王浩天 楊賈栩 歐陽邵立 翟朋達

摘要： 奶制品安全問題一直以來都是人民健康和國計民生的重大問題，關(guān)系到人民群眾的切身利益，奶牛乳房炎造成的損失很大，其由環(huán)境，飼養(yǎng)管理等因素引起，藥浴液用于預(yù)防奶牛乳房炎是很有意義的。本文以復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片、成膜基質(zhì)和保護劑分別作為原料，針對奶牛乳房炎，制備了奶牛用乳頭藥浴液，并通過實驗對該藥浴液進行評價。

關(guān)鍵詞：奶牛乳頭，藥浴液，性能，評價

奶制品安全問題一直以來都是人民健康和國計民生的重大問題，關(guān)系到人民群眾的切身利益，奶牛乳房炎造成的損失很大[1]。其由環(huán)境，飼養(yǎng)管理等因素引起[2，3]，市面上的藥浴液在效果，運輸，殘留等方面存在問題[4]，所以研制一種安全、高效、綠色、廉價的藥浴液用于預(yù)防奶牛乳房炎是很有意義的。

本文介紹一種奶牛用乳頭藥浴液，運用二氧化氯具有的安全、高效殺菌原理，可以有效、快速的對奶牛乳頭部位進行消毒殺菌，同時成膜基質(zhì)能在乳頭表面形成薄膜，保護皮膚，保護劑可以對破損、傷患處進行抗炎、鎮(zhèn)痛，與二氧化氯共同達到抑菌的效果。該藥浴液主要由復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片（主要成分為亞氯酸鈉）、成膜基質(zhì)（主要成分為改性海藻酸鈉）、保護劑（主要成分為鎮(zhèn)痛抑菌劑）組成，使用時現(xiàn)場配置，藥浴液中二氧化氯含量約為45～50mg/L。

一、實驗部分

1.試劑與儀器

（1）主要原料

復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片、成膜基質(zhì)、保護劑。

（2）儀器

電子精密天平：量程0～200g，感量1mg;片劑硬度測試儀;脆碎度測試儀;精密酸度計;低速臺式離心機;紫外分光光度計;立式壓力蒸汽滅菌器;電熱恒溫水浴鍋;水浴恒溫振蕩器.

2.藥浴劑的制備

取1片復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片在在含有50 mL水的密閉容器中活化10 min，然后稀釋10倍，得到二氧化氯含量約為100 mg/L的復(fù)合亞氯酸鈉溶液，將2%的成膜基質(zhì)與21.1%的保護劑加入100ml水中，與復(fù)合亞氯酸鈉溶液按1：1混合攪拌均勻，即得奶牛乳頭藥浴液。

3.主要理化指標考察

（1）理化指標檢測

本文根據(jù)2020版《中國獸藥典》，對復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片的狀、崩解時限、重量差異、脆碎度、硬度、pH值進行了考察，對成膜基質(zhì)及保護劑的性狀、pH、成膜時間、膜粘附力、膜的透氣性、離心實驗進行了考察。

（2）藥浴液有效成分含量測定

本文根據(jù)GB 26366-2010《二氧化氯消毒及衛(wèi)生標準》的標準，采用五步碘量法對藥浴液有效成分即二氧化氯含量進行測定。

4.殺菌性能及皮膚刺激性評價試驗

（1）殺菌試驗

本文根據(jù)2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》配置所需濃度的菌懸液，進行培養(yǎng)計數(shù)后，進行中和劑鑒定試驗及懸液定量殺菌試驗，記錄結(jié)果。

（2）動物刺激性試驗

本文進行完整皮膚刺激性試驗、破損皮膚刺激性試驗，同時分單次給藥、多次給藥，記錄結(jié)果。

5.藥浴劑穩(wěn)定性試驗

本文根據(jù)2020版《中國獸藥典》，對藥浴劑進行穩(wěn)定性實驗：將藥浴液現(xiàn)場配置，置于棕色廣口瓶中，室溫（25±2）℃密閉避光放置，每24h取樣檢測二氧化氯含量，連續(xù)檢測9天。

二、結(jié)果與討論

1.主要理化指標考察

（1）復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片

取復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片，在白色背景下觀察樣品外觀及性狀為類白色片劑。經(jīng)試驗得出：片劑硬度為5～7kg/cm2;測試濃度為1：1000（片劑g：蒸餾水mL）時的pH值指標介于5.0～7.0;在5min內(nèi)能崩解完全;片重差異限度在±2%以內(nèi)。試驗結(jié)果均符合《中國獸藥典》要求，能夠有效避免片劑在包裝、貯存、運輸發(fā)生的破損現(xiàn)象。

（2）成膜基質(zhì)及保護劑

取成膜基質(zhì)及保護劑，按1：10比例混合，得到無色透明凝膠。經(jīng)試驗得出：用常規(guī)酸度計測定pH值介于6.0～7.0，不會對皮膚造成刺激;成膜時間在7～10min之間，可以有效防止細菌侵入;膜粘附力在40～60g之間，吸收良好，作用時間長;同時透氣性良好，經(jīng)半徑為10cm、轉(zhuǎn)速4000r/min，離心15min，均無分層現(xiàn)象，表明成膜劑及保護劑穩(wěn)定性良好。

（3）藥浴液有效成分含量測定

取復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片，分別進行精密稱定，置已加40 ml水的50 mL棕色容量瓶中，待溶解完畢后，加水稀釋至刻度，在暗處放置10 min活化，搖勻，并將活化好的溶液稀釋于500 mL棕色容量瓶中，取配置好的溶液與含有2%成膜基質(zhì)、21.1%保護劑的500mL溶液混合，測定結(jié)果表明藥浴液中二氧化氯平均含量為53.16mg/L，RSD為0.07%，表明藥浴液二氧化氯含量達到《中國獸藥典》要求，可以達到殺菌效果。

2.殺菌性能及皮膚刺激性評價試驗

（1）殺菌試驗

以金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為實驗菌，對中和劑進行篩選，將試驗分為6組，重復(fù)三次，結(jié)果見表2。

取菌懸液，將1mL含有有機干擾物質(zhì)的菌懸液和4mL測試濃度藥浴液（陽性對照組為PBS）在無菌管中混合均勻，反應(yīng)至各預(yù)定時間。移取1 mL混合液加至含有9 mL中和劑的無菌試管中混勻，中和10 min后，取上述各管最終樣液1 mL分別接種至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，在37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)至規(guī)定時間計數(shù)，計算殺菌率。實驗重復(fù)3次，取平均值，試驗結(jié)果表明藥浴液的殺菌效果良好，溶液中二氧化氯濃度為50 mg/L時，作用金黃色葡萄球菌和大腸桿菌5min，就能完全殺滅細菌。

（2）動物刺激性試驗

對家兔進行皮膚刺激性實驗：用脫毛劑在家兔背部脊柱制備4塊脫毛區(qū)域，各約3cm×3cm，然后將藥浴液直接滴于面積為2.5cm×2.5cm的一側(cè)去毛完整皮膚上。同時將一部分脫毛后的家兔用75%酒精清潔2.5cm×2.5cm的去毛皮膚、然后進行消毒。消毒完畢后，使用注射針頭在皮區(qū)內(nèi)劃一個“井”形的破損傷口，劃痕間距為0.5cm。每只家兔2個脫毛區(qū)分別涂抹藥浴劑、生理鹽水，涂抹后用紗布覆蓋并用醫(yī)用橡膠固定。貼敷固定24h后，移去貼敷物，用溫水清潔將水分吸干。

給藥方式為單次（去除受試物后1h、24h和48h觀察皮膚局部反應(yīng)，有無紅斑和水腫的情況）、多次（按照單次給藥的方法，連續(xù)給藥7d，每天一次，最后一次給藥24h后，用溫水洗去藥物，觀察皮膚局部反應(yīng)，有無紅斑和水腫的情況）給藥，使用生理鹽水作為對照組，進行實驗。

實驗結(jié)果表明：單次給藥后，完整皮膚與破損皮膚均無紅斑、水腫;多次給藥后，藥浴液和生理鹽水對完整皮膚均無紅斑、水腫，對破損皮膚在使用藥浴液清洗后在1h內(nèi)出現(xiàn)輕度刺激作用，但較快消退，說明本文所述藥浴液對皮膚無刺激性。

3.藥浴劑穩(wěn)定性試驗

配置藥浴液，置于棕色廣口瓶，室溫室溫（25±2）℃密閉避光放置。每24h取樣檢測二氧化氯含量，連續(xù)檢測9天，試驗結(jié)果表明藥浴液中二氧化氯含量在前7天濃度在45mg/L以上，藥浴液可正常使用，第8、9天后二氧化氯的含量下降到45mg/L以下，藥浴液不能正常使用，在常溫下配置好后，可放置7天，若超過時間則需重新配置。

三、結(jié)論

（1）以復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片為主劑，改性海藻酸鈉及鎮(zhèn)痛抑菌劑作為成膜基質(zhì)和保護劑的主要成分，運用二氧化氯對細菌的滅殺效果，制備出了奶牛用乳頭藥浴液。

（2）通過對理化指標的考察，得到復(fù)合亞氯酸鈉泡騰片的性狀、pH、崩解時限、重量差異、脆碎度、硬度均符合《中國獸藥典》要求;成膜基質(zhì)及保護劑的性狀、pH、穩(wěn)定性均符合《中國獸藥典》要求，其成膜時間短，膜粘附力強，膜的透氣性好，符合成膜基質(zhì)相關(guān)質(zhì)量要求。采用碘量法測定藥浴劑中有效成分的含量，并進行方法學研究，結(jié)果表明：該方法準確度高、精密度好、重復(fù)性好，可用于檢測本品有效成分含量。

（3）藥浴劑殺菌性能良好，二氧化氯含量為50mg/L時作用細菌5min，可完全殺滅黃色葡萄球菌和大腸桿菌。本研究制備的藥浴劑具有殺菌性能好，安全性高的優(yōu)點。皮膚刺激性試驗中未出現(xiàn)紅斑和水腫，表明無刺激、無毒性可用于奶牛臨床試驗。

（4）通過藥浴液穩(wěn)定性考察得到，密閉避光條件下，本藥浴液的有效期為7天。

四、展望

本文所述藥浴液對預(yù)防乳房炎有很大的功效，各方面符合國家要求。在針對市場需求的方面，我們的藥浴液有著充分的效果、運輸、安全與無殘留的優(yōu)勢，可以在市場上占有一席之地。隨著我們藥浴液的研制，乳房炎帶來的損失可以大大降低，畜牧業(yè)的發(fā)展可以更進一步。

[1].葉倩， 王禮偉， 屈勇剛， 等. 奶牛乳房炎防治的研究進展. 現(xiàn)代畜牧獸醫(yī)， 2014， （1）： 56-61

[2].楊亞東， 李飛， 楊一鳴， 等.奶牛乳房炎致病菌的分離鑒定及藥敏試驗. 中國乳業(yè)， 2013： 2

[3].B. R. Shome， S. D. Mitra， M. Bhuvana， et al. Multiplex PCR Assay for Species Identification of Bovine Mastitis Pathogens. Journal of Applied Microbiology， 2011

[4].方雪強. 奶牛場乳頭藥浴液的選擇. 中國奶牛， 2014（09）： 48-50

（1.河北科技大學化學與制藥工程學院，河北，石家莊，050000）

（2.河北科技大學建筑工程學院，河北，石家莊，050000）

作者簡介：王浩天，2001年10月出省，男，漢族，河北省唐山市路北區(qū)人，河北科技大學本科在校生，研究方向：獸藥產(chǎn)品開發(fā)。