王文寶，楊俊濤，毛訊，段少峰

1. 漯河醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校（漯河 462000）；2. 河南大學(xué)藥學(xué)院（開封 475000）

猴頭菇是一種名貴的藥食兩用食用菌，含多糖、氨基酸和無機元素等多種生物活性物質(zhì)。猴頭菇多糖為猴頭菇的最主要活性成分，具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降血糖血脂和肝臟保護等多種生理活性和健康作用[1-2]?？诜蒡v片是一種新型固體制劑，用少量水使其發(fā)生酸堿反應(yīng)，溶解形成溶液后口服，加入矯味劑和著色劑的泡騰片，無論色澤還是口感均易于被接受[3]。試驗以猴頭菇水提取物為研究對象，以泡騰片劑型作為載體，旨在開發(fā)一種具有保健功能的猴頭菇水提取物口服泡騰片，為具有廣闊的發(fā)展前景與市場價值的同類產(chǎn)品提供參考。

1 材料與方法

1.1 儀器與設(shè)備

Sartorius電子天平（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；DZF-6020真空干燥箱（上海賽歐試驗設(shè)備有限公司）；ZP198-17旋轉(zhuǎn)式壓片機（上海天峰制藥設(shè)備有限公司）；78X-2型片劑四用測定儀（上海黃海藥檢儀器廠）；ZB-10智能崩解儀（天津大學(xué)精密儀器廠）；PHSJ-4F pH計（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 材料與試劑

猴頭菇水提取物（西安昌岳生物科技有限公司，批號20161220）；碳酸氫鈉（河北華晨藥業(yè)有限公司，批號20160128）；檸檬酸（安徽豐原生物化學(xué)股份有限公司，批號20151220）；PEG 6000（安徽山河藥用輔料有限公司，批號20160920）；乳糖（上海華茂藥業(yè)有限公司，批號20151106）；硬脂酸鎂（天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心，批號20160320）；十二烷基硫酸鈉（上東浩天藥業(yè)有限公司，批號20160824）；甜菊糖（上東浩天藥業(yè)有限公司）。

1.3 試驗條件

1.3.1 猴頭菇水提取物添加量的確定

根據(jù)文獻研究和市場調(diào)研，設(shè)計猴頭菇水提取物泡騰片的片重2 g，猴頭菇水提取物的添加量每片100mg，每天服用3次，每次1片。

1.3.2 猴頭菇水提取物泡騰片的質(zhì)量評價

1) pH。在20 ℃下將泡騰片溶于100 mL水中，待完全溶解后，測定溶液的pH。

2) 崩解時間。參照2015版《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）崩解時限檢查法，將200 mL水加入250 mL燒杯中，水浴控制水溫在15～25℃，加入泡騰片1片。從溶液中加入泡騰片計算到無氣體逸出的時間即為泡騰片的崩解時間。

3) 發(fā)泡量。取10支內(nèi)徑約1.5 cm的25 mL具塞刻度試管，加水2 mL后置于（37±1）℃水浴中5 min，分別加入本品1片，密封20 min，觀察最大發(fā)泡體積。

4) 吸濕性。將底部盛有飽和氯化鉀溶液干燥器放置1 d，保持內(nèi)部相對濕度84%，將約0.5 g顆粒平鋪于干燥恒重的瓶底部，稱重，干燥至恒重后再精密稱重，后置于相對濕度84%干燥器中，打開稱量瓶蓋定時稱重，計算吸濕百分率。

1.3.3 猴頭菇水提取物泡騰片的制備工藝

制法1：采用酸堿分開制粒壓片法。將原輔料過孔徑0.150 mm篩，將猴頭菇多糖平分成2份，一份與酸源、稀釋劑按等量遞增法混勻，加入黏合劑制成酸顆粒；另一份與堿源、稀釋劑同法制得堿顆粒。將酸顆粒、堿顆?；靹颍瑵櫥瑒┭a足片重，壓片，即得。

制法2：采用堿源包裹分開制粒壓片法。在60～80℃下水浴加熱熔融PEG 6000，加入堿源，邊加邊攪勻，冷卻后過80目篩。另取過孔徑0.150 mm篩的原料藥、酸源、稀釋劑等，按等量遞增法混勻，制粒，加入上述粉末，潤滑劑補足片重，混勻，壓片，即得。

制法3：采用粉末直接壓片法。取原料藥、酸源、堿源、稀釋劑等均過孔徑0.150 mm篩，潤滑劑不足片重，按等量遞增法混勻，壓片，即得[4-5]。

以崩解時間、外觀及放置10 d后的發(fā)泡情況作為評價指標(biāo)，對不同制備方法進行考察。

1.3.4 碳酸氫鈉包裹物制備

試驗采用PEG 6000包裹堿源的工藝制備猴頭菇水提取物泡騰片，設(shè)計PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為1%，2%，3%，4%，5%和6%，并固定其他處方不變，按制法2工藝，每組平行制備3批泡騰片，以崩解時間和發(fā)泡量為評價指標(biāo)考察PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)[6-7]。

1.3.5 猴頭菇水提取物泡騰片單因素試驗

1.3.5.1 填充劑的考察

泡騰片在遇水泡騰后應(yīng)形成澄清溶液，其在存儲過程中經(jīng)常出現(xiàn)吸濕而導(dǎo)致失效的現(xiàn)象，因此在選擇填充劑時應(yīng)選擇水溶性、吸濕性小的輔料。選擇乳糖、可溶性淀粉、糊精、蔗糖、乳糖、糊精為預(yù)選填充劑，以吸濕性和溶解情況為評價指標(biāo)進行考察[8]。

1.3.5.2 崩解劑的考察

崩解劑是泡騰片處方中一種重要輔料，決定泡騰片的崩解時間，對泡騰片質(zhì)量起關(guān)鍵作用。據(jù)文獻報道，崩解劑一般在泡騰片中質(zhì)量分?jǐn)?shù)為30%～50%，試驗在固定其他條件不變情況下，以檸檬酸為酸源，碳酸氫鈉為堿源，設(shè)計崩解劑總量為30%，35%，40%，45%和50%，分別按制法2工藝，每組平行制備3批泡騰片，以崩解時間、發(fā)泡量和pH為評價指標(biāo)，考察崩解劑總量[9]。

泡騰片中酸源檸檬酸與堿源碳酸氫鈉質(zhì)量比一般為1.37︰1～1.74︰1，且酸源量大泡騰片溶解最快，堿源量大產(chǎn)氣狀態(tài)最佳。設(shè)計檸檬酸與碳酸氫鈉質(zhì)量比分別為2.5︰1，2.0︰1，1.5︰1，1.0︰1和1.0︰1.5，并固定其他處方不變，按制法2的工藝，每組平行制備3批，以崩解時間、發(fā)泡量、pH為評價指標(biāo)，考察最佳檸檬酸與碳酸氫鈉比例。

1.3.5.3 黏合劑的考察

設(shè)計PVP-水溶液、PVP-乙醇溶液、10%淀粉漿作為預(yù)選黏合劑，以崩解時間、硬度和制粒情況為評價指標(biāo)進行考察[10]。

1.3.5.4 甜味劑的考察

良好的口感可以提高泡騰片使用的從性，為得到較好的口感，泡騰片處方中需加入適量的甜味劑進行矯味。阿斯巴甜熱量低、甘甜清凉，且吸濕性低，不易導(dǎo)致齲齒，因此選擇阿斯巴甜作為甜味劑。設(shè)計質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為0.5%，1.0%，1.5%，2.0%和2.5%，同時固定其他條件不變，按制法2工藝，每組平行制備3批泡騰片，以甜味程度為評價指標(biāo)進行考察[11]。

1.3.5.5 潤滑劑的考察

制備口服泡騰片應(yīng)選擇水溶性潤滑劑，選擇1.5%十二烷基硫酸鈉、PEG 6000為預(yù)選潤滑劑，以休止角、崩解時間、硬度、泡騰片外觀為評價指標(biāo)進行考察[12]。

1.3.6 猴頭菇水提取物泡騰片處方的正交試驗

根據(jù)單因素試驗考察結(jié)果進行正交試驗設(shè)計，以崩解時間、口感（很好為4，較好為3，一般為2，差為1）、硬度（30 d）、pH作為評定指標(biāo)，對泡騰劑總量（A）、泡騰劑酸堿質(zhì)量比（B）以及甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)（C）進行優(yōu)化[13-15]。因素水平見表1。

表1 正交試驗因素水平表

2 結(jié)果與分析

2.1 泡騰片制備工藝考察結(jié)果

結(jié)果如表2所示，制法2所得泡騰片崩解時間較小，硬度適當(dāng)，外觀較好，且PEG 6000包裹堿源制得的泡騰片在放置10 d后，仍有較強的發(fā)泡效果，故選擇制法2作為制備工藝。

表2 不同制備方法考察結(jié)果

2.2 碳酸氫鈉包裹物制備結(jié)果

結(jié)果如表3所示，PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%時，崩解時間最短，發(fā)泡量適宜，故確定PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)為4%。

表3 不同PEG 6000質(zhì)量分?jǐn)?shù)效果的比較

2.3 猴頭菇水提取物泡騰片單因素試驗

2.3.1 填充劑考察結(jié)果

結(jié)果如表4所示，乳糖的吸濕率最小，且泡騰片泡騰后得到澄清溶液，且本身有甜味，具有一定矯味作用，故選擇乳糖為填充劑。

表4 不同稀釋劑考察結(jié)果

2.3.2 崩解劑考察結(jié)果

結(jié)果如表5所示，泡騰劑總量小于45%時，片劑崩解時間最短，總量大于45%時，崩解時間反而延長。故選擇泡騰劑總量42.5%，45.0%和47.5%進行正交試驗。

表5 不同泡騰劑添加量效果的比較

不同酸堿質(zhì)量比考察結(jié)果如表6所示，最終選擇酸堿質(zhì)量比1.25︰1，1.50︰1和1.75︰1進行正交試驗。

表6 不同酸堿質(zhì)量比效果的比較

2.3.3 黏合劑考察結(jié)果

結(jié)果如表7所示，采用3% PVP-水溶液時的崩解時間、硬度和制得的顆粒均較好，故選用3% PVP-水溶液為猴頭菇水提取物泡騰片的黏合劑。

2.3.4 甜味劑考察結(jié)果

結(jié)果如表8所示，甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)小于2%時甜味過淡，大于2%時甜味太濃，故選擇阿斯巴甜質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.75%，2.00%和2.25%進行正交試驗。

表8 不同潤甜味劑加量效果的考察結(jié)果

2.3.5 潤滑劑考察結(jié)果

結(jié)果如表9所示，十二烷基硫酸鈉作為潤滑劑時的休止角、崩解時間、硬度及泡騰片外觀均較好，故選擇十二烷基硫酸鈉作為潤滑劑。

表9 不同潤滑劑的考察結(jié)果

2.4 猴頭菇水提取物泡騰片處方的正交試驗結(jié)果

2.4.1 正交試驗結(jié)果與分析

表10 按L9(34)正交試驗結(jié)果

結(jié)果見表10～表14。分析結(jié)果可知，泡騰劑總量（A）對崩解時間影響顯著，結(jié)合直觀分析結(jié)果選取A1水平，B、C水平任選；甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)（C）對口感影響顯著，結(jié)合直觀分析結(jié)果選取B2水平，A、C水平任選；3個因素對泡騰片硬度均無顯著性影響，A、B、C水平任選；泡騰劑酸堿質(zhì)量比（B）對pH影響顯著，結(jié)合直觀分析結(jié)果選取B2水平，A、C水平任選。最終確定猴頭菇水提取物泡騰片的最佳工藝為A1B2C2，即泡騰劑總量42.5%、泡騰劑酸堿質(zhì)量比1.5︰1、甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%。

表11 崩解時間分析結(jié)果

表12 口感分析結(jié)果

表13 30 d硬度分析結(jié)果

表14 pH分析結(jié)果

2.4.2 工藝驗證

按照最佳工藝制備3批（1 000片/批）猴頭菇水提取物泡騰片，以崩解時間、口感、30 d硬度、pH為評價指標(biāo)進行驗證，結(jié)果見表15。結(jié)果表明所確定的最優(yōu)工藝條件穩(wěn)定，重現(xiàn)性好。

表15 工藝的驗證

3 結(jié)論

泡騰片的組方及工藝較一般固體制劑要求更嚴(yán)格，經(jīng)常發(fā)生壓片黏沖、吸濕不穩(wěn)定和崩解遲緩等問題，由于酸、堿源制粒壓片工藝選擇不當(dāng)，也易出現(xiàn)泡騰片吸濕而導(dǎo)致失效現(xiàn)象。試驗以猴頭菇提取物為原料，采用單因素及正交試驗確定猴頭菇水提取物泡騰片的最優(yōu)處方，配方中猴頭菇提取物質(zhì)量分?jǐn)?shù)5%、填充劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)45.0%，泡騰劑總量42.5%（酸堿質(zhì)量比1.5︰1）、PEG質(zhì)量分?jǐn)?shù)4.0%、甜味劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%、潤滑劑質(zhì)量分?jǐn)?shù)1.5%時，制得的猴頭菇水提取物泡騰片表面光滑美觀、色澤均勻，崩解時限、pH等均符合2015版《中國藥典》的質(zhì)量要求，且泡騰后溶液澄清、口感良好，表明配方具有良好可靠性和可行性。