必將成為治療免疫性疾病的新靶點(diǎn)，為疾病病程和病情的評(píng)估提供可能有效的方法。

綜上可知，老年GBS 患者外周血IL-27、IL-17、IL-10 水平與發(fā)病高峰期臨床癥狀評(píng)分密切相關(guān)，早期檢測(cè)各指標(biāo)水平有助于預(yù)測(cè)患者疾病嚴(yán)重程度，具有較高臨床應(yīng)用價(jià)值。但本研究為單中心研究，存在樣本量較少的不足，仍需通過多中心研究進(jìn)一步驗(yàn)證。