王喜鳳

（盤錦市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科，遼寧 盤錦124000）

宮頸癌是發(fā)病率較高的一種感染性疾病，該疾病的發(fā)生與高危型人乳頭瘤病毒感染密切相關(guān)。有研究顯示，隨著宮頸病變嚴重程度增加，人乳頭瘤病毒感染檢出率也隨之提高，宮頸癌患者人乳頭瘤病毒感染率接近100%[1]。致瘤病毒會突破機體抵抗病毒的防御機制，進而引起病毒的持續(xù)感染，其在宮頸病變的演進過程中具有重要作用。干擾素是機體防御的重要分子，可有效誘導(dǎo)雙鏈RNA激活蛋白酶R，其不僅在細胞生長、分化和凋亡等具有重要作用，在抗腫瘤、抵御病毒感染中也發(fā)揮重要的生物學效應(yīng)[2]?；诖耍狙芯窟x取2018年2月至2019年10月本院收治的62例宮頸癌患者、105例宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變患者以及20例宮頸健康者作為研究對象，比較HPV1618型E6蛋白、蛋白激酶R以及磷酸化型蛋白激酶R在宮頸病變的表達，并探討在宮頸病變發(fā)生、發(fā)展以及預(yù)后中的意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2018年2月至2019年10月在本院就診的62例宮頸癌患者（甲組）、105例宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變患者（CINⅠ33例、CINⅡ37例、CINⅢ35例，乙組）以及20例宮頸健康者（丙組）作為研究對象。甲組年齡22～68歲，平均（51.02±12.32）歲；腺癌11例，鱗癌51例；細胞分化程度：高分化27例，中低分化35例；國際婦產(chǎn)科學聯(lián)盟（FIGO）分期：Ⅰ期11例，Ⅱ期32例，Ⅲ期15例，Ⅳ期4例。乙組年齡24～75歲，平均（50.63±10.20）歲；CINⅠ33例，CINⅡ37例，CINⅢ35例。丙組年齡22～72歲，平均（51.63±11.54）歲。3組年齡等臨床資料比較差異無統(tǒng)計學意義，具有可比性。所有研究對象均對本研究知情同意，并自愿簽署知情同意書。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會審核批準。

納入標準：患者經(jīng)術(shù)后病理診斷均確診；年齡＞18歲；意識清晰且無交流障礙；依從性高。排除標準：合并其他惡性腫瘤疾?。话橛欣夏臧V呆等精神性疾??；妊娠及哺乳期女性。

1.2 方法 取3組宮頸組織作為活檢組織標本，將標本連續(xù)切片，厚度為4 μm，載玻片經(jīng)APES防脫片膠處理后將其置于恒溫60℃烤箱中烘烤4～6 h。組織切片脫蠟處理后采取高溫高壓抗原修復(fù)，根據(jù)免疫組化染色試劑盒中的操作說明書進行操作，TBS代替一抗作為空白組對照，一抗工作液濃度為1∶100。

1.3 觀察指標 比較3組HPV1618型E6蛋白、蛋白激酶R、磷酸化型蛋白激酶R表達情況。采用免疫組化法檢測，400倍光鏡下隨機選擇8個視野，各個視野均觀察100個細胞，統(tǒng)計陽性細胞并計算平均值。將陽性細胞顯色輕度以及染色體數(shù)進行分級：未見陽性細胞不計分，陽性細胞占比＜25%計1分，陽性細胞占比＜50%計2分，陽性細胞占比＜75%計3分，陽性細胞占比≥75%計4分；無著色計0分，淺黃色計1分，棕黃色計2分，棕褐色計3分。2項分數(shù)相加，0、1分為（－），2、3分為（＋），4、5分為（＋＋），6、7分為（＋＋＋），陽性為（＋～＋＋＋）[3]。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗，相關(guān)性分析用Spearman等級相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 3 組HPV1618型E6蛋白、蛋白激酶R以及磷酸化型蛋白激酶R表達比較 甲組HPV1618型E6蛋白陽性表達率明顯高于乙組（CINⅠ）和丙組（P＜0.05）。甲組蛋白激酶R陽性表達率明顯高于乙組（CINⅠ、CINⅡ）和丙組（P＜0.05）。3組磷酸化型蛋白激酶R陽性表達率比較差異無統(tǒng)計學意義，見表1。

表1 3組HPV1618型E6蛋白、蛋白激酶R以及磷酸化型蛋白激酶R表達情況比較[n（%）]Table 1 Comparison of the expression of HPV1618 E6 protein,protein kinase R and phosphorylated protein kinase R among three groups[n(%)]

2.2 HPV1618型E6蛋白、蛋白激酶R以及磷酸化型蛋白激酶R表達與宮頸癌預(yù)后的關(guān)系 病情進展與臨床分期顯著相關(guān)（P＜0.05）。甲組進展與無進展患者HPV1618型E6蛋白、磷酸化型蛋白激酶R陽性表達率比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），而蛋白激酶R陽性表達率比較差異無統(tǒng)計學意義，宮頸癌病情進展與E6蛋白、磷酸化型蛋白激酶R陽性表達率相關(guān)（P＜0.05），見表2。

3 討論

人乳頭狀瘤病毒是一種常見致瘤病毒，具有較強的宿主和組織特異性，該病毒也是宮頸病變檢出率最高的病毒之一，可突破機體的抗病毒防御機制，在宮頸病變發(fā)生和發(fā)展過程中具有重要意義[4-5]。有研究[6]顯示，高危型人乳頭狀瘤病毒持續(xù)感染是CINⅠ發(fā)展為CINⅢ甚至宮頸浸潤癌的重要因素。有數(shù)據(jù)顯示，約4.3%單一高危型人乳頭狀瘤病毒感染陽性女性可在感染的4年內(nèi)發(fā)展為CINⅢ，感染10年內(nèi)發(fā)展為CINⅢ發(fā)生率＞7%，但也不可忽視病毒感染陰性女性發(fā)展為CINⅢ的風險[7]。目前還未明確宮頸癌發(fā)生的分子機制，單一高危型人乳頭狀瘤病毒持續(xù)感染引發(fā)宮頸癌可能是通過干擾某些抑癌因子或致癌因子，導(dǎo)致細胞出現(xiàn)克隆永生化，進而出現(xiàn)癌變[8]。本研究結(jié)果顯示，E6蛋白、蛋白激酶R陽性表達率與宮頸病變級別呈正相關(guān)（P＜0.05）。宮頸癌病情進展與E6蛋白、磷酸化型蛋白激酶R陽性表達率相關(guān)（P＜0.05）。蛋白激酶R對機體抵抗病毒感染具有重要意義，被激活的蛋白激酶R可通過一系列級聯(lián)反應(yīng)完全抑制蛋白合成。誘導(dǎo)感染細胞凋亡、抑制蛋白合成是蛋白激酶R抑制病毒復(fù)制的主要機制[9-10]。

甲組蛋白激酶R陽性表達率明顯高于磷酸化型蛋白激酶R（P＜0.05），說明高級別病變中存在蛋白激酶R激活障礙。E6蛋白可拮抗蛋白激酶R誘導(dǎo)細胞凋亡以及蛋白合成的抑制，在一定程度上減弱了凋亡基因依賴于EIF2α途徑的促凋亡作用[11]。病變細胞、病毒感染細胞因失去磷酸化型蛋白激酶R對其負調(diào)控作用，病變細胞惡性轉(zhuǎn)化，使病情由低級別CIN病變轉(zhuǎn)至高級CIN，最終發(fā)展為宮頸癌[12-13]。

綜上所述，HPV1618感染可阻礙蛋白激酶R激活，突破其防御機制，在宮頸癌疾病發(fā)展過程中意義重大，不利于疾病預(yù)后，磷酸化型蛋白激酶R可抑制疾病進展，改善預(yù)后。