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        三種方式聯(lián)合檢測在診斷結(jié)核性胸膜炎中的應用價值

        2021-05-28 07:16:18天津市靜海區(qū)醫(yī)院301600張瑩
        首都食品與醫(yī)藥 2021年9期
        關(guān)鍵詞:胸膜炎結(jié)核性胸腔

        天津市靜海區(qū)醫(yī)院(301600)張瑩

        臨床對結(jié)核性胸膜炎的診斷仍然以聯(lián)合診斷結(jié)果為準,主要包括了解病史、體征檢查、X線表現(xiàn)、實驗室檢查及組織病理學。隨著分子生物學與免疫學的發(fā)展,多種新型技術(shù)開始應用于結(jié)核性胸膜炎的診斷中[1][2]。為明確胸腔積液腺苷脫氨酶(ADA)/血清ADA檢測、結(jié)核分枝桿菌/利福平耐藥基因檢測(Xpert MTB/RIF)及外周血結(jié)核分枝桿菌(MTB)感染T細胞斑點試驗(T-SPOT.TB)聯(lián)合檢測在診斷結(jié)核性胸膜炎中的應用價值[3][4]。本文對我院檢驗科2015年2月~2020年10月經(jīng)多種方式聯(lián)合確診的65例結(jié)核性胸膜炎患者開展回顧性分析,均接受胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測、外周血T-SPOT.TB檢測及三種方式聯(lián)合檢測,現(xiàn)就本次研究成果作如下的分析論述。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 對我院檢驗科2015年2月~2020年10月經(jīng)多種方式聯(lián)合確診的65例結(jié)核性胸膜炎患者為研究對象,所有患者一般資料齊全,對本次研究知情,且本次研究已經(jīng)獲得我院醫(yī)學倫理委員會批準執(zhí)行。65例患者中男41例,女24例,年齡37~76歲,平均(56.3±7.4)歲。

        1.2 方法 胸腔積液ADA/血清ADA檢測[5]:采集患者5ml抗凝的胸腔積液,以3000r/min離心處理15min,取上層清液,同時采集患者空腹狀態(tài)下3ml的外周靜脈血,以3000r/min離心處理3min,分離血清。而后采用C8000全自動分析儀測定胸腔積液中的ADA和血清ADA,計算兩者比值。若胸腔積液ADA與血清ADA比值>1.0且胸腔積液ADA>24U/L則可判定為胸腔積液ADA/血清ADA檢測臨界值。

        Xpert MTB/RIF檢測[6]:離心處理胸腔積液后,在其中加入2ml的樣本處理液重懸沉淀物充分混勻,取2ml加入至試劑匣。而后采用Gene Xpert MTB/RIF檢測系統(tǒng)檢測,2h后讀取結(jié)果。

        外周血T-SPOT.TB檢測[7]:借助肝素鈉抗凝管采集患者5ml的外周血液,并加入淋巴細胞分解液,以此實現(xiàn)分離單個核細胞的目的。隨后使用MD-AIM-V細胞培養(yǎng)液將細胞濃度調(diào)整為2.5×106ml,對已經(jīng)經(jīng)過γ干擾素單抗的為微孔板進行測定,設(shè)定陽性孔與陰性孔,分別加入50μl的植物血凝素、AIM-V、CEP-10及ESAT-6培養(yǎng)液。同時每一個孔中加入100μl稀釋好的單個核細胞,開展孵育、洗板、顯色、蒸餾水終止反應。陽性:陰性孔斑點數(shù)≤5時,陽性孔斑點數(shù)-陰性斑點數(shù)≥6;陰性孔斑點數(shù)≥6時,陽性斑點數(shù)≥2倍陰性對照孔斑點數(shù)。

        1.3 觀察指標與評價標準 以聯(lián)合診斷結(jié)果為金標準,比較胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測、外周血T-SPOT.TB檢測及三項聯(lián)合檢測的準確率、靈敏度、特異性。靈敏度=[真陽性/(真陽性+假陰性)]×100%;特異性=[真陰性/(真陰性+假陽性)]×100%。

        1.4 統(tǒng)計學方法 研究結(jié)果數(shù)據(jù)應用統(tǒng)計學軟件SPSS23.0完成處理,計量資料、計數(shù)資料分別用±s、(n,%)表示,差異性分別對應t檢驗、X2檢驗;檢驗依據(jù):P<0.05表示差異顯著,有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié)果

        2.1 單項檢測與三項聯(lián)合檢測的準確率比較 胸腔積液A D A/血清A D A檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測診斷準確率均低于聯(lián)合診斷(金標準),比較差異有統(tǒng)計學意義(X2=26.481/14.444/9.669,P=0.000/0.000/0.002<0.05);三項聯(lián)合檢測診斷準確率低于聯(lián)合診斷(金標準),但比較差異無統(tǒng)計學意義(X2=2.031,P=0.154>0.05)。胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測診斷準確率均低于三項聯(lián)合檢測,比較差異有統(tǒng)計學意義(X2=20.440/9.119/4.866,P=0.000/0.000/0.027<0.05)。見附表1。

        附表1 單項檢測與三項聯(lián)合檢測的準確率比較(n,%)

        2.2 單項診斷與三項聯(lián)合檢測靈敏度、特異性比較 胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測靈敏度均低于三項聯(lián)合檢測,比較差異無統(tǒng)計學意義(X2=0.952/1.605/0.818,P=0.132/0.205/0.366>0.05);胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測特異性均高于三項聯(lián)合檢測,比較差異無統(tǒng)計學意義(X2=0.113/0.152/0.417,P=0.737/0.696/0.519>0.05)。見附表2。

        附表2 單項診斷與三項聯(lián)合檢測靈敏度、特異性比較(n,%)

        2.3 診斷的ROC曲線 胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測、外周血T-SPOT.TB及聯(lián)合檢測的ROC曲線下面積分別為0.90(95%CI:0.83~0.97,P<0.05),0.89(0.80~0.96,P<0.05),0.91(0.82~0.98,P<0.05),和0.92(0.82~0.99,P<0.05)。見附圖。

        附圖 單項診斷與三項聯(lián)合檢測的ROC曲線

        3 討論

        結(jié)核性胸膜炎是臨床一種常見的肺外結(jié)核病,其發(fā)病與結(jié)核分枝桿菌感染及機體的免疫狀態(tài)密切相關(guān)。診斷方面,以實驗室檢查、X線檢查、胸部CT檢查及胸膜活檢為主,均可取得較好的診斷效果[1][2]。尤其是組織病理學是結(jié)核性胸膜炎診斷的依據(jù),有極高的診斷效果,但組織病理學檢查是一種有創(chuàng)檢查,操作較為復雜,多數(shù)的患者無法順利完成檢查[8][9]。

        胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測及外周血T-SPOT.TB檢測均是近年來廣泛應用于結(jié)核性胸膜炎診斷的方式[10]。Xpert MTB/RIF檢測是一種新型的分子診斷技術(shù),優(yōu)勢在于有較強的自動化水平,可以有效減少非特異性擴增[10][11]。更為重要的一點是,可以在2h內(nèi)得到測定結(jié)果,同時可以最大限度減少人為干預,特異性高。但也有一定的局限性,比如靈敏度不高,多在37%~77%。ADA是臨床診斷結(jié)核性胸膜炎的理想指標,當結(jié)核分枝桿菌的結(jié)核蛋白進入到患者胸腹腔后會導致淋巴細胞增殖,繼而導致ADA含量升高,通過胸腔積液ADA/血清ADA檢測可以提升診斷的特異度[12]。外周血T-SPOT.TB檢測是干擾素-γ釋放試驗的一種,可以通過CEP-10及ESAT-6培養(yǎng)液來檢測出結(jié)核分枝桿菌,外周血中的結(jié)核分枝桿菌特異性T細胞可以有效分離,經(jīng)過培養(yǎng)后可以分泌出干擾素γ,繼而借助相應的抗體來測定其濃度,測定患者是否存在結(jié)核分枝桿菌感染[13]。在單項診斷與三項聯(lián)合檢測靈敏度、特異性比較中發(fā)現(xiàn),三項聯(lián)合檢測的靈敏度高于單項診斷,但比較差異無統(tǒng)計學意義,分析原因可能與樣本量較少有一定的關(guān)系。三種方式聯(lián)合檢測的準確率高于單一檢測方式,且與金標準結(jié)果比較差異無統(tǒng)計學意義,表明三種方法聯(lián)合檢測在診斷結(jié)核性胸膜炎中有良好的效果,值得推廣。同時筆者發(fā)現(xiàn)胸腔積液ADA/血清ADA檢測、Xpert MTB/RIF檢測、外周血T-SPOT.TB及聯(lián)合檢測的ROC曲線下面積分別為0.90(95%CI:0.83~0.97,P<0.05),0.89(0.80~0.96,P<0.05),0.91(0.82~0.98,P<0.05),和0.92(0.82~0.99,P<0.05),三者差異不明顯,但聯(lián)合檢測可提高ROC曲線下面積,提示聯(lián)合檢測診斷效能更高。

        綜上所述,三種方式聯(lián)合檢測在結(jié)核性胸膜炎診斷中有較高的準確性,臨床應用價值顯著。

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