李中波 石劍鋒 堯國民 羅世民 羅維 李進軍 胡輝 侯強紅

摘要：牛肝片吸蟲病主要在我國中南、東南部等地區(qū)流行，嚴重阻礙了我國養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。在一例牛肝片吸蟲病的診治過程中，根據(jù)病原體的屬性及流行特點，采用臨床癥狀與分子檢測相結(jié)合的方式對該病進行了診斷，并提出了科學(xué)合理的防治方法，以期為臨床診療該病提供參考。

關(guān)鍵詞：牛;肝片吸蟲病;診斷;治療;預(yù)防

中圖分類號：S858.23? ? ? ? 文獻標識碼：A? ? ? ? 文章編號：1007-273X（2021）02-0015-02

牛肝片吸蟲病是由肝片吸蟲寄生于牛的肝管、膽管內(nèi)所引起的一種常見寄生蟲病[1]。該病主要引起牛消瘦、貧血、異嗜、腹瀉、發(fā)育不良及生產(chǎn)性能下降等一系列臨床癥狀，嚴重感染時可直接導(dǎo)致牛死亡[2]。該病流行范圍廣，全球均有相關(guān)報道，多發(fā)于多雨且潮濕的夏秋兩季，且流行范圍較為固定[3]。放牧牛群的感染率高于圈養(yǎng)牛群，某些區(qū)域感染率高達100%[4]。目前，我國中南、東南部等地區(qū)的牛群飼養(yǎng)模式大多為山地放養(yǎng)，大大增加了牛群感染肝片吸蟲的幾率，故牛肝片吸蟲病已嚴重阻礙了我國養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。因此，在流行區(qū)域?qū)υ摬∵M行科學(xué)合理的診治和檢測，可為今后我國在該病的監(jiān)測和防控方面提供一定的技術(shù)支撐。

1 發(fā)病情況

2019年5月26日，湖南省懷化市新晃縣某養(yǎng)殖戶反映在其所飼養(yǎng)的30余頭牛中，有1頭犢牛出現(xiàn)異常癥狀。該牛表現(xiàn)體格消瘦、反應(yīng)遲鈍、精神不振、食欲廢絕、毛焦易斷，時而腹瀉時而便秘等一系列癥狀。養(yǎng)殖戶曾用青霉素、鏈霉素、恩諾沙星、氟苯尼考等藥物進行治療，病情未得到控制反而愈加嚴重。筆者現(xiàn)場發(fā)現(xiàn)病牛的眼瞼、額下、胸腹等部位均出現(xiàn)不同程度的水腫，肝區(qū)疼痛拒檢。

2 臨床證狀

該犢牛體溫39～40 ℃，早期出現(xiàn)精神沉郁、食欲下降、體格消瘦、毛焦易斷，腹瀉與便秘交替出現(xiàn)等一系列癥狀。后期，該病牛的眼瞼、額下、胸腹等部位均出現(xiàn)不同程度的水腫，尿液呈黃褐色，可視黏膜蒼白;叩診肝區(qū)濁音變大，疼痛敏感。

3 診斷

3.1 初診

根據(jù)該病牛所表現(xiàn)出的一系列臨床癥狀、養(yǎng)殖戶用藥情況及臨床診斷經(jīng)驗初步判定該病為肝片吸蟲病。

3.2 實驗室診斷

收集該犢牛的新鮮糞便于自封袋中，置于冰盒內(nèi)，帶回實驗室進行病原體檢查。用糞便DNA提取試劑盒（北京天根生化科技有限公司）提取糞便中的總DNA。將提取的好的DNA樣品置于-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

根據(jù)已公布的肝片吸蟲cox1基因序列（GenBank Number：AB300704），設(shè)計一對引物（cox1-F：G TTTAGGTAGTGTTGTTTGGGC;cox1-R：CCCAACAT TATCAACCAGG），以擴增總DNA的cox1基因部分序列。反應(yīng)體系為50 μL，反應(yīng)條件為：95 ℃（預(yù)熱）5 min， 95 ℃（變性）30 s，53 ℃（退火）30 s， 72 ℃（延伸）1 min，共35個循環(huán);最后72 ℃（延伸）5 min。反應(yīng)完全后，吸取5 μL PCR產(chǎn)物在1.5%瓊脂糖上進行凝膠電泳檢測，結(jié)果顯示為陽性。將PCR產(chǎn)物發(fā)送至生工生物工程（上海）股份有限公司進行測序，獲得cox1基因的部分序列。

將獲得的序列在GenBank上進行BLAST搜索分析，發(fā)現(xiàn)該序列與已公布的肝片吸蟲cox1基因序列（GenBank number：AB300704）相似度為100%，從而確定該病原體為肝片吸蟲，確診該病為肝片吸蟲病。

4 治療

根據(jù)確診結(jié)果及該養(yǎng)殖場的用藥情況，采用氯氰碘柳胺鈉+中藥驅(qū)蟲配伍方式對該病牛進行治療。清晨空腹時灌喂氯氰碘柳胺鈉，劑量為5 mg/kg，1次/d，連用5 d。傍晚歸欄時，用綿馬、貫眾各45 g，檳榔、茯苓、龍膽草各30 g，木通、澤瀉、蘇木、肉豆蔻、甘草、厚樸各20 g研磨成粉末，混勻加開水攪拌后灌服[5]，1次/d，連用5 d，該犢牛病情好轉(zhuǎn)，2周后基本恢復(fù)正常。

5 預(yù)防措施

5.1 加強飼養(yǎng)及衛(wèi)生管理

養(yǎng)殖戶在進行飼料配比的過程中，應(yīng)當注重粗飼料和精飼料的搭配比例，適當增加維生素和礦物質(zhì)的含量，以提高牛的身體素質(zhì)，增加抵抗力，同時也要保證牛群的飲水和飼草衛(wèi)生[6]。及時清掃牛圈，定期對牛圈進行消毒。掌握放牧?xí)r間，不在低洼處放牧，以盡量減少牛群感染肝片吸蟲的幾率。糞便置于一偏僻且低洼處進行堆積發(fā)酵。

5.2 定期驅(qū)蟲

定期驅(qū)蟲是預(yù)防肝片吸蟲最有效的方法，每年春秋兩季各進行1次驅(qū)蟲[7]，驅(qū)蟲后的糞便要置于一偏僻且低洼處堆積發(fā)酵[8]。

5.3 消滅中間宿主

肝片吸蟲的中間宿主為淡水螺。根據(jù)淡水螺的生活屬性，在牧區(qū)內(nèi)使用1∶5 000的硫酸銅溶液對淡水螺進行滅殺[5]。

5.4 加強養(yǎng)殖戶的防范意識

每年派獸醫(yī)技術(shù)人員深入養(yǎng)牛、養(yǎng)羊?qū)I(yè)戶，講解牛羊肝片吸蟲病的防疫知識[5]。提倡養(yǎng)殖戶通過自學(xué)等方式來提高對肝片吸蟲病的診治水平及防范意識。

6 小結(jié)

牛肝片吸蟲病是牛體內(nèi)一種常見寄生蟲病，主要引起牛消瘦、貧血、異嗜、腹瀉、發(fā)育不良及生產(chǎn)性能下降等一系列臨床癥狀，嚴重阻礙了我國養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。牛輕度感染時一般不會表出明顯的臨床癥狀，導(dǎo)致養(yǎng)殖戶常常忽略該病的存在及危害性。傳統(tǒng)的檢測技術(shù)操作過于繁瑣，造成診治過程不方便，而利用分子檢測技術(shù)不僅可克服傳統(tǒng)檢測技術(shù)的缺陷，還大大提高了檢測結(jié)果的準確性，為養(yǎng)殖戶對該病的診斷和治療提供了便捷有效的途徑。此外，本文所采用的診斷和防治方法也可為今后的臨床診療提供技術(shù)參考。

參考文獻：

[1] 郝教欣.牛肝片吸蟲病的防治措施[J].畜禽業(yè)，2018，29（8）：112-113.

[2] 孫 麗，譚 艷.肉牛肝片吸蟲病的臨床癥狀、實驗室檢查與防治措施[J].現(xiàn)代畜牧科技，2017（11）：126.

[3] 魏彩艷.牛肝片吸蟲病的防治[J].養(yǎng)殖與飼料，2019（2）：55-56.

[4] 曹仁山，趙克華，羅進昌，等.淺談牛肝片吸蟲的防治措施[J]. 畜禽業(yè)，2015（4）：73.

[5] 張友亮.一例水牛肝片吸蟲病的診治體會[J].福建畜牧獸醫(yī)，2019，41（3）：51-52.

[6] 王玉龍.一例牛肝片吸蟲病的診治[J].當代畜禽養(yǎng)殖業(yè)，2018（6）：35.

[7] 馬曉鵬.牛肝片吸蟲病防治[J].中國畜禽種業(yè)，2017（10）：109.

[8] 朱義能，唐貴才.牛肝片吸蟲病的防治[J].養(yǎng)殖與飼料，2015（10）：54-55.