董璐 薛煥利 何瑾瑜△ 曹雅靜 楊躍青

(陜西省中醫(yī)醫(yī)院，(1.肝病科；(2.檢驗(yàn)科，陜西 西安 710003)

臨床研究[1-2]顯示，乙型肝炎病毒(HBV)感染患者其臨床結(jié)局與患者機(jī)體免疫機(jī)制密切相關(guān)，尤其對(duì)于T淋巴細(xì)胞，最為常見的為Th1/Th2細(xì)胞失衡學(xué)說(shuō)。有研究[3]顯示，脂聯(lián)素具有著抑制肝纖維化的作用，但是目前仍缺乏脂聯(lián)素與HBV感染肝纖維化相關(guān)性。本文主要探討分析乙型肝炎病毒感染相關(guān)肝纖維化程度與脂聯(lián)素及Th17/Treg平衡的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2018年1月至12月我院收治的HBV感染患者127例，根據(jù)患者肝彈性值(LSM)將患者分為輕度組(LSM<9.7 kPa)55例、中度組(9.7 kPa≤LSM<17.5 kPa)41例、重度組(LSM≥17.5 kPa)31例。輕度組中，男30例、女25例，年齡(33.18±7.32)歲，病程(2.31±0.45)年，體重指數(shù)(20.83±3.15)kg/m2，有乙肝家族史者23例；中度組中，男24例、女17例，年齡(35.02±8.21)歲，病程(2.19±0.52)年，體重指數(shù)(21.25±2.37)kg/m2，有乙肝家族史者17例；重度組中，男17例、女14例，年齡(34.63±6.30)，病程(2.40±0.36)，體重指數(shù)(20.79±1.92)kg/m2，有乙肝家族史者13例。納入患者均符合2015年《慢性乙型肝炎診治指南》中乙肝診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]；體重指數(shù)<28kg/m2；患者入組前未接受保肝治療及免疫調(diào)節(jié)治療且臨床資料完整。已排除合并自身免疫性疾病；合并其他類型肝炎患者；合并肝癌、脂肪肝、酒精肝患者；有吸毒史患者；合并心、腎等重大器官疾病患者。各組患者臨床資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)?；颊呔橥?。

1.2方法 采用美國(guó)貝克曼AU5800全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)患者肝功能指標(biāo)，包括天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)以及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)。采用羅氏CobasTaqMan分析儀檢測(cè)患者血清HBV-DNA載量，檢測(cè)嚴(yán)格按照操作說(shuō)明書進(jìn)行，并將HBV-DNA載量換成對(duì)數(shù)后進(jìn)行計(jì)算?；颊呷朐汉笄宄砍槿∏宄靠崭轨o脈血，分離血清置于-30℃冰箱內(nèi)待測(cè)，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清脂聯(lián)素水平，具體操作步驟按照試劑盒使用說(shuō)明書進(jìn)行。采用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢測(cè)患者外周血Th17、Treg表達(dá)率，并計(jì)算Th17/Treg比值。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS25.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。正態(tài)計(jì)量數(shù)據(jù)用(Mean±SD)表示，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)或百分比表示，兩組獨(dú)立，正態(tài)，方差齊資料組間比較采用t檢驗(yàn)；樣本率的比較采用卡方檢驗(yàn)或Fisher確切概率法；采用Pearson相關(guān)分析對(duì)相關(guān)性進(jìn)行分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1HBV-DNA載量、肝功能指標(biāo)及血清脂聯(lián)素水平的比較 隨著患者肝纖維化程度的增加，肝功能指標(biāo)AST、ALT以及血清脂聯(lián)素水平顯著升高(F=33.128、26.394、17.323，P均<0.05)，各組患者HBV-DNA載量比較無(wú)顯著差異(F=1.564，P>0.05)。見表1。

表1 各組HBV-DNA載量、肝功能指標(biāo)及血清脂聯(lián)素水平的比較

2.2Th17表達(dá)率、Treg表達(dá)率及Th17/Treg比值的比較 隨著患者肝纖維化程度的增加，Th17表達(dá)率、Th17/Treg比值顯著升高(F=7.382、13.420，P均<0.05)，而Treg表達(dá)率顯著降低(F=10.294，P<0.05)。見表2。

表2 各組Th17表達(dá)率、Treg表達(dá)率及Th17/Treg比值的比較

2.3相關(guān)性分析 患者AST、ALT、脂聯(lián)素、Th17以及Th17/Treg互為正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，Treg與AST、ALT、脂聯(lián)素、Th17以及Th17/Treg水平均成顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，患者HBV-DNA載量與各指標(biāo)均無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)。見表3。

表3 各指標(biāo)相關(guān)性分析

3 討 論

肝纖維化是由多種不同病因，包括各種病毒感染、乙醇以及寄生蟲等造成肝臟慢性損傷，最終出現(xiàn)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成增多而降解減少，從而造成肝內(nèi)ECM過(guò)度沉積而引起肝纖維化病理改變[6-7]。肝纖維化進(jìn)一步發(fā)展到第4期即為早期肝硬化，此時(shí)期增生的結(jié)締組織包繞再生結(jié)節(jié)并分割殘存肝小葉形成假小葉，但在此階段病理過(guò)程仍是可逆的，因此對(duì)于HBV肝纖維化患者早期臨床診治具有著重要臨床意義[8]。

脂聯(lián)素是近些年來(lái)新發(fā)現(xiàn)的一種由體內(nèi)脂肪細(xì)胞產(chǎn)生分泌的脂源性細(xì)胞因子，脂聯(lián)素在血液循環(huán)中大量存在，并具有調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、增強(qiáng)胰島素敏感性、抗動(dòng)脈粥樣硬化以及抑制炎癥反應(yīng)等多種效應(yīng)，因此學(xué)者認(rèn)為脂聯(lián)素在肝纖維化進(jìn)程中具有著重要作用[9]。本研究結(jié)果顯示，隨著肝纖維化程度的增加，患者脂聯(lián)素水平顯著升高(P<0.05)。與研究[10]結(jié)果相似。

Th17作為CD4+淋巴細(xì)胞亞群之一，可上調(diào)多種炎癥細(xì)胞水平介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，在多種自身免疫性疾病發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中均發(fā)揮著重要作用[11]。而Treg作為T淋巴細(xì)胞的另一個(gè)亞群，當(dāng)機(jī)體處于正常狀態(tài)時(shí)，Treg可提高免疫耐受而改善機(jī)體免疫失衡[12]。本研究結(jié)果顯示，隨著患者肝纖維化程度的增加，Th17表達(dá)率、Th17/Treg比值顯著升高(P<0.05)，而Treg表達(dá)率顯著降低(P<0.05)。與報(bào)道[13]結(jié)果相似，提示免疫機(jī)制在HBV感染相關(guān)肝纖維化進(jìn)程中發(fā)揮著重要作用。Th17主要通過(guò)IL-17發(fā)揮作用，進(jìn)而激活HSC，加速肝纖維化進(jìn)程并提高炎癥程度，此外，Th17可使巨噬細(xì)胞在肝炎病灶處的聚集，從而加速了乙肝疾病進(jìn)程的發(fā)展；而Treg可識(shí)別、抑制腫瘤細(xì)胞活化，同時(shí)調(diào)節(jié)免疫應(yīng)激反應(yīng)，有助于自身肝組織的保護(hù)。

本研究結(jié)果顯示，患者AST、ALT、脂聯(lián)素、Th17以及Th17/Treg互為正相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，Treg與AST、ALT、脂聯(lián)素、Th17以及Th17/Treg水平均成顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系(P<0.05)，患者HBV-DNA載量與各指標(biāo)均無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)。提示脂聯(lián)素以及Th17/Treg與患者肝纖維化進(jìn)程以及肝功能變化密切相關(guān)，而與HBV病毒載量無(wú)關(guān)，且脂聯(lián)素與Th17/Treg免疫平衡之間具有著一定的影響，其具體尚未明確，還有待進(jìn)一步研究分析。

綜上所述，HBV感染相關(guān)肝纖維化患者存在脂聯(lián)素水平及Th17/Treg平衡異?，F(xiàn)象，且隨著患者肝纖維化程度的加重，脂聯(lián)素水平明顯升高且Th17/Treg失衡更為嚴(yán)重，且與其他肝功能指標(biāo)存在一定相關(guān)性，可作為HBV感染相關(guān)肝纖維化疾病發(fā)生發(fā)展的潛在生物指標(biāo)。