柳 婷，許 欣，孔旭強(qiáng)，陳利丁，黃 勝，陳劍秋，孫淑靜

（福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002）

斑玉蕈 [Hypsizygus marmoreus（Peck） H.E.Bigelow]，屬于擔(dān)子菌門(mén) （Basidiomycota） 傘菌綱（Hymenomycetes） 傘菌目 （Agaricales） 白蘑科（Tricholomataceae） 玉蕈屬 （Hypsizygus）[1-2]，又名玉蕈，俗稱真姬菇、海鮮菇，其子實(shí)體形態(tài)優(yōu)美、口感飽滿，富含蛋白質(zhì)、氨基酸和維生素，能有效清除體內(nèi)自由基，提高機(jī)體免疫力，預(yù)防衰老[3]，是近年來(lái)食用菌市場(chǎng)深受歡迎的品種之一。

溫度作為斑玉蕈生長(zhǎng)發(fā)育的重要環(huán)境因素，溫度的高低直接影響菌絲的生長(zhǎng)、出菇時(shí)間以及子實(shí)體品質(zhì)等。林小花等[4]的研究表明斑玉蕈在菌絲生長(zhǎng)階段溫度需控制在22℃～25℃，低溫時(shí)菌絲生長(zhǎng)緩慢，高溫下易受雜菌污染。胡開(kāi)輝等[5]研究了外界因子對(duì)蟹味菇（Hypsizygus marmoreus） 菌絲特性的影響。發(fā)現(xiàn)溫度對(duì)蟹味菇菌絲和子實(shí)體生長(zhǎng)有顯著影響。適宜的出菇溫度下子實(shí)體原基形成快、整齊度好、大小均勻且質(zhì)地結(jié)實(shí)，出菇溫度高時(shí)原基形成及子實(shí)體成熟時(shí)間延長(zhǎng)，出菇整齊度差且質(zhì)地較軟。目前溫度影響菌絲生長(zhǎng)及其出菇機(jī)理尚不明確。

細(xì)菌與許多真核生物均存在重要共生關(guān)系，是其物質(zhì)轉(zhuǎn)化、信息傳遞的重要參與者。細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)組成和多樣性是反映真核生物營(yíng)養(yǎng)利用、生長(zhǎng)發(fā)育的重要指標(biāo)。高度多樣性細(xì)菌的群落能在一定程度上應(yīng)對(duì)環(huán)境條件的變化，以改變?nèi)后w的結(jié)構(gòu)來(lái)適應(yīng)新環(huán)境。張俊蘭[6]采用研磨法從6種食用菌子實(shí)體中分離到內(nèi)生菌58株；劉燦[7]研究發(fā)現(xiàn)在雙孢蘑菇（Agaricus bisporus）子實(shí)體中存在內(nèi)生菌并分離到一株枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilus）。此外，許多研究表明細(xì)菌對(duì)食用菌菌絲生長(zhǎng)有一定作用。楊民和[8]發(fā)現(xiàn)食用菌與有益微生物的相互作用可為食用菌提供了更適的條件，在雙孢蘑菇栽培床表面覆土可有效促進(jìn)其從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)向生殖生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)化。董曉雅等[9]、張繼英等[10]發(fā)現(xiàn)熒光假單孢菌（Pseudomonas fluorescens） 對(duì)平菇 （Pleurotus ostreatus）、杏鮑菇（Pleurotus eryngii）和雙孢蘑菇的菌絲生長(zhǎng)和出菇均有較強(qiáng)的促進(jìn)作用。因此探究溫度對(duì)食用菌共生細(xì)菌多樣性的影響及群落結(jié)構(gòu)的變化規(guī)律，及闡明溫度對(duì)食用菌菌絲生長(zhǎng)和出菇作用機(jī)理及其調(diào)控具有重要的理論意義。研究利用高通量測(cè)序技術(shù)分析溫度對(duì)斑玉蕈菌絲共生細(xì)菌多樣性和群落結(jié)構(gòu)的影響，為進(jìn)一步探索溫度影響斑玉蕈菌絲生長(zhǎng)、形態(tài)建成的機(jī)理奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌種

供試菌株斑玉蕈（閩真2號(hào)），為本實(shí)驗(yàn)室保藏菌種。

1.1.2 主要試劑

E-MF21馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基，日本榮研公司，稱取3.9 g粉末加100 mL去離子水，121℃滅菌20 min備用。

EasyPure Genomic DNA Kit提取試劑盒、PCR相關(guān)試劑、AxyPrepDNA凝膠回收試劑盒購(gòu)于生工生物工程（上海）股份有限公司。

1.2 方法

1.2.1 菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定及形態(tài)觀察

無(wú)菌條件下將活化后的菌種塊（直徑=1.0 cm）分別接種于15℃、20℃、25℃、28℃、30℃、37℃下培養(yǎng)18 d，每組10個(gè)重復(fù)，從第4天開(kāi)始每隔4 d測(cè)其菌絲生長(zhǎng)速度，并觀察其形態(tài)特征。其菌絲生長(zhǎng)速度（V，cm·d-1）公式為：

式中：S為菌絲生長(zhǎng)直徑（cm）；D為菌絲生長(zhǎng)天數(shù)（d）。

1.2.2 16S rRNA高通量測(cè)序

采用EasyPure Genomic DNA Kit提取試劑盒提取15個(gè)樣品總DNA，PCR擴(kuò)增，選擇細(xì)菌特異引物 338F：5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCA-3’和 806R：5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’，對(duì) 16S rRNA基因的V3～V4高變區(qū)片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增，PCR程序如下：98℃預(yù)變性2 min；98℃變性30 s；50℃退火30 s，72℃延伸1 min，30個(gè)循環(huán)；72℃延伸5 min。用2%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物，采用AxyPrepDNA凝膠回收試劑盒回收，運(yùn)用Illumina HiSeq 2500測(cè)序平臺(tái)送北京百邁克生物科技有限公司進(jìn)行高通量測(cè)序。

1.2.3 數(shù)據(jù)分析

通過(guò)FLASH軟件對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接[11]，采用Trimmomatic軟件將拼接得到的序列進(jìn)行質(zhì)量過(guò)濾[12]，并用UCHIME軟件去除嵌合體[13]，得到高質(zhì)量的序列（Tags）。通過(guò)USEARCH軟件在相似性97%水平上對(duì)序列進(jìn)行聚類[14]，以測(cè)序所有序列數(shù)的0.005%作為閾值過(guò)濾操作分類單元（operational taxonomic units，OTU），將OTU的代表序列與微生物參考數(shù)據(jù)庫(kù)細(xì)菌16S：Sliva（http://www.arb-silva.de） 進(jìn)行比對(duì)可得到每個(gè)OTU對(duì)應(yīng)的物種分類信息，進(jìn)而在門(mén)、綱、目、科、屬、種層面統(tǒng)計(jì)各樣品的群落組成。

運(yùn)用Mothur軟件分析OTU豐度及Alpha指數(shù)[15]，以得到樣品內(nèi)物種豐富度和均勻度信息。在97%一致性閾值下，ACE指數(shù)值越大表明該群落中物種種類越多，Chao1指數(shù)可以估計(jì)群落中的OTU數(shù)目，其值越高表明群落物種數(shù)目越豐富，細(xì)菌多樣性包括種類的多少和每個(gè)種類分布的均勻度；香農(nóng)指數(shù)（Shannon） 和辛普森指數(shù)（Simpson） 可以反應(yīng)細(xì)菌多樣性，其中Shannon指數(shù)受到種類多少的影響較大，Simpson指數(shù)受到種類分布均勻度的影響較大。

1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用SPSS對(duì)斑玉蕈菌絲生長(zhǎng)速度進(jìn)行單因素方差分析。用species-sample豐度數(shù)據(jù)對(duì)斑玉蕈菌絲共生細(xì)菌菌群矩陣做除趨勢(shì)對(duì)應(yīng)分析（DCA），發(fā)現(xiàn)最大梯度長(zhǎng)度（lengths of gradient）小于3.0，采用冗余分析（RDA）探討斑玉蕈菌絲共生細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)和溫度之間關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 不同溫度對(duì)菌絲生長(zhǎng)速度及形態(tài)特征的影響

不同溫度對(duì)斑玉蕈菌絲生長(zhǎng)速度及形態(tài)特征的影響見(jiàn)表1及圖1。

表1 菌絲生長(zhǎng)速度及形態(tài)特征Tab.1 Mycelial growth rate and characterization

圖1 不同溫度下菌絲形態(tài)特征Fig.1 Mycelial characteristics at different temperatures

由表1和圖1可看出，菌絲在20℃培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)速度最快，其次是25℃，菌絲潔白、濃密，氣生菌絲強(qiáng)、邊緣圓滑規(guī)則，但25℃菌絲濃密度與緊實(shí)度比20℃強(qiáng)；菌種在28℃培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)速度慢，菌絲潔白度較高，但濃密度較低，氣生菌絲弱，在15℃培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)速度較慢，在30℃培養(yǎng)時(shí)生長(zhǎng)速度最慢，菌絲發(fā)黃，濃密度最低，氣生菌絲最弱，邊緣角變不規(guī)則，37℃培養(yǎng)時(shí)菌絲停止生長(zhǎng)。菌種在不同溫度下生長(zhǎng)速度差異顯著，適宜溫度能提高菌絲生長(zhǎng)速度和規(guī)則菌絲形態(tài)形成，高溫顯著抑制菌絲生長(zhǎng)與形態(tài)形成。

2.2 測(cè)序結(jié)果及序列深度驗(yàn)證

不同溫度下樣品的有效序列數(shù)、OTU數(shù)和覆蓋率的統(tǒng)計(jì)見(jiàn)表2。

表2 不同溫度下樣品的有效序列數(shù)、OTU數(shù)和覆蓋率Tab.2 Effective sequence number,OTU number and coverage of samples at different temperatures

表2對(duì)5個(gè)溫度下的15個(gè)樣品進(jìn)行了16S rRNA基因高通量測(cè)序，經(jīng)序列過(guò)濾和去除嵌合體序列，各樣品有效序列數(shù)量從60 591條～67 643條不等，平均為63 684條，5組樣品平均序列長(zhǎng)度453 bp～550 bp。

由圖2所示，樣品稀釋曲線趨向平坦，由表2可知，5組樣品的細(xì)菌覆蓋率99.92%～99.95%，說(shuō)明取樣合理，測(cè)序結(jié)果較真實(shí)地反映了不同溫度下菌絲共生細(xì)菌的群落組成，置信度高。

圖2 不同溫度97%相似性的OTU稀釋曲線Fig.2 Rarefaction curves of OTUs clustered at 97% sequence across different temperatures

2.3 細(xì)菌多樣性分析

在相似度97%情況下，不同溫度下樣品細(xì)菌多樣性統(tǒng)計(jì)分析見(jiàn)表3。

表3 不同溫度下樣品細(xì)菌多樣性統(tǒng)計(jì)分析Tab.3 Analysis of bacterial diversity at different temperatures

由表3知，ACE指數(shù)15℃最高，30℃次之，均遠(yuǎn)高于其他溫度，表明這2個(gè)溫度下菌絲細(xì)菌群落中物種數(shù)目較多，Chao 1值30℃最高，同時(shí)OTU數(shù)30℃最大，表明30℃時(shí)物種豐富度最高。Shannon指數(shù)15℃最高，30℃次之，表明這2個(gè)溫度下細(xì)菌種類較多，Simpson指數(shù)25℃最高，15℃最低，30℃偏低，表明25℃時(shí)細(xì)菌種類分布最均勻，而15℃和30℃細(xì)菌分布相對(duì)不均勻。

2.4 細(xì)菌群落組成分析

基于USEARCH軟件的聚類結(jié)果，將OTU在各個(gè)分類水平上進(jìn)行分析，獲得樣品在門(mén)、綱、目、科、屬、種分類學(xué)水平上的群落結(jié)構(gòu)，所有樣品共檢測(cè)到細(xì)菌35門(mén)、86綱、196目、350科、685屬，本文選取豐度較高的10個(gè)門(mén)及屬的細(xì)菌，分析溫度變化對(duì)其影響，繪制細(xì)菌群落組成條形圖見(jiàn)圖3。

圖3 不同溫度下門(mén)和屬的細(xì)菌群落組成Fig.3 Bacterial community composition of phylum and genus at different temperatures

由圖3a可知，在門(mén)水平豐度柱狀圖中，變形菌門(mén) （Proteobacteria） 24.10%～35.80%，厚壁菌門(mén)（Firmicutes） 19.36%～25.43%，擬桿菌門(mén) （Bacteroidetes） 13.07%～19.35%，放線菌門(mén) （Actinobacteria） 9.34%～13.64%，藍(lán)細(xì)菌門(mén) （Cyanobacteria）2.97%～24.17%，梭桿菌門(mén) （Fusobacteria） 1.52%～3.10%，疣微菌門(mén) （Verrucomicrobiae） 1.38%～2.87%，綠彎菌門(mén)（Chloroflexi）0.53%～2.51%，酸桿菌門(mén) （Acidobacteria） 0.42%～1.60%，軟壁菌門(mén)（Tenericutes） 0.57%～1.41%，其他 （others） 2.30%～4.77%，以上菌門(mén)中變形菌門(mén)、厚壁菌門(mén)、擬桿菌門(mén)在各溫度下的豐度均高于10%為優(yōu)勢(shì)菌門(mén)。變形菌門(mén)在28℃下豐度最高，厚壁菌門(mén)在15℃豐度最高，擬桿菌門(mén)在20℃豐度最高。藍(lán)細(xì)菌門(mén)豐度在25℃（24.17%） 和 20℃（6.43%） 明顯高于其他溫度（2.96%～3.31%）。25℃細(xì)菌種類多屬于排名前10的門(mén)，其他豐度僅2.30%，15℃其他豐度為4.77%，20℃其他豐度為3.55%，28℃其他豐度5.91%，30℃其他豐度4.31%，不同溫度下其他類菌門(mén)的豐度差異較大。

由圖3b可知，基于屬水平分析，所有樣品共檢測(cè)到細(xì)菌685個(gè)屬，溫度對(duì)細(xì)菌屬水平豐度的影響主要涉及以下10個(gè)屬：擬桿菌屬 （Bacteroides）4.82%～10.24%，紅球菌屬 （Rhodococcus） 4.75%～6.93%，毛螺菌科 NK4A136組（Lachnospiraceae_NK4A 136_group） 1.14%～3.11%，普雷沃氏菌屬（Prevotella_9） 1.47%～2.47%，葡萄球菌屬（Staphylococcus） 1.27%～3.77%，蒼白桿菌屬 （Ochrobactrum） 0.54%～9.71%，克雷伯氏菌屬 （Klebsiella）0.34%～0.60%，甲基菌屬（Methylobacillus） 0.17%～5.93%，沙雷氏菌屬（Serratia） 0.002%～0.110%，其他（others） 72.43%～78.12%。其中紅球菌屬、葡萄球菌屬及毛螺菌科NK4A136組為革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，沙雷氏菌屬、擬桿菌屬、克雷伯氏菌屬、甲基菌屬、蒼白桿菌屬、普雷沃氏菌屬為革蘭氏陰性細(xì)菌。優(yōu)勢(shì)菌屬為擬桿菌屬、紅球菌屬、毛螺菌科NK4A136組，在各溫度下豐度均高于4%，擬桿菌屬豐度15℃為9.48%，20℃豐度10.24%，25℃豐度7.90%，28℃豐度4.82%，30℃豐度5.68%。該菌屬豐度在20℃和25℃顯著高于其他溫度；此外，甲基菌屬豐度在30℃ （5.93%）、28℃（2.44%） 高于 15℃ （0.18%）、20℃（0.17%）、25℃（0.36%），該菌屬豐度在20℃和25℃顯著低于其他溫度。

2.5 細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)差異分析

不同溫度下細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)差異中門(mén)水平細(xì)菌豐度聚類熱圖見(jiàn)圖4。

由圖4門(mén)水平細(xì)菌群落組成圖顯示，豐度高于10%的菌門(mén)較少，豐度較低的菌門(mén)較多，與門(mén)水平樣品細(xì)菌豐度聚類熱圖結(jié)果基本一致，不同溫度下優(yōu)勢(shì)菌門(mén)均較少。25℃培養(yǎng)時(shí)藍(lán)細(xì)菌門(mén)、變形菌門(mén)優(yōu)勢(shì)顯著，15℃疣微菌門(mén)、梭桿菌門(mén)豐度較高，20℃厚壁菌門(mén)、軟壁菌門(mén)豐度較高，28℃酸桿菌門(mén)、綠彎菌門(mén)豐度較高，30℃軟壁菌門(mén)、擬桿菌門(mén)豐度較高。不同溫度下細(xì)菌群落的豐度較高的菌門(mén)不完全相同。此外，圖4細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)關(guān)系顯示門(mén)水平25℃與30℃群落結(jié)構(gòu)差異最大。屬水平細(xì)菌豐度聚類熱圖見(jiàn)圖5。

由圖5屬水平樣品細(xì)菌菌落聚類熱圖顯示，不同溫度下優(yōu)勢(shì)菌屬顯著不同，15℃葡萄球菌屬、紅球菌屬相對(duì)豐度顯著高于其他溫度，20℃擬桿菌屬相對(duì)豐度顯著高于其他溫度，25℃克雷伯氏菌屬相對(duì)豐度高于其他溫度，28℃蒼白桿菌屬相對(duì)豐度高于其他溫度，30℃瘤胃球菌屬（Ruminococcus）、食酸菌屬（Acidovorax）、甲基菌屬、毛螺菌屬、甲基菌屬相對(duì)豐度高于其他溫度。各溫度群落結(jié)構(gòu)相似度關(guān)系依次為30℃、15℃、28℃、20℃、25℃，屬水平20℃與25℃群落結(jié)構(gòu)差異較小，與菌種表型特征結(jié)果相一致。

2.6 細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)與溫度的關(guān)系

優(yōu)勢(shì)菌屬與溫度的相關(guān)性分析見(jiàn)圖6。

由圖6可知，RDA的研究結(jié)果表明蒼白桿菌屬（Ochrobactrum）、甲基菌屬（Methylobacillus）、毛螺菌科NK4A136組（Lachnospiraceae_NK4A 136_group）、沙雷氏菌屬（Serratia） 菌屬豐度與溫度呈正相關(guān)，紅球菌屬（Rhodococcus）、擬桿菌屬（Bacteroides）、克雷伯氏菌屬（Klebsiella）、葡萄球菌屬（Staphylococcus） 菌屬豐度與溫度呈負(fù)相關(guān)。

3 討論

3.1 溫度對(duì)細(xì)菌群落組成及結(jié)構(gòu)的影響

溫度是影響細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的重要因素，其變化會(huì)對(duì)細(xì)菌的種類和數(shù)量產(chǎn)生巨大影響。李云福等[16]通過(guò)高通量測(cè)序技術(shù)對(duì)雙孢蘑菇培養(yǎng)料發(fā)酵過(guò)程中細(xì)菌群落進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，堆肥前優(yōu)勢(shì)類群為變形菌門(mén)，一次發(fā)酵后優(yōu)勢(shì)類群為異常球菌-棲熱菌門(mén)、厚壁菌門(mén)等，二次發(fā)酵時(shí)綠彎菌門(mén)為主要類群。陳長(zhǎng)卿等[17]對(duì)草菇（Volvariella volvacea） 栽培料二次發(fā)酵過(guò)程進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)發(fā)酵過(guò)程中溫度變化會(huì)改變?cè)耘嗔现袃?yōu)勢(shì)菌群及其細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)。本研究首次證實(shí)斑玉蕈菌絲共生細(xì)菌的存在，且溫度變化會(huì)對(duì)斑玉蕈菌絲中優(yōu)勢(shì)菌屬及其細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)產(chǎn)生重要影響，研究結(jié)果表明門(mén)水平下溫度變化會(huì)引起優(yōu)勢(shì)菌門(mén)的豐度增加。此外，25℃、20℃條件下藍(lán)細(xì)菌門(mén)豐度較高，15℃、20℃、30℃藍(lán)細(xì)菌豐度明顯降低，菌絲生長(zhǎng)速度20℃和25℃顯著高于其他溫度，推測(cè)藍(lán)細(xì)菌門(mén)細(xì)菌與菌絲生長(zhǎng)速度相關(guān)。屬水平結(jié)果表明不同溫度下擬桿菌屬、紅球菌屬，毛螺菌科NK4A136組的豐度均較高，25℃時(shí)最高，且25℃時(shí)菌絲長(zhǎng)勢(shì)最佳，很可能是因?yàn)樵擃惾贺S度的升高可促進(jìn)菌絲生長(zhǎng)。當(dāng)溫度高于25℃時(shí)，菌絲長(zhǎng)勢(shì)較差，甲基菌屬豐度升高，推測(cè)甲基菌屬豐度與菌絲生長(zhǎng)呈負(fù)相關(guān)。

3.2 溫度對(duì)細(xì)菌多樣性的影響

自然界中細(xì)菌種類繁多，不同細(xì)菌最適溫度的不同，使得不同環(huán)境中細(xì)菌多樣性及群落結(jié)構(gòu)差異顯著，改變環(huán)境溫度會(huì)引起細(xì)菌多樣性變化。本研究中不同溫度下斑玉蕈菌絲細(xì)菌多樣性存在差異，25℃菌絲表型較優(yōu)，其菌群豐富度及種類多樣性較低但菌群種類分布最均勻，15℃菌絲生長(zhǎng)速度較慢，其菌群豐富度及種類多樣性較高但分布最不均勻?？赡苁切庐a(chǎn)生的菌屬破環(huán)了原有菌群的均勻分布，不利于菌絲的生長(zhǎng)，28℃和30℃菌絲的長(zhǎng)勢(shì)較差，其菌群多樣性較高分布較均勻，可能是因?yàn)楫a(chǎn)生了抑制菌絲生長(zhǎng)的雜菌。

3.3 菌絲生長(zhǎng)速度及表型特征與共生細(xì)菌的關(guān)系

菌絲生長(zhǎng)速度及表型特征與細(xì)菌群落多樣性、組成及結(jié)構(gòu)有著密切的相關(guān)性，益生菌的存在、豐富度及豐度大小對(duì)菌絲生長(zhǎng)至關(guān)重要。周巍巍[18]研究了惡臭假單胞菌（Pseudomonas putida） 對(duì)雙孢蘑菇菌絲的促生作用及機(jī)理，發(fā)現(xiàn)惡臭假單胞菌可顯著提高雙孢蘑菇菌絲的生長(zhǎng)速度及誘導(dǎo)并促進(jìn)子實(shí)體的形成和發(fā)育。Cho等[19]從平菇菌絲表面分離得到的10種熒光假單胞菌菌株，其中7種在平菇原基形成和子實(shí)體發(fā)育的過(guò)程中具有促進(jìn)作用。本研究中25℃時(shí)斑玉蕈菌絲生長(zhǎng)速度較快、菌絲表型最佳，該溫度下擬桿菌屬、紅球菌屬及毛螺菌科NK4A136組為優(yōu)勢(shì)菌屬，表明這三類菌屬可能對(duì)斑玉蕈菌絲生長(zhǎng)呈正面影響，30℃時(shí)菌絲生長(zhǎng)速度最低且表型最差，該溫度下甲基菌屬豐度大幅高于其他溫度，表明這類菌屬可能對(duì)菌絲生長(zhǎng)呈負(fù)面影響。

綜上所述，研究首次明確食用菌菌絲存在共生細(xì)菌，且細(xì)菌多樣性和群落結(jié)構(gòu)與溫度相關(guān)性較大，同時(shí)表明共生細(xì)菌與菌絲生長(zhǎng)、形態(tài)特征存在密切聯(lián)系，這為通過(guò)溫度調(diào)控食用菌生長(zhǎng)發(fā)育機(jī)理以及共生微生物的開(kāi)發(fā)利用提供了科學(xué)依據(jù)。