從光雷 肖蘊(yùn)祺 張倩雲(yún), 王志躍 張 珊 燕 磊 梁明振 施壽榮*

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所，揚(yáng)州 225125；2.揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院，揚(yáng)州 225009；3.廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南寧 530004；4.山東新希望六和集團(tuán)有限公司，青島 266061)

隨著畜牧業(yè)快速發(fā)展，長(zhǎng)期低劑量預(yù)防用藥或過(guò)量使用、濫用抗生素等因素，造成畜禽體內(nèi)藥物殘留和蓄積毒素、細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性、動(dòng)物免疫力下降等問(wèn)題日益突出。因此，我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部于2019年7月發(fā)布第194號(hào)公告，自2020年7月1日起，飼料生產(chǎn)企業(yè)停止生產(chǎn)含有促生長(zhǎng)類(lèi)藥物飼料添加劑(中藥類(lèi)除外)的商品飼料。開(kāi)發(fā)天然、綠色、無(wú)毒副殘留的抗生素替代物已刻不容緩。

化香果(PlotytaryastrohilaceaSieb. et Zuce)又稱(chēng)化香樹(shù)果，是胡桃科植物化香樹(shù)的果序。果序呈長(zhǎng)橢圓狀，萼片宿存，褐色?；銟?shù)在我國(guó)分布廣泛，在我國(guó)民間的應(yīng)用廣且歷史悠久，多以葉、果序入藥[1]?；愎蛑泻休^豐富的植物單寧?；愎麊螌帉儆邝坊▎螌?，主要成分為英國(guó)櫟鞣花素、木麻黃亭，均由2個(gè)六羥基聯(lián)苯二酰基與葡萄糖形成的酯。鞣花單寧經(jīng)過(guò)水解可以得到鞣花酸。化香果單寧具有特殊的生物學(xué)和藥理學(xué)活性，藥用價(jià)值較高[2]。已知國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)對(duì)化香果序提取物及藥理學(xué)活性的研究，多集中在化香樹(shù)及其果序提取的化香果單寧對(duì)抑制細(xì)胞毒性和腸道內(nèi)有害菌，抗氧化、預(yù)防癌癥和抗衰老作用，以及作為復(fù)方中藥治療急性慢性鼻炎和鼻竇炎的報(bào)道[3-4]。可見(jiàn)化香果單寧具有替代抗生素的潛力，但作為家禽飼料添加劑的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)旨在研究飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能、屠宰性能、器官指數(shù)、肉品質(zhì)、抗氧化功能和腸道發(fā)育的影響，為化香果單寧在家禽生產(chǎn)中的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用愛(ài)拔益加(AA)肉雞購(gòu)自江蘇京海禽業(yè)集團(tuán)有限公司?；愎麊螌?單寧含量≥65%，粉末狀，棕褐色)由中國(guó)林業(yè)科學(xué)研究院林產(chǎn)化學(xué)工業(yè)研究所植物單寧化學(xué)利用課題組提供。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取1日齡雄性AA肉雞288羽，隨機(jī)分為4組，每組6個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)12羽。對(duì)照組(PT0組)飼喂基礎(chǔ)飼糧，試驗(yàn)組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加100(PT100組)、500(PT500組)和1 000 mg/kg(PT1 000組)化香果單寧。試驗(yàn)期42 d。

1.3 基礎(chǔ)飼糧和飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所儀征試驗(yàn)基地開(kāi)展，試驗(yàn)雞采用網(wǎng)上平養(yǎng)模式，自由采食和飲水，試驗(yàn)初始溫度34 ℃，隨后每周降低2～3 ℃，直至降至24 ℃。每天24 h光照。通風(fēng)和免疫等其他管理措施按飼養(yǎng)管理手冊(cè)執(zhí)行。基礎(chǔ)飼糧按照NRC(1994)肉雞營(yíng)養(yǎng)需求配制并制粒，基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.4 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能

在1、21和42日齡分別稱(chēng)重，記錄剩余料重。分別計(jì)算1～21日齡、22～42日齡和1～42日齡各組肉雞的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 屠宰性能

42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1羽，測(cè)定宰前重、屠體重、全凈膛重、胸肌重、腿重、翅膀重、爪重、腹脂重和腹部脂帶寬，并計(jì)算屠宰率、全凈膛率、胸肌率、腿比率、翅膀率、爪重率和腹脂率。計(jì)算公式如下：

屠宰率(%)=100×屠體重(g)/宰前體重(g)；全凈膛率(%)=100×全凈膛重(g)/宰前體重(g)；腿比率(%)=100×兩側(cè)腿重(g)/全凈膛重(g)；翅膀率(%)=100×兩側(cè)翅膀重(g)/全凈膛重(g)；胸大(小)肌率(%)=100×兩側(cè)胸大(小)肌重(g)/全凈膛重(g)；爪重率(%)=100×[雙爪重(g)/(全凈膛重(g)+雙爪重(g)]；腹脂率(%)=100×[腹脂重(g)/(全凈膛重(g)+腹脂重(g)]。

1.4.3 器官指數(shù)

21和42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1羽進(jìn)行屠宰，解剖取出心臟、胰腺、肝臟(無(wú)膽囊)、腺胃和肌胃(去除內(nèi)容物及內(nèi)金)稱(chēng)重，按照公式計(jì)算器官指數(shù)：

器官指數(shù)(%)=100×器官鮮重(g)/宰前活重(g)。

1.4.4 肉品質(zhì)

42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1羽，將其屠宰解剖后，統(tǒng)一取左側(cè)整塊胸肌。根據(jù)《畜禽肉質(zhì)的測(cè)定》(NY/T 1333—2007)測(cè)定肉雞胸肌系水力、pH24 h和肉色；按照《肉嫩度的測(cè)定剪切力測(cè)定法》(NY/T 1180—2006)測(cè)定肉雞胸肌剪切力。

1.4.5 肌肉抗氧化指標(biāo)

測(cè)定21和42日齡肉雞胸肌中過(guò)氧化氫酶(CAT)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性及總抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量，所用試劑盒均購(gòu)于南京建成生物工程研究所。

1.4.6 腸道校正長(zhǎng)度和指數(shù)

21和42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1羽，屠宰后測(cè)量十二指腸和盲腸(兩側(cè))的長(zhǎng)度和重量(去除內(nèi)容物)，計(jì)算十二指腸和盲腸的校正長(zhǎng)度以及十二指腸和盲腸指數(shù)。

腸道指數(shù)(%)=100×腸道重量(g)/宰前活重(kg)；腸道校正長(zhǎng)度(cm/kg)=腸道長(zhǎng)度(cm)/宰前活重(kg)。

1.4.7 腸道黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)

21和42日齡時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取1羽，屠宰后迅速剪取空腸和回腸中段各1 cm左右，放入10%甲醛溶液中固定，24 h后更換新的10%甲醛溶液。石蠟包埋，連續(xù)切片，片厚5 μm，進(jìn)行規(guī)蘇木精-伊紅(HE)染色后運(yùn)用萊卡(Leica)圖像處理系統(tǒng)，于顯微鏡(DM4000B，Leica Microsystems，德國(guó))下觀測(cè)切片，測(cè)定絨毛高度(villus height)和隱窩深度(crypt depth)，計(jì)算絨毛高度/隱窩深度(V/C)。

1.5 數(shù)據(jù)處理與統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)和線(xiàn)性、二次分析，組間采用LSD法進(jìn)行多重比較檢驗(yàn)。結(jié)果用平均值和均值標(biāo)準(zhǔn)誤(SEM)表示，P<0.05表示顯著差異，0.05≤P<0.10表示有趨勢(shì)。

2 結(jié) 果

2.1 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，PT100組1～21日齡肉雞的ADFI顯著低于PT0組(P<0.05)，且ADFI與化香果單寧添加量呈顯著二次相關(guān)(P<0.05)。與PT0組相比，PT100組22～42日齡肉雞的料重比有降低趨勢(shì)(P=0.068)。

表2 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

2.2 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞屠宰性能的影響

由表3可知，飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞屠宰性能無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表3 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞屠宰性能的影響

2.3 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞器官指數(shù)的影響

由表4可知，PT1 000組42日齡肉雞肌胃指數(shù)顯著低于其他各組(P<0.05)，且肌胃指數(shù)與化香果單寧添加量呈顯著二次相關(guān)(P<0.05)。

表4 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞器官指數(shù)的影響

2.4 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞肉品質(zhì)的影響

由表5可知，飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞肉品質(zhì)無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表5 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞肉品質(zhì)的影響

2.5 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞胸肌抗氧化指標(biāo)的影響

由表6可知，42日齡時(shí)，PT500和PT1 000組肉雞胸肌T-SOD活性顯著高于PT0組(P<0.05)，且胸肌T-SOD活性與化香果單寧添加量呈顯著線(xiàn)性相關(guān)(P<0.05)。

表6 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞胸肌抗氧化指標(biāo)的影響

2.6 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞腸道校正長(zhǎng)度和指數(shù)的影響

由表7可知，飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞腸道校正長(zhǎng)度和指數(shù)無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表7 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞腸道校正長(zhǎng)度和指數(shù)的影響

2.7 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞腸道黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由表8可知，21日齡時(shí)，PT500組肉雞空腸絨毛高度顯著高于其他各組(P<0.05)，且空腸絨毛高度與化香果單寧添加量呈顯著線(xiàn)性相關(guān)(P<0.05)。42日齡時(shí)，PT100、PT500和PT1 000組肉雞空腸絨毛高度顯著高于PT0組(P<0.05)，且空腸絨毛高度與化香果單寧添加量呈顯著線(xiàn)性和二次相關(guān)(P<0.05)。

表8 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞空腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

由表9可知，42日齡時(shí)，PT0和PT100組肉雞回腸V/C顯著高于PT500組(P<0.05)，且回腸V/C與化香果單寧添加量呈顯著線(xiàn)性相關(guān)(P<0.05)。

表9 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞回腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響

3 討 論

3.1 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能的影響

3.2 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞屠宰性能和器官指數(shù)的影響

屠宰性能可直觀地反映出動(dòng)物體構(gòu)成和可食部分的比例，是衡量動(dòng)物生長(zhǎng)性能的重要指標(biāo)之一[11]。屠宰率和全凈膛率分別在80%和60%以上，則表示肉雞的產(chǎn)肉性能良好[12]。Jamroz等[13]研究表明，飼糧添加甜栗木單寧未對(duì)肉雞屠宰性能造成顯著影響。劉嬌等[14]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加辣木提取物(富含黃酮類(lèi)化合物)未對(duì)肉雞屠宰性能造成顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞屠宰性能未造成顯著影響，各組的屠宰率和全凈膛率分別在92%和78%以上。與前人研究結(jié)果[13-14]一致，表明化香果單寧對(duì)肉雞屠宰性能無(wú)負(fù)面影響。

器官指數(shù)能夠在一定程度上反映肉雞發(fā)育狀況，對(duì)于理論研究和生產(chǎn)實(shí)踐有重要意義。劉嬌等[15]研究表明，飼糧添加辣木提取物(富含黃酮類(lèi)化合物)對(duì)肉雞器官指數(shù)均未造成顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果與之相似，飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞胰腺、肝臟和腺胃指數(shù)均無(wú)顯著影響。另外，飼糧添加適量化香果單寧能夠提高肌胃指數(shù)，表明化香果單寧對(duì)肉雞肌胃發(fā)育具有促進(jìn)作用。

3.3 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞肉品質(zhì)的影響

肌肉pH、肉色、系水力和嫩度等指標(biāo)能夠更加直觀地綜合反映肉品質(zhì)，也能夠決定消費(fèi)者的消費(fèi)取向。肌肉系水力是肌肉組織保持水分的能力，是評(píng)價(jià)家禽肉品質(zhì)的重要指標(biāo)之一[16]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加化香果單寧未對(duì)胸肌肉系水力造成顯著影響。Przywitowski等[17]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加單寧對(duì)火雞胸肌系水力并無(wú)顯著影響，這與本試驗(yàn)得到的結(jié)果一致。肉雞宰后肌肉的pH變化反映了肌肉內(nèi)能量和物質(zhì)的代謝變化過(guò)程，此過(guò)程肌肉pH會(huì)逐漸降低，較低的pH可以抑制破壞性微生物的大量繁殖，防止肉腐敗[18]。Jung等[19]研究發(fā)現(xiàn)，肉雞飼糧中添加沒(méi)食子酸和共軛亞油酸復(fù)合物對(duì)肌肉pH無(wú)顯著差異。Przywitowski等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在火雞飼糧中添加蠶豆單寧對(duì)胸肌pH無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)中，飼糧添加化香果單寧未對(duì)肌肉pH24 h造成顯著影響，這與前人研究結(jié)果[18-20]一致。肉色和嫩度都是評(píng)價(jià)肉質(zhì)的重要指標(biāo)，本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加化香果單寧未對(duì)肉雞肉色和嫩度造成顯著影響。綜上所述，飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞肉品質(zhì)相關(guān)指標(biāo)均未造成顯著影響。

3.4 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞胸肌抗氧化指標(biāo)的影響

植物單寧具有抗氧化的生物學(xué)功能，其能夠有效清除體內(nèi)氧自由基，提高抗氧化酶活性，降低體內(nèi)氧化應(yīng)激水平[7,15]。CAT和T-SOD均是機(jī)體中的抗氧化酶之一，能夠清除體內(nèi)的氧自由基。T-AOC則是反映機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的綜合指標(biāo)。Chamorro等[21]研究表明，肉雞飼糧中添加10%葡萄渣(主要成分為植物單寧)能夠增強(qiáng)肉雞的抗氧化性能，延緩脂質(zhì)氧化。Farahat等[22]也研究表明，在肉雞飼糧中添加植物單寧(單寧含量≥40%)能夠顯著提高肝臟谷胱甘肽含量，降低肌肉MDA含量。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加化香果單寧能夠顯著提高42日齡肉雞的胸肌T-SOD活性，且化香果單寧與肉雞胸肌T-SOD活性呈劑量依賴(lài)關(guān)系。這與前人研究結(jié)果[21-22]一致，表明飼糧添加化香果單寧能夠提高肉雞的抗氧化功能。

3.5 飼糧添加化香果單寧對(duì)肉雞腸道發(fā)育的影響

腸道是肉雞消化吸收的主要器官。各腸段長(zhǎng)度及重量反映了腸段的生長(zhǎng)發(fā)育程度，而發(fā)育程度又能反映消化吸收的功能。本試驗(yàn)以腸道校正長(zhǎng)度和指數(shù)來(lái)評(píng)價(jià)腸道生長(zhǎng)發(fā)育狀況。已有研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加適量的單寧能夠通過(guò)減輕氧化應(yīng)激，促進(jìn)腸道有益菌繁殖，抑制有害菌繁殖，從而保護(hù)和促進(jìn)腸道發(fā)育[19,23]。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加化香果單寧未對(duì)肉雞腸道校正長(zhǎng)度和指數(shù)造成顯著影響，這與前人研究結(jié)果[19,23]并不一致?？赡苁翘砑拥膯螌幪崛?lái)源和活性成分濃度不同導(dǎo)致的差異，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

腸道絨毛高度、隱窩深度和V/C是衡量腸道消化吸收能力的重要指標(biāo)之一。已有研究發(fā)現(xiàn)，肉雞飼糧中添加橡椀單寧能夠提高42日齡肉雞空腸和回腸絨毛高度[15]。Brus等[24]研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加低濃度的鞣花單寧能夠刺激腸道上皮細(xì)胞增殖，促進(jìn)肉雞腸道發(fā)育。本試驗(yàn)結(jié)果與之相似，飼糧添加適量化香果單寧能夠顯著提高21和42日齡肉雞空腸絨毛高度，并且空腸絨毛高度與單寧添加量呈顯著線(xiàn)性相關(guān)。另外，肉雞回腸V/C與化香果單寧添加量呈顯著線(xiàn)性相關(guān)。這與本試驗(yàn)生長(zhǎng)性能相對(duì)應(yīng)，肉雞ADFI降低，AGD卻未降低，推測(cè)化香果單寧能夠提高肉雞小腸吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的面積，從而減輕化香果單寧苦澀味帶來(lái)的負(fù)面影響。這可能是由于低劑量的化香果單寧能夠促進(jìn)腸道上皮細(xì)胞增殖，保護(hù)細(xì)胞增殖過(guò)程DNA完整性，從而促進(jìn)腸道健康發(fā)育，有益于生長(zhǎng)性能。

4 結(jié) 論

飼糧添加化香果單寧能夠提高肉雞抗氧化功能、空腸絨毛高度和回腸V/C，降低1～21日齡肉雞ADFI，且具有降低22～42日齡肉雞料重比的趨勢(shì)。綜合各項(xiàng)指標(biāo)，化香果單寧在肉雞飼糧中的推薦添加量為500 mg/kg。