李 進(jìn) 祁從輝 郭美玲

（建湖縣第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇 鹽城224700）

C反應(yīng)蛋白（creation protein，CRP）是機(jī)體一種重要的急性期蛋白，在健康人血液中含量極微，當(dāng)機(jī)體細(xì)菌感染和組織損傷時(shí)，CRP的濃度顯著增高，因而是體內(nèi)各種炎癥和組織損傷的敏感性指標(biāo)，對(duì)鑒別病毒與細(xì)菌感染有重要價(jià)值[1-3]。臨床選用干式免疫熒光定量法檢測(cè)超敏C反應(yīng)蛋白的原因是其具有快速、簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠、敏感性高的特點(diǎn)，可廣泛適用于門急診的需求[4]。在日常檢驗(yàn)工作中，常會(huì)遇到一些檢驗(yàn)結(jié)果與臨床表現(xiàn)不符的現(xiàn)象，影響病人的救治，甚至?xí)鹛貏e嚴(yán)重的后果[5-6]，究其原因發(fā)現(xiàn)標(biāo)本的溶血就是其中原因之一，約占分析前誤差的60%[7]。溶血對(duì)CRP的檢測(cè)造成怎樣的影響，本文將對(duì)此進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探討。而CRP存在于血漿中[8]，故本試驗(yàn)將觀察干式免疫熒光法檢測(cè)不同程度溶血標(biāo)本對(duì)血漿CRP的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2019年9月至11月份門診和住院的60名診斷為急性炎癥患者標(biāo)本，其中男性35例，女性25例。選取的標(biāo)本應(yīng)將脂血、黃疸、溶血等樣品排除，所有檢測(cè)均按實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程完成，并盡量減少外界因素的干擾，且每人采集4管血液于EDTA-K2的抗凝真空管中[9]。

1.2 溶血程度分級(jí) 以血漿中血紅蛋白的含量來(lái)分級(jí)，輕度溶血（Hb1.0～10.0g/L）、中度溶血（Hb 10.1～20g/L），重度溶血（Hb 20.1～30g/L）。

1.3 儀器與試劑 使用的檢測(cè)儀器包括基蛋生物Geteln1100免疫熒光定量分析儀、湘儀低速離心機(jī)TDZ5-WS、邁瑞全自動(dòng)血液分析儀BC-5180。所用試劑及反應(yīng)物件均為各自廠家配套產(chǎn)品。

1.4 檢測(cè)方法 測(cè)定上述選取的60位患者血標(biāo)本中CRP所得的數(shù)據(jù)設(shè)為對(duì)照組；用帶針頭的注射器抽打1～3次的標(biāo)本至輕度溶血后所測(cè)得的數(shù)據(jù)設(shè)為輕度溶血組；用帶針頭的注射器抽打5～7次的標(biāo)本至中度溶血后所測(cè)得的數(shù)據(jù)設(shè)為中度溶血組；用帶針頭的注射器抽打10次以上的標(biāo)本至重度溶血后所測(cè)得的數(shù)據(jù)設(shè)為重度溶血組。第1管用于正常檢測(cè)CRP的含量并記錄所有數(shù)據(jù)。第2管用帶針頭的注射器抽打1～3次后，用湘儀TDZ5-WS離心（3000r/5min），再用BC-5180全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血漿中血紅蛋白的含量，使其在輕度溶血的范圍內(nèi)，然后用Geteln1100免疫熒光定量分析儀檢測(cè)CRP含量并記錄所有數(shù)據(jù)；第3管用帶針頭的注射器抽打5～7次后，用湘儀TDZ5-WS離心（3000r/5min），再用BC-5180全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血漿中血紅蛋白的含量，使其在中度溶血的范圍內(nèi)，然后用Geteln1100免疫熒光定量分析儀檢測(cè)CRP含量并記錄所有數(shù)據(jù)；第4管用帶針頭的注射器抽打10次以上，用湘儀TDZ5-WS離心（3000r/5min），再用BC-5180全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血漿中血紅蛋白的含量，使其在重度溶血的范圍內(nèi)，然后用Geteln1100免疫熒光定量分析儀檢測(cè)CRP含量并記錄所有數(shù)據(jù)，最后進(jìn)行比較相關(guān)數(shù)據(jù)。所有實(shí)驗(yàn)均按照我院檢驗(yàn)科SOP文件和廠家的說(shuō)明書(shū)操作。

1.5 觀察指標(biāo) 本次研究中的觀察指標(biāo)為輕、中、重度溶血標(biāo)本對(duì)應(yīng)的CRP檢驗(yàn)結(jié)果與其未溶血前的CRP結(jié)果的差異。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用臨床醫(yī)師統(tǒng)計(jì)學(xué)助手10.1軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）來(lái)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

輕度溶血組和對(duì)照組的檢查結(jié)果比較，無(wú)顯著性差異，（P＞0.05）；中度溶血標(biāo)本和對(duì)照組比較，差異顯著，（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。重度溶血標(biāo)本和對(duì)照組比較，差異顯著，P＜0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表1

表1 溶血對(duì)CRP檢測(cè)的影響

3 討論

本實(shí)驗(yàn)將輕、中、重度溶血分別和溶血前標(biāo)本中的CRP含量進(jìn)行比較，以研究不同程度的溶血標(biāo)本對(duì)檢查結(jié)果的影響。輕度溶血與溶血前血漿中含有的CRP比較，無(wú)顯著差異；中、重度溶血與溶血前血漿中含有的CRP比較，有顯著差異，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；本研究結(jié)果顯示輕度溶血的標(biāo)本對(duì)CRP的測(cè)定無(wú)明顯影響，但中、重度溶血對(duì)其結(jié)果會(huì)產(chǎn)生影響。

在試劑廠家說(shuō)明書(shū)和網(wǎng)絡(luò)學(xué)術(shù)資料中無(wú)法獲悉嚴(yán)重溶血的標(biāo)本影響干式免疫熒光測(cè)定CRP的原因，而溶血因素干擾免疫熒光法測(cè)定各類項(xiàng)目常見(jiàn)的原因主要有以下三種（1）嚴(yán)重溶血的血標(biāo)本，其紅細(xì)胞膜被破裂，使其釋放出血紅蛋白來(lái)[10]，造成反應(yīng)混合物顏色背景變暗，阻礙了儀器比色的光路傳導(dǎo)和透射，使儀器光路接收器對(duì)檢測(cè)光線接收的識(shí)別力和敏感性下降，從而使儀器接收到的信號(hào)減弱，導(dǎo)致結(jié)果偏低；（2）標(biāo)本溶血時(shí)破壞了紅細(xì)胞，細(xì)胞中的內(nèi)液被釋放到血液中，使血漿量增多，稀釋了被檢物質(zhì)，當(dāng)用儀器檢測(cè)后，結(jié)果低于未溶血時(shí)的結(jié)果；（3）嚴(yán)重溶血的血標(biāo)本，可能釋放出可以與抗體發(fā)生交叉反應(yīng)的抗原或其他干擾物質(zhì)，使測(cè)試帶上的復(fù)合物積聚增多（或減少），從而影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本試驗(yàn)中重度溶血引起CRP結(jié)果減低可能涉及前兩種原因較多，尤其是第二種原因，因此，溶血的標(biāo)本會(huì)稀釋和干擾被檢物質(zhì)，無(wú)論全血還是血漿或血清檢測(cè)CRP時(shí)均應(yīng)避開(kāi)標(biāo)本溶血。如果遇到中、重度溶血標(biāo)本必須重新采集血液標(biāo)本檢測(cè)，以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性[11-12]。

干式免疫熒光法檢測(cè)中、重度溶血標(biāo)本中CRP有顯著影響，致使檢驗(yàn)結(jié)果偏低，可能會(huì)耽誤臨床醫(yī)生的診斷，甚至造成嚴(yán)重后果。溶血標(biāo)本對(duì)不同的檢查項(xiàng)目影響不同，而且對(duì)檢查結(jié)果的影響和溶血的輕重程度還有關(guān)，因此血標(biāo)本檢測(cè)時(shí)檢查是否溶血很有必要。在日常工作中，需加強(qiáng)對(duì)血液標(biāo)本采集、保存、轉(zhuǎn)運(yùn)、檢驗(yàn)等各個(gè)環(huán)節(jié)都要規(guī)范性操作，并加強(qiáng)培訓(xùn)和管理，減少檢驗(yàn)誤差和偏倚，更好地服務(wù)于臨床，為患者后續(xù)治療提供可靠的參考依據(jù)[13-15]。