李鳳梅

（鄭州大學(xué)附屬鄭州中心醫(yī)院婦產(chǎn)科 河南鄭州 450007）

子宮內(nèi)膜異位癥（Endometriosis,EMs）簡(jiǎn)稱內(nèi)異癥，在臨床上是一種發(fā)病率奇高的婦科疾病，其發(fā)病的病機(jī)并不明確。目前，EMs已成為婦女常見(jiàn)病和多發(fā)病，發(fā)病率逐年上升，所占比例超過(guò)普通婦科手術(shù)的30%[1]。發(fā)病原因有多種假說(shuō)，如化生內(nèi)膜、良性轉(zhuǎn)移及遺傳因素等。EMs常表現(xiàn)為痛經(jīng)、下腹部疼痛等，對(duì)婦女健康及生活質(zhì)量都產(chǎn)生了嚴(yán)重影響，是發(fā)生不育癥的一個(gè)主要因素[2～3]。目前，EMs的具體發(fā)病原因仍不明確，其發(fā)病多樣且廣泛，已成為當(dāng)下的難治之癥[4～5]。在臨床上治療該病的方法較多，常見(jiàn)通過(guò)手術(shù)輔助藥物進(jìn)行治療，但是效果并不理想，預(yù)后復(fù)發(fā)率較高，所以早期診斷及干預(yù)治療是提高患者生存率的有效手段。如何簡(jiǎn)單有效地對(duì)該病進(jìn)行診斷有著十分重要的臨床意義，但是一般通過(guò)單一標(biāo)記物進(jìn)行診斷時(shí)，其敏感性及特異性存在一定問(wèn)題，本研究對(duì)血清中的ENA-78、HE4及MALAT1因子水平進(jìn)行研究?，F(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取2017年4月～2019年10月來(lái)我院就診的EMs患者46例為觀察組，年齡25～35歲，平均（29.12±3.29）歲；平均體質(zhì)量指數(shù)（23.92±1.33）kg/m2。根據(jù)美國(guó)生育學(xué)會(huì)的EMs的分期準(zhǔn)則對(duì)觀察組患者進(jìn)行劃分，輕度患者（Ⅰ～Ⅱ度）21例，重度患者（Ⅲ～Ⅳ度）25例，輕度患者與重度患者的年齡、體質(zhì)量指數(shù)之間差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。另外選取同期來(lái)我院體檢的46例正常健康婦女為對(duì)照組，年齡25～36歲，平均（29.45±3.78）歲；平均體質(zhì)量指數(shù)（23.55±1.69）kg/m2。觀察組與對(duì)照組的年齡、體質(zhì)量指數(shù)之間差異不存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。所有研究對(duì)象均簽署知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核通過(guò)。

1.2 入組標(biāo)準(zhǔn) （1）納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)過(guò)超聲及臨床綜合檢查確診為EMs患者；依從性較好，能夠有效配合完成各項(xiàng)檢查的患者；患者或家屬已經(jīng)簽署知情同意書者。（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有心、肝、腎等重要臟器嚴(yán)重衰竭者；各種其他對(duì)本次研究可能會(huì)產(chǎn)生負(fù)面作用的疾病者；自身存在免疫性或血液方面疾病者；3個(gè)月內(nèi)存在激素類藥物使用史者。

1.3 觀察指標(biāo) 取兩組患者清晨空腹靜脈血，離心后，取上清液，采用酶聯(lián)免疫法（ELLSA）對(duì)患者血清中ENA-78、HE4水平進(jìn)行檢測(cè)。按照血清總核糖核酸（RNA）提取試劑盒的操作規(guī)范對(duì)血清中RNA進(jìn)行提取，對(duì)其中轉(zhuǎn)錄因子MALAT1的含量進(jìn)行測(cè)定。實(shí)驗(yàn)過(guò)程包括包被、加樣、加酶標(biāo)抗體、顯色劑終止反應(yīng)過(guò)程，按廠家操作規(guī)范進(jìn)行操作。結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)[4～5]：（1）ENA-78＞1.0 ng/ml判定為陽(yáng)性；（2）HE4＞42 pmol/L判定為陽(yáng)性；（3）MALAT1＜0.65 U/ml判定為陽(yáng)性；（4）平行聯(lián)合檢測(cè)判定，不同檢測(cè)方法中，任何一項(xiàng)出現(xiàn)陽(yáng)性，即判定為陽(yáng)性；（5）系列聯(lián)合檢測(cè)，幾項(xiàng)檢測(cè)方法均出現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果時(shí)，判定為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)據(jù)處理采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，計(jì)數(shù)資料以%表示，采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（±s）表示，采用t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異 觀察組ENA-78（t=14.105，P=0.000）、HE4（t=13.355，P=0.000）顯 著 高 于 對(duì) 照 組，MALAT1因 子（t=59.321，P=0.000）水平顯著低于對(duì)照組。見(jiàn)表1。

表1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

表1 兩組ENA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

組別 n MALAT1（U/ml）ENA-78（ng/ml） HE4（pmol/L）觀察組對(duì)照組tP 46 46 0.61±0.05 1.12±0.03 59.321 0.000 2.22±0.63 0.89±0.11 14.105 0.000 53.79±4.99 41.38±3.85 13.355 0.000

2.2 不同嚴(yán)重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異 Ⅰ～Ⅱ度組患者ENA-78（t=9.930，P=0.000）、HE4（t=13.424，P=0.000）顯著低于Ⅲ～Ⅳ度組，MALAT1因子（t=40.540，P=0.000）水平顯著高于Ⅲ～Ⅳ度組。見(jiàn)表2。

表2 不同嚴(yán)重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

表2 不同嚴(yán)重程度患者的NA-78、HE4與MALAT1水平差異（±s）

組別 n MALAT1（U/ml）ENA-78（ng/ml） HE4（pmol/L）Ⅰ～Ⅱ度組Ⅲ～Ⅳ度組tP 21 25 0.74±0.02 0.50±0.02 40.540 0.000 1.10±0.36 3.16±0.96 9.930 0.000 50.67±1.33 56.41±1.57 13.424 0.000

2.3 相關(guān)性分析 采用Spearman相關(guān)性分析，對(duì)疾病的嚴(yán)重程度與NA-78、HE4與MALAT1水平進(jìn)行相關(guān)性分析，患者的疾病嚴(yán)重程度與NA-78（r=0.445，P=0.000）、HE4（r=0.551，P=0.000）呈正相關(guān)，與MALAT1呈負(fù)相關(guān)（r=-0.578，P=0.000）。

2.4 聯(lián)合檢測(cè)診斷的ROC曲線分析 平行聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線下面積分別為0.761、0.763和0.915，系列聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線下面積為0.750、0.721和0.904，ENA-78+MALAT1診斷的ROC曲線下面積顯著高于MALAT1+HE4及ENA-78+HE4，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)圖1。

圖1 ROC曲線分析（A為平行聯(lián)合檢測(cè)，B為系列聯(lián)合檢測(cè)）

2.4 EMs患病危險(xiǎn)因素的多因素Logistic回歸分析多因素Logistic回歸分析顯示，ENA-78、HE4與MALAT1均是EMs發(fā)病的影響因素（P＜0.05）。見(jiàn)表3。

表3 子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病危險(xiǎn)因素的多因素Logistic回歸分析

3 討論

EMs是臨床上發(fā)病率較高的一種雌激素依賴系統(tǒng)疾病，發(fā)病人群多為育齡女性，患者通常會(huì)出現(xiàn)不規(guī)則出血、疼痛、不孕等臨床表現(xiàn)，比較嚴(yán)重時(shí)會(huì)對(duì)患者的生活質(zhì)量造成負(fù)面影響[6]。最近幾年來(lái)，該病發(fā)病率持續(xù)走高，患者不孕概率高達(dá)50%，所以如何在患者發(fā)病時(shí)進(jìn)行準(zhǔn)確有效的診斷并開(kāi)展治療，對(duì)改善患者的預(yù)后十分有必要[7～8]。目前臨床上一般通過(guò)腹腔鏡手術(shù)切除異位病灶，并在患者術(shù)后同時(shí)輔以藥物鞏固治療來(lái)減少?gòu)?fù)發(fā)。隨著醫(yī)療條件的改善和各種創(chuàng)新藥物的研發(fā)，該病的治療已經(jīng)取得十分顯著的效果[9]。雖然臨床上認(rèn)為腹腔鏡檢查診斷EMs是“金標(biāo)準(zhǔn)”，但這種檢查需要全身麻醉，在檢查期間要對(duì)患者的腹腔進(jìn)行侵入性操作，對(duì)患者機(jī)體造成一定傷害，會(huì)引起副交感神經(jīng)的應(yīng)激反應(yīng)，導(dǎo)致檢查后的并發(fā)癥也較多，而且檢查花費(fèi)也較大，限制了推廣使用的范圍，所以應(yīng)該尋找一種操作方便、特異性強(qiáng)、靈敏度較好的診斷方案。已有文獻(xiàn)報(bào)道了許多生物標(biāo)志物可以用于該病的診斷，具有十分廣泛的參考價(jià)值[10～11]。

HE4是近年來(lái)發(fā)現(xiàn)的一種腫瘤標(biāo)志物，在臨床上多用于卵巢癌的早期診斷，一般在健康人體的呼吸道、生殖系統(tǒng)及卵巢組織中的表達(dá)水平極低，但是在卵巢癌患者的組織和血清中均發(fā)現(xiàn)高度表達(dá)。隨著科學(xué)家的進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，EMs患者血清中HE4也存在一定程度的升高[12]。ENA-78是一種炎癥介質(zhì)，來(lái)源于人體的上皮細(xì)胞，作用是趨化及激活患者體內(nèi)的中性粒細(xì)胞，能夠顯著促進(jìn)患者體內(nèi)新血管的形成，同時(shí)也能夠?qū)Ξ愇徊≡钪械男律芪呛响o脈微血管系統(tǒng)起到促進(jìn)作用，導(dǎo)致患者局部出現(xiàn)缺血、缺氧，引發(fā)纖維化，進(jìn)而加重盆腔粘連，最終出現(xiàn)異位作用[13～15]。研究表明，MALAT在多個(gè)腫瘤中均出現(xiàn)了過(guò)表達(dá)現(xiàn)象，如子宮內(nèi)膜癌，乳腺癌及卵巢癌等多種雌激素依賴性腫瘤，MALAT7因子表達(dá)下調(diào)，能夠調(diào)節(jié)患者的上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化，涉及惡性腫瘤的生長(zhǎng)、遷移及侵襲過(guò)程[16～18]。由此可見(jiàn)，已經(jīng)有文獻(xiàn)和臨床支持以上三個(gè)指標(biāo)與卵巢癌存在密切關(guān)聯(lián)，但是與子宮異位癥的關(guān)系沒(méi)有得到進(jìn)一步確定[19～20]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，觀察組ENA-78、HE4水平顯著高于對(duì)照組，MALAT1水平低于對(duì)照組，P＜0.05。可以認(rèn)為檢測(cè)患者血清中的ENA-78、HE4和MALAT1水平對(duì)于EMs診斷有一定參考價(jià)值。隨著分子生物學(xué)迅速發(fā)展及血管形成理論的進(jìn)一步規(guī)律揭示，已經(jīng)有越來(lái)越多研究顯示EMs病機(jī)與患者的血管生成過(guò)程存在密切關(guān)聯(lián)。而在本研究中，隨著疾病的嚴(yán)重程度加重，ENA-78、HE4顯著升高，MALAT1顯著降低，與以上研究相互印證。ENA-78、HE4和MALAT1與子宮內(nèi)膜癥的相關(guān)關(guān)系已經(jīng)十分明確，但三者聯(lián)合用于該病的診斷報(bào)道較少。平行聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線下面積分別為0.761、0.763和0.915，系列聯(lián)合檢測(cè)ROC曲線下面積為0.750、0.721和0.904，ENA-78+MALAT1診斷的ROC曲線下面積顯著高于MALAT1+HE4及ENA-78+HE4，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。說(shuō)明ENA-78、MALAT1的聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于該病的陽(yáng)性診斷有重要意義，對(duì)于該病的早期篩查有積極的作用。

綜上所述，ENA-78、HE4和MALAT1表達(dá)情況與EMs疾病進(jìn)展存在相關(guān)性，而且ENA-78的診斷靈敏度最高，HE4診斷靈敏度最低，ENA-78、MALAT1的聯(lián)合檢測(cè)可以為該病臨床陽(yáng)性診斷提供參考，診斷過(guò)程簡(jiǎn)單且為非侵入式的，價(jià)值較高，值得在臨床中推廣運(yùn)用。

（收稿日期：2020-12-18）