鄭 雷，劉欣怡，楊涌玲

（四川中醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校 藥學(xué)院，四川 綿陽 621000）

柴胡為傘形科植物柴胡Bupleurum chinense DC.的干燥根，屬多年生中藥材，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品[1]，具有保肝、抗炎、解熱、鎮(zhèn)痛、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)及治療心血管系統(tǒng)疾病等功效[2-3]，藥用歷史悠久。柴胡為我國常用大宗藥材，為柴胡注射液、氣滯胃痛顆粒、感冒清熱顆粒、正柴胡飲膠囊、護(hù)肝片等中成藥的主要原料，年需求量較大。近年來，隨著柴胡野生資源的逐漸枯竭，為滿足市場供應(yīng)開展了柴胡人工栽培研究[4-7]，然而種子質(zhì)量仍是影響柴胡規(guī)?；a(chǎn)的關(guān)鍵問題。研究表明，柴胡種質(zhì)、生長年限、產(chǎn)地、種子成熟度及采收期等因素均對柴胡種子質(zhì)量有顯著影響[8-12]，同時相關(guān)研究及生產(chǎn)實踐亦表明，硼噴施可提高作物種子質(zhì)量[13-16]，然而關(guān)于硼噴施對柴胡種子質(zhì)量的影響卻尚未見報道。本研究以柴胡為試驗材料，研究硼噴施對柴胡生長及種子質(zhì)量的影響，以期為柴胡良種繁育及優(yōu)質(zhì)種子生產(chǎn)提供科學(xué)參考。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

本研究試驗材料為北柴胡新審定品種川北柴1號，于2017 年9 月種植，2019 年5 月在柴胡初花期時選擇生長基本一致的植株進(jìn)行掛牌標(biāo)記和處理，每個處理15 株。

1.2 試驗處理

對照組：采用清水噴施處理；

0.3%硼砂組：采用0.3%硼砂噴施處理；

0.6%硼砂組：采用0.6%硼砂噴施處理；

0.9%硼砂組：采用0.9%硼砂噴施處理。

1.3 測定指標(biāo)和方法

株高、冠幅長、冠幅寬及根長測定：采用卷尺測量。

單株總小花序數(shù)、結(jié)實小花序數(shù)測定：采用計數(shù)法。

莖粗、根粗、種子長及種子寬：采用卡尺測量。

單株柴胡干物質(zhì)量及種子千粒重測定：采用稱重法。

種子分級：采用篩選法。

種子飽滿度測定：隨機選取種子50 粒，用蒸餾水浸泡 24 h 后進(jìn)行縱切觀察，凡有胚的種子為飽滿種子[17]。重復(fù)3 次。

種子萌發(fā)率測定：種子經(jīng)表面消毒后，隨機取50 粒種子均勻置于已消毒的砂床發(fā)芽盒中，于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，30 d 后統(tǒng)計種子萌發(fā)率[17]。重復(fù)3 次。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

用DPS 9.5 等軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，多組間比較采用方差分析，兩組間比較采用t 檢驗。以P ＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 硼噴施對柴胡生長的影響

硼噴施影響柴胡植株生長（見表1）。柴胡株高隨硼噴施濃度提高先增加后降低，0.6%硼砂噴施處理的柴胡株高最高，較對照組增加13.9%（P ＜0.05）；柴胡莖粗隨硼噴施濃度的提高先降低后增加，0.3%硼砂噴施處理的柴胡莖粗最大，較對照組增加12.6%（P ＜0.05）；柴胡冠幅長隨硼噴施濃度提高而增加，冠幅寬則先增加后降低，0.3%硼砂噴施處理的柴胡冠幅長和冠幅寬最低，較對照組降低25.8%和24.2%（P ＜0.05）；柴胡分枝數(shù)、根長和根粗隨著硼噴施濃度的提高而降低，0.9%硼砂噴施處理的柴胡分枝數(shù)較對照降低42.6%（P ＜0.05），而0.3%硼砂噴施處理的柴胡根長和根粗則較對照組提高9.4%和8.4%（P ＜0.05）。結(jié)果表明，硼噴施處理可降低柴胡冠幅長、冠幅寬和分枝數(shù)，促進(jìn)柴胡株高、根長和根粗生長。

表1 硼噴施對柴胡生長的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 1 Effects of spraying boron on the growth of B. chinense（±s，n ＝ 15）

表1 硼噴施對柴胡生長的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 1 Effects of spraying boron on the growth of B. chinense（±s，n ＝ 15）

注：多組間兩兩比較，字母完全不同表示P ＜0.05，下表同

分組 株高/cm 莖粗/mm 冠幅長/cm 冠幅寬/cm 分枝數(shù)/支 根長/cm 根粗/mm對照組 79.0 ± 2.6b 3.33 ± 0.07b 59.4 ± 2.7a 38.5 ± 1.6a 14 ± 2a 13.9 ± 0.4b 4.79 ± 0.17b 0.3%硼砂組 84.5 ± 0.9ab 3.75 ± 0.19a 44.1 ± 2.6c 29.2 ± 2.1b 13 ± 1a 15.2 ± 0.3a 5.19 ± 0.07a 0.6%硼砂組 90.0 ± 1.9a 3.09 ± 0.09b 46.3 ± 3.2c 35.6 ± 1.8ab 9 ± 1b 15.0 ± 0.2a 5.08 ± 0.10a 0.9%硼砂組 84.8 ± 3.5ab 3.29 ± 0.12b 52.2 ± 1.3b 33.8 ± 1.3ab 8 ± 1b 14.2 ± 0.5ab 4.63 ± 0.14b F 13.974 10.080 14.348 10.290 22.846 5.837 8.772 P 0.001 0.004 0.001 0.004 0.001 0.021 0.007

2.2 硼噴施對柴胡干物質(zhì)的影響

硼噴施影響柴胡干物質(zhì)積累，隨著硼噴施濃度的提高，單株柴胡干物質(zhì)積累量逐漸降低，但均高于對照組（見表2）。0.3%硼砂和0.6%硼砂噴施處理的單株柴胡干物質(zhì)積累量分別為11.23 g/株和10.67 g/株，較對照組增加16.4%和10.6%（P ＜0.05），而0.9%硼砂噴施處理的單株柴胡干物質(zhì)積累量則與對照組差異不顯著。

硼噴施影響柴胡植株各器官干物質(zhì)分配比例，隨著硼噴施濃度的提高，柴胡根干物質(zhì)分配比例先降低后增加，而種子干物質(zhì)分配比例則逐漸增加（見表2）。根干物質(zhì)分配比例以0.3%硼砂噴施處理最高，為26.3%，較對照組增加5.5%（P ＜0.05）；種子干物質(zhì)分配比例則以0.9%硼砂處理最高，為15.0%，較對照組增加4.6%（P ＜0.05）。結(jié)果表明，硼噴施有利于干物質(zhì)向根及生殖器官種子中積累和分配，且隨著硼噴施濃度的提高，使更多的干物質(zhì)向生殖器官種子中分配，有利于種子發(fā)育。

表2 硼噴施對柴胡干物質(zhì)的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 2 Effects of spraying boron on the dry matter of B.chinense（±s，n ＝ 15）

表2 硼噴施對柴胡干物質(zhì)的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 2 Effects of spraying boron on the dry matter of B.chinense（±s，n ＝ 15）

分組 單株干物質(zhì)量/g 根占比/% 莖葉占比/% 種子占比/%對照組 9.65 ± 0.34c 20.8 ± 1.4b 68.8 ± 1.6a 10.4 ± 1.0b 0.3%硼砂組 10.67 ± 0.09ab 26.3 ± 1.4a 63.4 ± 1.5b 10.3 ± 1.0b 0.6%硼砂組 11.23 ± 0.21a 21.5 ± 1.1b 67.2 ± 1.4a 11.3 ± 0.3b 9.97 ± 0.33bc 22.7 ± 0.4b 62.3 ± 1.2b 15.0 ± 0.7a 5.844 8.885 9.723 15.957 0.021 0.006 0.005 0.001 0.9%硼砂組F P

2.3 硼噴施對柴胡結(jié)實性的影響

硼噴施影響柴胡結(jié)實性（見表3）。隨著硼噴施濃度的提高，單株柴胡總小花序數(shù)和無效結(jié)實小花序數(shù)呈降低趨勢，與對照組相比，0.6%硼砂和0.9%硼砂噴施處理的柴胡單株總小花序數(shù)降低25.3%和22.1%（P ＜0.05），無效結(jié)實小花序數(shù)均降低56.5%（P ＜0.05），而結(jié)實小花序數(shù)差異不顯著。不同濃度硼噴施處理的柴胡結(jié)實率差異明顯，0.9%硼砂噴施處理的柴胡結(jié)實率最高，為50.0%，較對照組提高15.3%（P ＜0.05）。結(jié)果表明，硼噴施可減少柴胡無效結(jié)實花序數(shù)，提高結(jié)實率。

表3 硼噴施對柴胡結(jié)實性的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 3 Effects of spraying boron on the fecundity of B.chinense（±s，n ＝ 15）

表3 硼噴施對柴胡結(jié)實性的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 3 Effects of spraying boron on the fecundity of B.chinense（±s，n ＝ 15）

結(jié)實率/%對照組 95 ± 2a 33 ± 1a 62 ± 3a 34.7 ± 1.2c 0.3%硼砂組 92 ± 2a 37 ± 2a 55 ± 3b 40.2 ± 1.8b 0.6%硼砂組 71 ± 3b 34 ± 2a 37 ± 3c 47.8 ± 1.4a 0.9%硼砂組 74 ± 2b 37 ± 3a 37 ± 1c 50.0 ± 1.0a F 51.738 2.291 47.819 20.406 0.001 0.155 0.001 0.001 P分組 總小花序數(shù)/個結(jié)實小花序數(shù)/個無效結(jié)實小花序數(shù)/個

2.4 硼噴施對柴胡種子性狀的影響

種子長度、寬度及種子粒徑可反映種子發(fā)育程度，為評判種子質(zhì)量優(yōu)劣的重要指標(biāo)之一。硼噴施影響柴胡種子性狀（見表4）。隨著硼噴施濃度的提高，柴胡種子長度降低，但均顯著高于對照組，0.3%硼砂、0.6%硼砂和0.9%硼砂噴施處理的柴胡種子長度分別較對照組增加21.8%、13.9%和6.0% （P ＜0.05）；種子寬度隨著硼噴施濃度的提高呈增加趨勢，均顯著高于對照組，0.3%硼砂、0.6%硼砂和0.9%硼砂噴施處理的柴胡種子寬度分別較對照組增加21.5%、38.0%和30.4%（P ＜0.05）。

硼噴施影響柴胡種子粒徑分布，隨著硼噴施濃度的提高，小粒種子（＜30 目）所占比例降低，大粒種子（＞24 目）所占比例提高（見表4）。0.9%硼砂噴施處理的柴胡小粒種子（＜30 目）所占比例為3.5%，較對照組降低3.1%（P ＜0.05），而大粒種子（＞24 目）所占比例為20.3%，較對照組提高6.6%（P ＜0.05）。

表4 硼噴施對柴胡種子性狀的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 4 Effects of spraying boron on the seed traits of B.chinense（±s，n ＝ 15）

表4 硼噴施對柴胡種子性狀的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 4 Effects of spraying boron on the seed traits of B.chinense（±s，n ＝ 15）

種子粒徑/%＜30 目 24 ～ 30 目 ＞24 目對照組 2.52 ± 0.04d 0.79 ± 0.03c 6.6 ± 0.5a 79.7 ± 1.9a 13.7 ± 0.8c 0.3%硼砂組 3.07 ± 0.05a 0.96 ± 0.01b 5.8 ± 0.3a 79.4 ± 2.3a 14.8 ± 1.0c 0.6%硼砂組 2.87 ± 0.06b 1.09 ± 0.03a 4.2 ± 0.3b 78.1 ± 1.5ab 17.7 ± 0.7b 0.9%硼砂組 2.67 ± 0.06c 1.03 ± 0.05a 3.5 ± 0.2b 76.2 ± 2.0b 20.3 ± 0.6a F 43.980 32.919 12.157 4.060 44.979 P 0.001 0.001 0.002 0.05 0.001分組 種子長度/mm種子寬度/mm

2.5 硼噴施對柴胡種子質(zhì)量的影響

種子千粒重、飽滿度及萌發(fā)率為種子檢驗和質(zhì)量評定的重要指標(biāo)，與其種子質(zhì)量優(yōu)劣密切相關(guān)。硼噴施影響柴胡種子質(zhì)量（見表5）。種子千粒重、飽滿度及萌發(fā)率均隨著硼噴施濃度的提高而增加，0.9%硼砂噴施處理的柴胡種子千粒重、飽滿度及萌發(fā)率最高，為0.838 6 g、92.0%和82.7%，較對照組增加8.7%、9.3%和13.4%（P ＜0.05）。

表5 硼噴施對柴胡種子質(zhì)量的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 5 Effects of spraying boron on the seed quality of B.chinense（±s，n ＝ 15）

表5 硼噴施對柴胡種子質(zhì)量的影響（±s，n ＝ 15）Tab. 5 Effects of spraying boron on the seed quality of B.chinense（±s，n ＝ 15）

分組 種子千粒重/g 種子飽滿度/% 種子萌發(fā)率/%對照 0.771 7 ± 0.032 7b 82.7 ± 2.5b 69.3 ± 2.5c 0.3%硼砂組 0.782 4 ± 0.012 5b 88.0 ± 2.8ab 76.0 ± 1.6b 0.6%硼砂組 0.830 9 ± 0.014 3a 90.7 ± 2.5a 82.0 ± 1.6a 0.9%硼砂組 0.838 6 ± 0.011 0a 92.0 ± 1.6a 82.7 ± 2.5a 5.878 5.897 17.383 0.020 0.020 0.007 F P

3 討論

優(yōu)質(zhì)種源是中藥材生產(chǎn)的物質(zhì)基礎(chǔ)，是生產(chǎn)質(zhì)量穩(wěn)定、可控藥材的前提[18]。近年來，隨著柴胡研究的深入及相關(guān)產(chǎn)品開發(fā)利用的加強，柴胡需求量逐年增加，為保障藥材質(zhì)量和供應(yīng)量，進(jìn)行了柴胡人工栽培及新品種選育等相關(guān)研究工作并富有成效[4-7]。柴胡為無限分枝類型植株[19]，植株花序較多，先開放花序，營養(yǎng)供應(yīng)充足、種子發(fā)育好、質(zhì)量較高；晚開放花序，授粉差且受營養(yǎng)供應(yīng)限制種子發(fā)育不飽滿、質(zhì)量差，以致生產(chǎn)上柴胡結(jié)實性低，種子質(zhì)量參差不齊，顯著影響了柴胡藥材產(chǎn)量和質(zhì)量。硼為植物生長的必需微量元素之一，可促進(jìn)植物生殖器官的建成和發(fā)育，有利于植物開花結(jié)實，同時硼也能促進(jìn)物質(zhì)轉(zhuǎn)運，提高種子產(chǎn)量和質(zhì)量[20-22]，目前已在油菜、大豆、甜蕎及苜蓿等作物上得到了廣泛應(yīng)用[13-16]。本研究表明，硼噴施可提高柴胡干物質(zhì)積累，促使更多干物質(zhì)向種子中轉(zhuǎn)運分配及降低無效結(jié)實花序數(shù)，提高了柴胡種子產(chǎn)量和質(zhì)量，該研究結(jié)果與前人在油菜、甜蕎及苜蓿等作物上的研究結(jié)果基本一致。本研究為柴胡良種繁育及優(yōu)質(zhì)種子生產(chǎn)提供了科學(xué)參考，可在柴胡優(yōu)質(zhì)種子生產(chǎn)上推廣應(yīng)用。

4 結(jié)論

硼噴施可促進(jìn)柴胡株高、根長和根粗生長，促使更多干物質(zhì)向生殖器官種子中轉(zhuǎn)運分配，同時硼噴施處理可顯著降低無效結(jié)實花序數(shù)，減少營養(yǎng)物質(zhì)的無效消耗，提高種子質(zhì)量。采用0.9%硼砂噴施處理的柴胡種子干物質(zhì)分配比例、結(jié)實率、大粒種子（＞24 目）所占比例、種子千粒重、飽滿度和萌發(fā)率均最高，為15.0%、50.0%、20.3%、0.838 6 g、92.0%和82.7%，分別較對照組提高4.6%、15.3%、6.6%、8.7%、9.3%和13.4%，處理效果較好。硼噴施顯著影響柴胡生長及種子質(zhì)量，然而關(guān)于硼肥種類、施用方式及施用時間等因素對柴胡植株生長及種子質(zhì)量的影響還需進(jìn)一步研究。