常思思

微生物檢驗(yàn)是評(píng)價(jià)水質(zhì)變化的一個(gè)重要方法。水質(zhì)被污染的情況下會(huì)產(chǎn)生不同有機(jī)物質(zhì)，增加水中各類微生物的數(shù)量與種類，如常見的大腸埃希菌、糞大腸菌群、腸球菌、綠膿假單胞菌等，如果不能及時(shí)檢出其中的相關(guān)菌落，可使人體出現(xiàn)不同的健康問(wèn)題。對(duì)此，注重生活飲用水的水質(zhì)檢驗(yàn)具有重要意義。那么水質(zhì)檢驗(yàn)中對(duì)細(xì)菌菌落有何要求？可以選擇哪些方法進(jìn)行水中細(xì)菌微生物的檢驗(yàn)?zāi)兀勘疚膶?duì)上述有關(guān)問(wèn)題予以分析。

1細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)分析

細(xì)菌總數(shù)是評(píng)價(jià)水質(zhì)的一項(xiàng)重要指標(biāo)。細(xì)菌總數(shù)是指選取1 ml水樣，通過(guò)營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基在37℃條件下培養(yǎng)24 h后得到的細(xì)菌菌落總數(shù)量。細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)結(jié)果中如果整體數(shù)值偏高，說(shuō)明水質(zhì)受到了污染，但是并不能得到污染的具體來(lái)源。對(duì)水污染來(lái)源以及安全程度方面分析，一般還需要進(jìn)行總大腸菌群的檢測(cè)。

結(jié)合我國(guó)生活飲用水細(xì)菌衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求，1 ml飲水中的≤100個(gè)細(xì)菌總數(shù)，1 L飲水中≤3個(gè)大腸菌群。細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)方面常用的是平板菌落計(jì)數(shù)法，即制作培養(yǎng)基平板，然后定量在培養(yǎng)基中接種水樣，37℃條件下培養(yǎng)24 h，培養(yǎng)完成后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)。需要注意的是，在接種過(guò)程中需要注重?zé)o菌操作，同時(shí)需要設(shè)置平行對(duì)照實(shí)驗(yàn)，培養(yǎng)完成后可通過(guò)眼睛直觀或者通過(guò)放大鏡檢查等明確菌落數(shù)，根據(jù)細(xì)菌總數(shù)結(jié)果與水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)要求，初步判斷水質(zhì)是否出現(xiàn)污染。

2總大腸菌群檢測(cè)分析

總大腸菌群也是評(píng)價(jià)水質(zhì)的重要性指標(biāo)。豬牛羊等較多動(dòng)物腸道以及人體腸道內(nèi)都存在大腸菌群，可反映出水質(zhì)是否受到糞便污染，通過(guò)對(duì)耐熱大腸菌群與大腸埃希氏菌的檢測(cè)，能夠進(jìn)一步確定出水中的總大腸菌群污染來(lái)自人還是動(dòng)物糞便，或來(lái)源于自然環(huán)境?？偞竽c菌群指的是在37℃培養(yǎng)24 h和48 h后，可發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌，檢測(cè)結(jié)果反映出的是具有共同特性的一組細(xì)菌。對(duì)總大腸菌群檢測(cè)可評(píng)估水質(zhì)污染情況。總大腸菌群可采用的檢測(cè)方法有以下幾種：

2.1 多管發(fā)酵法檢驗(yàn)

選擇10 ml待檢測(cè)水樣，并將其接種到雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液10 ml中;1 ml水樣加入10 ml單料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液，將1 ml水樣添加到0.9%的氯化鈉注射液9 ml中，充分混合，培養(yǎng)并在接種后進(jìn)行不同稀釋處理;針對(duì)水質(zhì)污染嚴(yán)重的情況，水樣需要合理稀釋。不足1 ml的水樣稀釋10倍，并從稀釋液中選擇1 ml接種培養(yǎng)。接種后，37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h，無(wú)產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象，即為陰性大腸菌群。

如果有產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象，需要進(jìn)行如下操作：將培養(yǎng)菌轉(zhuǎn)接種到伊紅美藍(lán)瓊脂板上培養(yǎng)24 h，觀察菌落形態(tài)，對(duì)無(wú)金屬光澤紫黑色或淡紫紅色，中間顏色較深的金屬光澤菌落染色并鏡檢。需要注意的是，如果為革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿，鏡檢后需要放入乳糖蛋白胨中培養(yǎng)培養(yǎng)24 h，有產(chǎn)氣、產(chǎn)酸現(xiàn)象，則為陽(yáng)性大腸菌群。

2.2 酶底物法檢驗(yàn)

需準(zhǔn)備好酶底物法檢測(cè)試劑、滅菌稀釋水等。選擇待測(cè)水樣100 ml，如果水質(zhì)污染嚴(yán)重，可選擇10 ml水樣，加入90 ml滅菌稀釋水稀釋，得到100 ml稀釋后的水樣。100 ml水樣加入專用培養(yǎng)基中，使其充分溶解，在（36±1）℃條件下培養(yǎng)24 h，觀察培養(yǎng)結(jié)果，不變色則為陰性，變?yōu)辄S色則為陽(yáng)性總大腸菌群。在定性分析的基礎(chǔ)上還可以定量分析，綜合評(píng)估水中總大腸菌群。

3生活飲用水微生物檢驗(yàn)方法的選擇

生活飲用水微生物檢驗(yàn)方法中需要結(jié)合具體的試驗(yàn)條件合理選擇檢測(cè)方法，同時(shí)還需要考慮檢測(cè)結(jié)果的可靠性，如平皿計(jì)數(shù)法在生活飲用水微生物檢驗(yàn)中，該操作復(fù)雜、繁瑣，對(duì)操作人員的技術(shù)素養(yǎng)要求較高;管發(fā)酵法能夠可得到水中微生物的含量水平，兼顧定性與定量，但是多管發(fā)酵法實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣，耗時(shí)也較多，不過(guò)其能夠滿足專業(yè)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳钣盟⑸餀z驗(yàn);酶底物法檢驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，耗時(shí)短，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性高，對(duì)操作人員的要求也不高，同樣可兼顧定性分析與定量分析，具有較高的推廣與應(yīng)用價(jià)值。B2058848-B186-4C66-B092-D1E39510021D