李夢桐 王楠 瑪依拉·吐爾地別克

摘要：基于我國藥用食用真菌羊肚菌種植現(xiàn)狀、栽培關(guān)鍵技術(shù)以及富硒控制技術(shù)等方面的最新研究進(jìn)展，著重介紹栽培技術(shù)上如分類及其生活史、生長因素（營養(yǎng)生長與環(huán)境條件）、菌種選育、培養(yǎng)基配方、發(fā)酵技術(shù)、外源營養(yǎng)袋技術(shù)、人工栽培（室內(nèi)栽培和室外栽培）、病蟲害發(fā)生、防治技術(shù)措施等以及富硒控制技術(shù)的相關(guān)研究，并對羊肚菌人工栽培及富硒控制技術(shù)等進(jìn)行歸納總結(jié)，為藥用食用真菌羊肚菌高效優(yōu)質(zhì)栽培提供參考依據(jù)，并對今后強(qiáng)化藥食用真菌羊肚菌標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化栽培，以及富硒控制技術(shù)及其產(chǎn)品開發(fā)提出合理化建議。

關(guān)鍵詞：藥用食用真菌;羊肚菌;人工栽培;富硒;控制技術(shù)

羊肚菌（Morchella spp.）屬子囊菌亞門（Ascomycotina）盤菌綱（Discomycetes）盤菌目（Pezizales）羊肚菌科（Morchellaceae）羊肚菌屬（Morchella），別稱羊雀菌、羊肚蘑、麻子菌、羊肚子或包谷菌，其外形多為尖頂或圓頂，菌柄長3～8 cm、粗2～4 cm，平滑、中空，基部膨大，呈白色;菌蓋為布滿凹陷、棱脊的網(wǎng)狀體，因形似羊肚得名[1]。羊肚菌有肉質(zhì)鮮嫩、獨到風(fēng)味、滋味鮮美的子實體，含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖、礦物質(zhì)、酚類化合物、多種維生素和抗氧化劑等有益物質(zhì)，是珍稀的食用藥用真菌[2-3]。此外，羊肚菌中含有多種藥用成分、纖維素酶及γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶等活性成分，具有抗菌、抗病毒、抑制血小板聚集及黑色素形成等特性[4-9]。食用羊肚菌具有助消化、化痰理氣、補(bǔ)腎壯陽、補(bǔ)腦提神、降血脂、調(diào)節(jié)免疫、抗疲勞和抗腫瘤等多重功效[1]。

全世界不少國家和地區(qū)均分布有羊肚菌，較廣泛分布的國家如法國、德國、美國、中國和印度，少量分布的如前蘇聯(lián)、捷克斯洛伐克、墨西哥、瑞典、西班牙和巴基斯坦局部地區(qū)[10]。我國有28個?。ㄖ陛犑?、自治區(qū)）分布有羊肚菌，北起黑龍江，南到廣東、福建、臺灣，西起新疆、西藏，東到山東[11]。20世紀(jì)末美國率先實現(xiàn)羊肚菌工廠化生產(chǎn)[12]。我國于20世紀(jì)70年代開始對人工栽培羊肚菌技術(shù)進(jìn)行研究，先后對羊肚菌仿生栽培、菌材仿生栽培、菌根化栽培和林下仿生栽培等技術(shù)進(jìn)行深入研究[13-16]，隨著菌種馴化、補(bǔ)料等技術(shù)的不斷優(yōu)化改進(jìn)，其人工栽培技術(shù)得到較快推廣應(yīng)用[17]。目前我國羊肚菌主栽品種為梯棱羊肚菌（M. importuna）和六妹羊肚菌（M. sextelata）等[18-19];其人工集約化栽培已由我國四川、云南等地擴(kuò)展至20多個?。ㄖ陛犑?、自治區(qū)）;2017年我國羊肚菌栽培面積已超過 4 600 hm2，鮮菇平均產(chǎn)量約達(dá) 100 kg/667 m2，全年收獲量近7 000 t[11，20]。但是由于氣候、營養(yǎng)、管理等諸多方面存在差異，實際生產(chǎn)時會出現(xiàn)各種問題，如產(chǎn)量時高時低、風(fēng)險較大和效益不明顯等，會制約羊肚菌規(guī)模化、工廠化生產(chǎn)。

硒有“抗癌之王”的美稱，相關(guān)試驗結(jié)果證明食用菌對硒的富集具有差異性，且其營養(yǎng)成分可通過富硒得到改善，如何應(yīng)用食用菌發(fā)酵技術(shù)培育富硒農(nóng)產(chǎn)品，開發(fā)有機(jī)硒制品已經(jīng)成為新的研究熱門問題[21-22]。本研究主要對羊肚菌人工栽培及富硒控制技術(shù)最新研究進(jìn)展進(jìn)行歸納總結(jié)，以期為其高效、優(yōu)質(zhì)、富硒栽培提供參考依據(jù)，并對今后進(jìn)一步優(yōu)化羊肚菌栽培、富硒控制及其產(chǎn)品開發(fā)提出合理化建議與對策。

1 栽培研究進(jìn)展

1.1 分類及羊肚菌生活史

目前黃色羊肚菌類群（Esculenta Clade）、黑色羊肚菌類群（Elata Clade）和變紅羊肚菌類群（Rufubrunnea Clade）的69個羊肚菌發(fā)育學(xué)種被確立[18，23-24]。杜習(xí)慧等通過對我國和其他國家發(fā)現(xiàn)的各種羊肚菌標(biāo)本進(jìn)行對比和系統(tǒng)發(fā)育分析，得出我國有30個羊肚菌系統(tǒng)發(fā)育學(xué)種，屬于2個分支：黃色羊肚菌類群（17個）和黑色羊肚菌類群（13個）[25-26]。

精確描述羊肚菌的生活史較困難，因為羊肚菌的營養(yǎng)型因環(huán)境條件的不同而不同，有腐生型、菌根型或者二者兼之，變化范圍比較大[27]。Alvarado等提出當(dāng)羊肚菌的子囊果成熟后，每個子囊會有8個子囊孢子產(chǎn)生，之后子囊孢子可以萌發(fā)形成初級菌絲，在逆境下初級菌絲可能會形成分生孢子或菌核[28];不同的子囊孢子形成單核菌絲后相互接合形成異核菌絲或次級菌絲，次級菌絲會扭結(jié)形成菌核，隨之產(chǎn)生厚垣孢子和粉孢子;粉孢子在人工栽培中容易產(chǎn)生，而在自然條件下基本上不能形成[29]。當(dāng)用適當(dāng)?shù)耐獠凯h(huán)境刺激時，羊肚菌的菌核可以形成營養(yǎng)菌絲和產(chǎn)囊絲，產(chǎn)囊絲可以扭結(jié)成細(xì)長形的原基，原基繼續(xù)發(fā)育形成子囊果，在菌絲到子實體形成的整個過程中，菌核的形成必不可少[30-31]。

1.2 生長因素

1.2.1 營養(yǎng)生長 森林腐殖質(zhì)土和黑土等比較適宜羊肚菌發(fā)生，其土壤質(zhì)地主要以沙壤土等為宜，羊肚菌較多生長在森林植被、雜草稀疏和土壤潮濕的區(qū)域[32-34]。羊肚菌能夠利用15種碳源、27種氮源，但不同的碳源、氮源培養(yǎng)基對其菌絲生長有顯著影響;試驗表明，最適宜羊肚菌發(fā)育的碳源、氮源分別為可溶性淀粉和尿素，對復(fù)合氮源、氨基酸和銨鹽的利用效果較差[35]。努爾古麗·阿布都熱合曼的研究也表明，最適宜新疆羊肚菌菌絲和原基生長的碳源依次為蔗糖、葡萄糖和甘油，氮源依次為硝酸鉀、硝酸銨和硫酸銨[36]。李書蘭研究表明，葡萄糖和硝酸鉀對提高菌株含孢量效果顯著，淀粉和蛋白胨可以顯著提高孢子萌發(fā)率[37]。無機(jī)鹽、維生素與植物生長調(diào)節(jié)劑會對羊肚菌菌絲生長造成一定的影響，其中能促進(jìn)羊肚菌菌絲正常生長的有MnSO4、2，4-二氯苯氧乙酸或吲哚乙酸;對羊肚菌菌絲起明顯抑制作用的有赤霉素;作用不明顯的是6-芐氨基腺嘌呤[35]。此外，與羊肚菌菌絲相互扭結(jié)形成子實體的伴生菌有很強(qiáng)的分散纖維素、木質(zhì)素的能力，試驗表明覆土有利于菌絲生長發(fā)育[38]。

1.2.2 環(huán)境條件 通過試驗發(fā)現(xiàn)，不同羊肚菌適宜的溫度、pH值和水分等條件不同。不同條件下同株羊肚菌的菌絲形態(tài)、顏色等也存在差異，這2種現(xiàn)象展現(xiàn)了羊肚菌復(fù)雜多樣的生理特征[39]。羊肚菌菌絲體生長的最適溫度為15～18 ℃，孢子萌發(fā)溫度為18～22 ℃，子實體發(fā)生初期日平均氣溫為6.5～9.3 ℃、盛產(chǎn)期為 10.1～14.4 ℃、末期為15.8～177 ℃，晝夜溫差大促進(jìn)子實體的形成[40-42]。李書蘭研究表明，以15 ℃為培養(yǎng)溫度時菌株的含孢量提高最明顯，但在15 ℃培養(yǎng)時孢子萌發(fā)率會受到明顯抑制[37]。菌株的孢子生成和萌發(fā)不適宜在偏堿性條件下進(jìn)行。孢子的活孢率和萌發(fā)率在逆境下明顯下降，相比對照組有顯著差異。羊肚菌原基形成時期和子實體生長、發(fā)育時期都需要大量水分（80～90mm降水量）和>5 ℃有效積溫≥390～420 ℃[43];菌絲生長時期對空氣不敏感，子實體生長、發(fā)育時期對空氣比較敏感，含氧量過低不會出菇。其他種類食用菌基本一致，羊肚菌生長最適宜pH值為6.0～6.5[44]。在人工栽培羊肚菌時適宜用含水量在63%左右的培養(yǎng)料，子實體生長最佳空氣相對濕度應(yīng)維持在 85%～95%。羊肚菌營養(yǎng)生長階段不需要光照，但子實體形成階段需要光照，一般生長于半陰半陽或七分陰、三分陽等相似環(huán)境，有利于其生長[41-42，45-46]。

1.3 菌種選育

食用菌育種目標(biāo)不僅要提高產(chǎn)量、改良品質(zhì)、增加抗逆性，還要改進(jìn)商品外形、改變栽培溫型和提高某些活性成分含量等[47]。目前羊肚菌純種大都選用孢子分離、基內(nèi)菌絲分離或組織分離等方式進(jìn)行分離，其中孢子分離的方式最安全有效[48]。目前羊肚菌人工栽培中使用的優(yōu)質(zhì)菌種多由2種方式提供：野生菌株分離培養(yǎng)與人工馴化栽培[49-50]，少數(shù)由其孢子自交或雜交培育提供[51];也可采用人為控制下的常規(guī)選育技術(shù)根據(jù)其單孢和多孢均具有出菇特性進(jìn)行多孢雜交選育優(yōu)良品種[18]。國內(nèi)外已馴化出菇的羊肚菌屬物種有9種：變紅羊肚菌（M. rufobrunnea）、小羊肚菌（M. deliciosa）、黑脈羊肚菌（M. angusticeps）、黑脈羊肚菌（M. esculenta）、粗柄羊肚菌（M. crassipes）、尖頂羊肚菌（M. conica）、六妹羊肚菌、梯棱羊肚菌和七妹羊肚菌（M. septimelata）[19，30，52-56]。我國主栽品種屬于黑色羊肚菌支系，以梯棱羊肚菌和六妹羊肚菌為主[19，55]。目前，關(guān)于羊肚菌原生質(zhì)體技術(shù)方面的研究多數(shù)停滯在制備與再生環(huán)節(jié)[57-58]。劉士旺等通過原生質(zhì)體誘變技術(shù)，獲得了高生物量、高氨基酸含量的尖頂羊肚菌突變株[58]。劉偉等首次全方位系統(tǒng)使用內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)分析（ITS）和隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）分子標(biāo)記技術(shù)，鑒別我國羊肚菌栽培菌株的種性并證明了RAPD分子標(biāo)記轉(zhuǎn)化為菌株特征性擴(kuò)增區(qū)域（SCAR）標(biāo)記的可行性[59]。

羊肚菌生產(chǎn)菌種的退化、老化是目前羊肚菌人工栽培面臨的重要問題，與其他食用菌相比羊肚菌菌株退化現(xiàn)象相對嚴(yán)重，每年給生產(chǎn)者造成了大量損失。劉偉等研究顯示，菌種退化主要受其遺傳、細(xì)胞學(xué)、生理學(xué)和環(huán)境因素等決定，羊肚菌的多核現(xiàn)象、快速生長能力和菌絲細(xì)胞之間的頻繁融合現(xiàn)象可能是加劇其菌種退化的重要原因[18]。也有研究發(fā)現(xiàn)普通黑脈羊肚菌部分子囊孢子萌發(fā)菌絲體存在生長停滯現(xiàn)象[60]。He等將不同菌株的高羊肚菌（M. elata）接種在CYM培養(yǎng)基上進(jìn)行 1 400～2 250 h 連續(xù)繼代培養(yǎng)，菌株出現(xiàn)不可逆轉(zhuǎn)的老化死亡現(xiàn)象，菌絲發(fā)育不良、生長速度減緩，菌核形成能力喪失;粗柄羊肚菌、梯棱羊肚菌和六妹羊肚菌也會出現(xiàn)這種現(xiàn)象;在麥粒、木屑、土壤栽培種培養(yǎng)基連續(xù)傳代培養(yǎng)中也會發(fā)生[61]。有相關(guān)報道稱在草原羊肚菌（M. steppicola）和粗柄羊肚菌的菌絲生長與發(fā)育過程中，會產(chǎn)生明顯的氧化應(yīng)激，適當(dāng)?shù)难趸瘧?yīng)激能促進(jìn)菌核的發(fā)生，過度則會導(dǎo)致核酸、蛋白質(zhì)和脂肪等生物分子受到損傷，誘導(dǎo)一系列控制和監(jiān)督系統(tǒng)損傷，影響老化過程[62-63]。

1.4 培養(yǎng)基配方

李書蘭研究得出了羊肚菌菌株孢子生成的最適培養(yǎng)基的配方（可溶性淀粉含量2%、葡萄糖含量2%、蛋白胨含量1%、KH2PO4含量 0.5%、MgSO4含量 0.5%、CaCO3含量 05%、NaCl含量 0.5%、FeSO4含量 0.01%、瓊脂含量2%，最適pH值為70）[37]。其常用的馴化母種培養(yǎng)基有馬鈴薯葡萄糖瓊脂（PDA）培養(yǎng)基和改良型PDA培養(yǎng)基等[64]。吳韶菊等確定了羊肚菌母種批量生產(chǎn)的玉米粉培養(yǎng)基最佳配方（玉米粉 20 g、蛋白胨1 g、磷酸氫二鉀 1 g、硫酸鎂 0.5 g、瓊脂 20 g和水1 000 mL）[65]。我國各地羊肚菌原種培養(yǎng)基有很大差異，主要原因是各地的原種栽培料（農(nóng)產(chǎn)品下腳料）配方不同導(dǎo)致[66]。高新樓等研究顯示，原種培養(yǎng)基配方為木屑含量70%、小麥含量10%、腐殖土含量10%、麥麩含量8%、石膏含量1%、過磷酸鈣含量1%[64]。其他的羊肚菌原種栽培種培養(yǎng)基配方如櫟木屑 39 kg、棉籽殼38 kg、麥麩20 kg、砂糖1 kg、石膏 1 kg等[16，67]。萬濤等研究栽培種培養(yǎng)料原料配比，通過試驗篩選出2種高效培養(yǎng)料，其主要原料是小麥、木屑、麥麩、谷殼[68]。羊肚菌栽培種培養(yǎng)基配方也有研究報道：棉殼含量75%、麩皮含量20%、石膏含量1%、石灰含量1%和腐殖土含量3%[16，67];小麥含量34%、腐殖土含量10%、木屑含量55%、石膏粉含量1%[64]。李書蘭也篩選出優(yōu)良羊肚菌菌株的最適栽培種培養(yǎng)基的配方（木屑含量65%、麩皮含量20%、松針粉含量10%、蔗糖含量1%、石膏含量1%、KH2PO4含量0.1%、維生素B1含量 10 mg/kg、新鮮蒜苗浸出液的料液比1 g ∶ 1 mL）[37]。劉偉等報道其外源營養(yǎng)袋配方：小麥80～120 g、谷殼40 g（或木屑 40 g 和谷殼 20 g或玉米芯40 g和谷殼 20 g）、腐殖質(zhì)土20～40 g、生石灰1%～1.5%、石膏2%和KH2PO4 15‰[56]。外源營養(yǎng)袋的配方也不同，相關(guān)研究顯示，其營養(yǎng)袋配方為小麥含量30%、木屑含量30%、稻殼含量27%、腐殖土含量10%、石膏含量2%、生石灰含量1%、KH2PO4含量1‰、含水量60%～65%[64]。

1.5 發(fā)酵技術(shù)

一些野生食用菌如羊肚菌、牛肝菌等雖還不能人工栽培，但均可采用液體發(fā)酵法來生產(chǎn)菌絲體[69]。由于固體培養(yǎng)基培養(yǎng)羊肚菌的培育條件復(fù)雜，使用液體培養(yǎng)基發(fā)酵更有利于不斷優(yōu)化發(fā)酵條件，從而有利于擴(kuò)大規(guī)模化培育并降低輸出成本[70]。李書蘭通過試驗顯示，液體發(fā)酵制得的菌劑平均含孢量均低于固體平板培養(yǎng)，野生孢子粉的含孢量更高[37]。野生孢子粉的萌發(fā)率也高于羊肚菌子實體干粉和液體培養(yǎng)基發(fā)酵產(chǎn)生的菌絲體凍干產(chǎn)物;平板培養(yǎng)制得菌劑的萌發(fā)率低于液體發(fā)酵，但兩者萌發(fā)率都介于子實體干粉及菌絲體干粉和野生孢子粉之間。

李曉明等利用往復(fù)式水浴恒溫振蕩器搖瓶試驗，篩選出最適合羊肚菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基的配方、通氣量、培養(yǎng)時間、溫度、pH值等基本條件，并且利用微生物培養(yǎng)器通過分批發(fā)酵的方法，發(fā)現(xiàn)了羊肚菌液體發(fā)酵的基本規(guī)律[71]。季向陽等優(yōu)化了羊肚菌發(fā)酵培養(yǎng)的基本條件，通過L9（34） 正交設(shè)計法確定了初始pH值為6.0、接種量為10%、裝液量為 100 mL/300 mL 三角瓶、旋轉(zhuǎn)頻率為140 r/min、25 ℃ 恒溫培養(yǎng)120 h是其液體發(fā)酵的最佳條件[72]。張旺璧等通過羊肚菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基試驗，得到最優(yōu)培養(yǎng)基配方：玉米粉30 g/L、黃豆粉 20 g/L、葡萄糖10 g/L、酵母粉5 g/L、磷酸二氫鉀和硫酸鎂適量[73]。任愛梅等通過5種不同成分的羊肚菌培養(yǎng)基試驗，發(fā)現(xiàn)在綜合PDA培養(yǎng)基上羊肚菌菌絲生長速度最快且菌核數(shù)量最多[74]。在生產(chǎn)中使用麥麩酵母膏液體培養(yǎng)基、麥麩大豆粉液體培養(yǎng)基培養(yǎng)羊肚菌可縮短制種周期[75]。王瑩在培養(yǎng)羊肚菌菌絲體時應(yīng)用深層發(fā)酵技術(shù)，繪制出菌株在發(fā)酵罐中的生長曲線，最終確定了合適的放罐時間約為發(fā)酵120 h;并優(yōu)化了液體種子培養(yǎng)參數(shù)和發(fā)酵培養(yǎng)基參數(shù)，建立了生長動力學(xué)模型[76]。

1.6 外源營養(yǎng)袋補(bǔ)料技術(shù)

Ower等多次指出先使用水化處理后培養(yǎng)的菌核或液體發(fā)酵培養(yǎng)的營養(yǎng)菌絲體進(jìn)行播種，再直接控制水分進(jìn)行催菇，可以實現(xiàn)成功出菇，而其曾提出的羊肚菌人工栽培過程中外源營養(yǎng)物補(bǔ)充的問題，該技術(shù)在栽培中的決定性作用在其發(fā)表的專利中并沒有著重體現(xiàn)[77-79]。劉偉等于2005年前后根據(jù)Ower等關(guān)于外源營養(yǎng)物的研究報道，發(fā)現(xiàn)了羊肚菌人工栽培中的外源營養(yǎng)袋營養(yǎng)供給理論，最終發(fā)展成為現(xiàn)在的外源營養(yǎng)袋補(bǔ)料技術(shù)[18，80]。近年來我國先后公開了較多有關(guān)或近似于外源營養(yǎng)袋技術(shù)及配方的專利技術(shù)[81-90]。使用外源營養(yǎng)袋為羊肚菌提供外部營養(yǎng)物，使羊肚菌馴化栽培的商業(yè)化成為必然，是人工栽培羊肚菌研究歷史上的新發(fā)展[17]。近年來外源營養(yǎng)袋的形式和使用方法越來越便捷、有效[80]，由生產(chǎn)前期的大袋（規(guī)格：15 cm×45 cm、22 cm×45 cm）改為現(xiàn)在規(guī)?；褂玫男〈ㄒ?guī)格：12 cm×24 cm），放置數(shù)量為 1 600～1 800袋/667 m2;由立放改為平擺，操作明顯便利，菌絲長滿袋的時間明顯縮短，營養(yǎng)轉(zhuǎn)化效率更高[56]。

1.7 人工栽培技術(shù)

目前研究羊肚菌栽培的系統(tǒng)有M. esculenta和M. angusticeps，這2種系統(tǒng)均包括室內(nèi)自然栽培和室外自然栽培[9]。羊肚菌人工栽培的常規(guī)方法有3種：廣口瓶法、無土出菇法及外源營養(yǎng)袋法[27]。Ower等發(fā)明了廣口瓶法[30，77，91]，Ower等還發(fā)明了另一種栽培方法即外源營養(yǎng)袋法[78]。Masaphy報道了一種羊肚菌無土出菇法栽培變紅羊肚菌[53]。Amir等為了探明栽培中羊肚菌菌核與菌絲中營養(yǎng)成分的關(guān)系，選用分割平板法來代替?zhèn)鹘y(tǒng)的廣口瓶法，最終確定了羊肚菌營養(yǎng)轉(zhuǎn)運機(jī)制[92-93]。

1.7.1 室內(nèi)栽培 Ower于1989年首次報道羊肚菌成功在室內(nèi)栽培[79]。世界上第1家羊肚菌栽培工廠是1994年由Terry Farms Inc.建成的，名為Diversified Natural Products，Inc.（DNP），這家美國公司于2005年宣布羊肚菌在室內(nèi)栽培成功，并應(yīng)用公司專利實現(xiàn)了每周生產(chǎn)變紅羊肚菌3 000磅[94]。我國室內(nèi)栽培羊肚菌雖然也已經(jīng)取得成功，但尚未實現(xiàn)羊肚菌大規(guī)模商業(yè)化生產(chǎn)[95]。

1.7.2 室外栽培 我國羊肚菌人工栽培主產(chǎn)區(qū)中選用大田栽培模式的有云南、四川、湖北等地，選用溫室大棚栽培模式的有河北、北京、東北等地[64]。我國羊肚菌人工栽培過程按時間順序依次為貧營養(yǎng)基質(zhì)中菌絲生長時期、富營養(yǎng)基質(zhì)（營養(yǎng)袋）中菌絲生長時期、貧營養(yǎng)基質(zhì)中菌核形成時期與誘導(dǎo)菌核形成子實體時期，這4個時期區(qū)分明顯[27]。李天星等研究表明，羊肚菌大田栽培以大田無基料栽培為主，并對其關(guān)鍵技術(shù)如生長條件、品種選擇、菌種制作、栽培季節(jié)、栽培管理、病蟲害防治等進(jìn)行了總結(jié)，羊肚菌現(xiàn)已在我國西南地區(qū)均有種植[96-98]。廖明亮等采用合適的方法對土壤處理、播種、覆土覆膜、添加外源營養(yǎng)袋、水分和出菇管理等環(huán)節(jié)進(jìn)行了技術(shù)管理，實現(xiàn)了水稻和羊肚菌輪作栽培[99-100]。黃忠乾等詳盡介紹了成都平原地區(qū)與周邊丘陵地區(qū)羊肚菌栽培的林地條件、栽種季節(jié)、作畦、播種覆土、發(fā)菌期與出菇期管理和采收等關(guān)鍵技術(shù)要點[101]?？讓幹业葓蟮涝颇洗罄聿捎煤颂伊窒滦」芭镌耘嘌蚨蔷?，研究了選地、栽培季節(jié)和菌種選擇、搭蔭棚、播種覆土、營養(yǎng)袋擺放及移走、覆膜、水分管理及采收等技術(shù)[102]。熊維全等總結(jié)了成都市花木林下套種羊肚菌關(guān)鍵技術(shù)[103]。葉平陽相關(guān)報道，福建省福安市果農(nóng)在葡萄樹進(jìn)入冬春落葉休眠期后，在空閑的葡萄大棚內(nèi)成功栽培出羊肚菌，并總結(jié)了在葡萄大棚中栽培羊肚菌的成功經(jīng)驗[104]。尚繼輝報道了羊肚菌和黃瓜循環(huán)高效輪作栽培相關(guān)技術(shù)，包括大棚建造、茬口安排等羊肚菌和黃瓜栽培關(guān)鍵技術(shù)[105]。我國北方部分地區(qū)羊肚菌設(shè)施化栽培、林地栽培也相繼得到示范與應(yīng)用[106-108]。張新燕等針對北方羊肚菌設(shè)施栽培技術(shù)的相關(guān)問題進(jìn)行分析，并得出完善，具體的羊肚菌設(shè)施栽培體系[109]。劉羊權(quán)在甘肅省舟曲縣采用反季節(jié)羊肚茵栽培技術(shù)進(jìn)行了示范種植[110]。馬慶芳等報道，寒區(qū)暖棚內(nèi)草菇與羊肚菌輪作可實現(xiàn)周年生產(chǎn)[111]。高原采用在小麥田內(nèi)套種羊肚菌，實現(xiàn)小麥和羊肚菌雙豐收[112]。

1.8 病蟲害發(fā)生與防治

羊肚菌栽培中常有細(xì)菌、霉菌和酵母菌等污染，以及大型真菌污染和蟲害等[66]。王永元等對甘肅省隴南市羊肚菌栽培中有害生物種類進(jìn)行調(diào)查分類，共計17種，并針對主要的有害生物提出合理意見，提供了農(nóng)業(yè)防治、物理防治和化學(xué)防治等思路[113]。劉偉等也報道了羊肚菌常見的病蟲害發(fā)病特點、發(fā)病原因、常見蟲害（如蝸牛、跳蟲、蛞蝓和蚊蠅等）、真菌性病害、細(xì)菌性病害（如紅體病和軟腐病等），并針對病蟲害提出了相關(guān)解決方法：播種前先進(jìn)行土壤的預(yù)處理，如添加石灰、曝曬、熏蒸、悶棚和水淹等;當(dāng)病蟲害發(fā)生時及時進(jìn)行有效防控，如誘捕和病原物隔離;最重要的措施是增強(qiáng)羊肚菌對病蟲害的抗性，通過了解其生長特點為羊肚菌創(chuàng)造最適宜生長發(fā)育的環(huán)境[114]。

2 富硒研究進(jìn)展

目前國內(nèi)外對富硒羊肚菌的研究較少，成果大都集中在液體發(fā)酵和產(chǎn)物提取方面。羊肚菌對硒元素有比較強(qiáng)的富集和轉(zhuǎn)化作用[115-116]。恩施富硒羊肚菌中總硒含量為50.56 μg/100 g，其中極易被人體吸收的有機(jī)硒含量占總硒含量的90%以上[117]。丁健峰等進(jìn)行富硒羊肚菌深層發(fā)酵時，用粗柄羊肚菌926號作發(fā)酵菌種，選擇亞硒酸鈉作為無機(jī)硒源，應(yīng)用響應(yīng)曲面法設(shè)計試驗，進(jìn)行深層發(fā)酵工藝及其參數(shù)優(yōu)化，得到富硒羊肚菌深層發(fā)酵工藝[115，118]。張躍非在裝液量為100 mL/250 mL，Na2SeO3質(zhì)量濃度為9 μg/mL，pH值為7.0（滅菌后）條件下，于24 ℃進(jìn)行液體發(fā)酵，得到富硒率1834%的菌絲體[119]。通過對比分析得出富硒條件下培養(yǎng)出的羊肚菌菌絲體中硒多糖的體外抗氧化作用比非富硒羊肚菌強(qiáng)[119-120]。冮潔等報道羊肚菌菌絲體具有較強(qiáng)的富硒能力，通過深層液體發(fā)酵優(yōu)化得到了適合的富硒條件為硒濃度10 mg/L、裝液量 100 mL/250 mL、pH值7. 0、溫度 25 ℃;使用優(yōu)化的條件進(jìn)行培養(yǎng)，最終菌絲體中硒含量達(dá) 0.13 mg/g，富硒率為9.10%，比更換培養(yǎng)條件前提高了5041%[121]。李娟使用液體培養(yǎng)的方法，以泰山羊肚菌為研究對象進(jìn)行硒元素富集與生物轉(zhuǎn)化研究，得到培養(yǎng)基中最適硒離子濃度為200 mg/kg，此時菌絲有機(jī)硒含量達(dá)到3 205.85 mg/kg，比對照高145倍[122]。孟超等應(yīng)用超聲波提取法提取羊肚菌菌絲中的硒多糖，通過正交試驗得到料液比、提取時間、乙醇濃度等，最終獲得了提取羊肚菌多糖的最適方案[123]。

3 展望

藥用食用真菌羊肚菌盡管在我國已實現(xiàn)規(guī)?；N植，但也存在著諸多問題，其高效優(yōu)質(zhì)綠色栽培技術(shù)有待進(jìn)一步集成與優(yōu)化;加之我國對富硒羊肚菌研究相對薄弱，還須進(jìn)一步深入研究，以其作為富硒載體，研究示范應(yīng)用富硒羊肚菌栽培控制技術(shù)，培養(yǎng)高質(zhì)量富硒產(chǎn)品，開發(fā)低成本的有機(jī)硒營養(yǎng)品已經(jīng)成為新的研究熱點問題。具體建議如下：

3.1 人工栽培方面

加強(qiáng)羊肚菌的菌種選育。深入開展羊肚菌菌種資源收集、分類、生物學(xué)性狀及其遺傳基礎(chǔ)等相關(guān)研究，明確其倍性和出菇等相關(guān)理論，采用人工馴化、人工栽培、單孢和多孢雜交等技術(shù)手段持續(xù)深入推進(jìn)羊肚菌常規(guī)育種，同時采用原生質(zhì)體育種、誘變育種等方法加強(qiáng)分子育種工作步伐，選育性狀表現(xiàn)良好、品質(zhì)優(yōu)良、產(chǎn)量高產(chǎn)的菌種適用于人工栽培。

進(jìn)一步優(yōu)化羊肚菌外源營養(yǎng)袋技術(shù)。在已有的基礎(chǔ)上進(jìn)一步完善與優(yōu)化外營養(yǎng)袋配方，向工廠化、自動化制作推進(jìn)，科學(xué)合理擺放使其更加高效發(fā)揮外源營養(yǎng)作用。

加強(qiáng)綠色羊肚菌病蟲草害綠色防控。堅持以“預(yù)防為主、綜合防治”為原則，以農(nóng)業(yè)、物理機(jī)械和生物防治為主，持續(xù)控制其有害生物發(fā)生與危害。在草害控制上采取播種前適期進(jìn)行土壤預(yù)處理或土壤封閉處理，避免除草劑殘留影響;在病蟲害控制上采用合理輪作倒茬、加石灰、曝曬、悶棚、合理灌水等措施，以及使用在綠色有機(jī)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中允許使用的生物農(nóng)藥如礦物源農(nóng)藥、植物源農(nóng)藥和微生物源農(nóng)藥等進(jìn)行防控。

繼續(xù)推進(jìn)規(guī)模化、集約化綠色人工栽培。在已有的基礎(chǔ)上，不斷集成配套不同區(qū)域不同適宜的羊肚菌規(guī)?；⒓s化人工栽培模式，形成地方農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，強(qiáng)化綠色標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)。同時要不斷加強(qiáng)技術(shù)研究與創(chuàng)新，解決制約羊肚菌工廠自動化栽培關(guān)鍵技術(shù)，以點帶面，點面結(jié)合，不斷推進(jìn)羊肚菌栽培設(shè)施化、自動化、智能化、精細(xì)化和精準(zhǔn)化發(fā)展。

3.2 富硒控制方面

開展富硒羊肚菌菌種選育及營養(yǎng)有效性評價研究。考查國內(nèi)外羊肚菌不同菌種資源富硒能力的差異，通過馴化選育、遺傳改良、分子育種等手段選育富集硒能力較強(qiáng)的新菌種，用分子標(biāo)記技術(shù)對高硒新菌種進(jìn)行遺傳多樣性分析，為培育附加值高的羊肚菌高硒新菌種提供優(yōu)質(zhì)的菌種資源。

開展羊肚菌產(chǎn)品富硒吸收特征研究。分析羊肚菌無害化生產(chǎn)體系下，富硒土壤和缺硒土壤對內(nèi)源土壤硒和外源添加硒的吸收特性，包括硒形態(tài)以及定量吸收特征，為富硒土壤和硒肥施用提供技術(shù)參數(shù)。

開展硒肥控制性使用技術(shù)。主要針對缺硒土壤特別是我國北方地區(qū)缺硒土壤，研究通過栽培措施以及硒肥控制性施用等調(diào)節(jié)羊肚菌產(chǎn)品硒濃度，研究施用形態(tài)、施用時間、施用方式對于硒資源利用、產(chǎn)品質(zhì)量及產(chǎn)品硒濃度的影響機(jī)制和控制技術(shù)。

開展優(yōu)質(zhì)富硒保持與質(zhì)量控制關(guān)鍵技術(shù)研究與產(chǎn)品開發(fā)。對藥食用真菌富硒羊肚菌的有機(jī)硒測定、硒含量標(biāo)準(zhǔn)、產(chǎn)品質(zhì)量控制等方面進(jìn)行深入研究，形成規(guī)范化的優(yōu)質(zhì)富硒產(chǎn)品關(guān)鍵控制技術(shù)體系;加大富硒羊肚菌食品的開發(fā)，采用現(xiàn)代加工技術(shù)逐步促進(jìn)其產(chǎn)品多樣化、系列化發(fā)展，并對其富硒制品建立國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行行業(yè)規(guī)范，形成統(tǒng)一規(guī)范加以強(qiáng)化，促進(jìn)其產(chǎn)業(yè)化持續(xù)健康發(fā)展。

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