張海洋，翁晨曦，趙振宇，吳東霖，劉濤，馮國(guó)峰，馬海鹍，范宏剛

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150030)

在臨床診療過程中，動(dòng)物的麻醉方式主要以吸入和注射麻醉為主[1-2]，但對(duì)于貂、狐和貉這類經(jīng)濟(jì)動(dòng)物而言，較為實(shí)際的麻醉方式為注射麻醉[3]。近年來，隨著經(jīng)濟(jì)動(dòng)物人工飼養(yǎng)量不斷增加，相應(yīng)的臨床診療、電采精及長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)裙ぷ饕仓饾u增多，其中多數(shù)現(xiàn)場(chǎng)操作需要安全確實(shí)的麻醉保障，這不僅關(guān)系著人畜安全，還關(guān)系到動(dòng)物福利[4]?？诜樽砑夹g(shù)與其他麻醉技術(shù)相比，具有操作便捷、可不接觸動(dòng)物的情況下對(duì)其實(shí)施化學(xué)保定，有效保證麻醉人員的安全。此外，在畜禽長(zhǎng)途運(yùn)輸、繁殖育種以及野外動(dòng)物抓捕等過程中口服麻醉技術(shù)也具有明顯的優(yōu)越性。α-氯醛糖曾是一種主要用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的全身麻醉藥物，多被用于制藥企業(yè)、藥物研發(fā)機(jī)構(gòu)等貓降壓試驗(yàn)中的化學(xué)制動(dòng)。本課題組在前期試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，犬、狐和狼等動(dòng)物口服α-氯醛糖后可產(chǎn)生一定深度的鎮(zhèn)靜和全身麻醉作用，且在服藥過程中無明顯的毒副作用[5]。以此基礎(chǔ)上，本試驗(yàn)將α-氯醛糖與右美托咪定進(jìn)行復(fù)合對(duì)貂實(shí)施口服麻醉，觀察2種藥物復(fù)合后對(duì)貂的主要生理指標(biāo)和生物反射活動(dòng)的影響，以及麻醉時(shí)期、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛及肌松等作用效果，為進(jìn)一步開展麻醉安全性研究提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

選取健康成年咖啡貂10只，8～10月齡，體重1.2～1.4 kg，雄性，由黑龍江省佳木斯市某貂養(yǎng)殖基地提供。單舍規(guī)范飼養(yǎng)14 d后，仔細(xì)觀察貂無異常情況時(shí)，可進(jìn)行下一步正式試驗(yàn)研究，本課題設(shè)計(jì)和試驗(yàn)內(nèi)容均得到東北農(nóng)業(yè)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)同意并批準(zhǔn)。

1.2 麻醉藥品和配制

α-氯醛糖原粉，購(gòu)于德國(guó)Sigma公司，純度99.9%；右美托咪定標(biāo)準(zhǔn)品，購(gòu)于上海延慕實(shí)業(yè)有限公司，純度99.8%。將右美托咪定用注射用水溶解成2 mg/mL的濃度；將α-氯醛糖通過1，2丙二醇溶解成160 mg/mL的濃度。將兩者過濾滅菌，避光、低溫保存，備用。

1.3 麻醉試驗(yàn)

試驗(yàn)前對(duì)貂禁食12 h，禁水6 h，并盡量減少與試驗(yàn)無關(guān)的應(yīng)激刺激。在本課題組前期研究[5]以及預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，本研究中α-氯醛糖和右美托咪定的劑量分別定為320 mg/kg和1 mg/kg。試驗(yàn)開始時(shí)將已配制的α-氯醛糖和右美托咪定溶液分別按照320 mg/kg和1 mg/kg的劑量均勻混拌于日常半流體飼料中供貂自由采食，每貂1份，采食完畢后每間隔10 min監(jiān)測(cè)1次，一直監(jiān)測(cè)至60 min(這時(shí)個(gè)別貂有蘇醒跡象，出現(xiàn)體動(dòng)現(xiàn)象)，在麻醉的過程中還應(yīng)對(duì)貂的嘴部和四肢進(jìn)行簡(jiǎn)單確實(shí)的物理保定，防止試驗(yàn)過程中發(fā)生人畜傷害和設(shè)備損毀。主要的監(jiān)測(cè)項(xiàng)目主要包括：體溫(T)、呼吸頻率(RR)、心率(HR)和脈搏血氧飽和度(SpO2)等，除RR進(jìn)行人工測(cè)取外，其他項(xiàng)目由監(jiān)護(hù)儀器實(shí)施監(jiān)測(cè)[5]。同時(shí)監(jiān)測(cè)的項(xiàng)目還有麻醉時(shí)期(使用電子計(jì)時(shí)器)、作用效果和生物反射活動(dòng)等，具體方法見表1、2和3。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

采用Microsoft Excel 2018整理試驗(yàn)數(shù)據(jù)，并采用SPSS 23.0進(jìn)行數(shù)據(jù)的分析和處理，數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”，采用單因素分析、post Hoc Tests多重比較檢驗(yàn)LSD和S-N-K法，P<0.05為差異顯著。

表1 麻醉時(shí)期的監(jiān)測(cè)方法

表2 鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛及肌松效果評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)[5]

表3 生物反射判定標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果與分析

2.1 主要生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)

在口服藥物后貂體溫顯著降低(P<0.05或P<0.01)，監(jiān)測(cè)結(jié)束時(shí)體溫降至最低值，與采食前比較下降了1.4 ℃；貂采食完畢后呼吸頻率逐漸降低，在采食完畢后50 min時(shí)降至最低(P<0.05)，與采食前比較降低了18.7%，之后逐漸恢復(fù)；采食后心率的變化趨勢(shì)與呼吸頻率相似，最低值也是出現(xiàn)于采食完畢后50 min(P<0.05)，與采食后10 min比較降低了24.6%，之后逐漸恢復(fù)；脈搏血氧飽和度呈現(xiàn)先降低后升高的變化趨勢(shì)，最低值(95%)出現(xiàn)在采食完畢后30 min，具體結(jié)果見表4。

表4 麻醉作用效果的監(jiān)測(cè)結(jié)果(n=10)

2.2 麻醉時(shí)期的監(jiān)測(cè)

貂在口服藥物后均表現(xiàn)出活動(dòng)減少、反應(yīng)遲鈍、行動(dòng)遲緩，隨后共濟(jì)失調(diào)的現(xiàn)象較為明顯，之后無法保持站立狀態(tài)，趴臥在地，翻正反射消失，在誘導(dǎo)過程中流涎、嘔吐且無異常興奮現(xiàn)象，誘導(dǎo)期最短時(shí)間為5.6 min，平均為(9.1±2.0)min。在麻醉維持期間，貂表現(xiàn)為意識(shí)消失、可平穩(wěn)仰臥、全身松弛等現(xiàn)象，維持時(shí)間最短為67.9 min，最長(zhǎng)為79.4 min，平均為(71.7±4.1)min。蘇醒期較為平穩(wěn)，在蘇醒期未出現(xiàn)復(fù)睡及其他神經(jīng)系統(tǒng)異常現(xiàn)象，平均蘇醒時(shí)間為(38.2±4.5)min。對(duì)監(jiān)測(cè)結(jié)果綜合分析發(fā)現(xiàn)，該復(fù)合口服麻醉方式誘導(dǎo)迅速，維持時(shí)間適宜，蘇醒較為平穩(wěn)。具體結(jié)果見表5。

表5 麻醉時(shí)間監(jiān)測(cè)結(jié)果(n=10) min

2.3 麻醉作用效果的監(jiān)測(cè)

試驗(yàn)結(jié)果表明(見表6)，貂口服藥物10 min后鎮(zhèn)靜和肌松效果較為良好，而鎮(zhèn)痛效果也在20 min時(shí)進(jìn)入良好狀態(tài)，之后這種良好且均衡的麻醉效果持續(xù)約30 min。之后，鎮(zhèn)靜、肌松和鎮(zhèn)痛效果均開始減弱，其中鎮(zhèn)痛效果消失的較為迅速。

2.4 對(duì)生物反射活動(dòng)的監(jiān)測(cè)

采食后10 min時(shí)，50%的貂角膜和眼瞼反射出現(xiàn)遲鈍的現(xiàn)象，90%的貂肛門反射反應(yīng)遲鈍，在20～50 min時(shí)間段，從整體上看3種生物反射受到了明顯的抑制作用，產(chǎn)生的麻醉深度較為適宜，從60 min開始這3種生物反射開始出現(xiàn)不同程度恢復(fù)，相對(duì)而言，角膜反射恢復(fù)情況更為明顯。具體試驗(yàn)結(jié)果見表7。

表6 麻醉作用效果的評(píng)分(n=10)

表7 生物反射活動(dòng)的監(jiān)測(cè)結(jié)果(n=10) 只

3 討論

3.1 口服麻醉對(duì)貂常規(guī)生理指標(biāo)的影響

對(duì)麻醉藥物影響生理功能方面的監(jiān)測(cè)，可以很好地反映藥物的安全性[3]。如果在麻醉過程中不及時(shí)糾正生理指標(biāo)的異常變化，可導(dǎo)致圍麻期出現(xiàn)明顯麻醉并發(fā)癥，甚至可導(dǎo)致麻醉失敗，動(dòng)物死亡。在本次試驗(yàn)中呼吸頻率和心率出現(xiàn)了顯著變化，主要與右美托咪定藥效作用密切相關(guān)，該藥具有明顯的鎮(zhèn)靜和阻滯交感神經(jīng)的作用，這也在前期預(yù)試驗(yàn)及其他動(dòng)物麻醉試驗(yàn)中也得到了證實(shí)，呼吸頻率和心率受到抑制程度與該藥使用劑量密切相關(guān)[6-10]。體溫在麻醉過程中也出現(xiàn)了明顯的降低，因此建議在麻醉過程中應(yīng)及時(shí)采取保溫措施，防止術(shù)后出現(xiàn)寒戰(zhàn)[3]。

3.2 口服麻醉對(duì)貂麻醉時(shí)期的影響

麻醉時(shí)期主要記錄麻醉的誘導(dǎo)、維持和蘇醒等不同階段的時(shí)長(zhǎng)。全麻誘導(dǎo)期對(duì)于診療前暴躁、易應(yīng)激飼養(yǎng)動(dòng)物以及野生動(dòng)物較為重要，保持該期平穩(wěn)決定后續(xù)的麻醉是否能順利進(jìn)行[11]，另外在野外抓捕動(dòng)物時(shí)要求誘導(dǎo)期越短越好。全麻維持期的長(zhǎng)短則關(guān)系著診療的內(nèi)容，也是調(diào)整藥物使用劑量重要的參考指標(biāo)。蘇醒期的長(zhǎng)短可以指導(dǎo)麻醉監(jiān)護(hù)工作的進(jìn)度。在本次研究中發(fā)現(xiàn)該口服麻醉方式誘導(dǎo)迅速，未出現(xiàn)明顯的并發(fā)癥；維持時(shí)間適宜，對(duì)于貂臨床診療麻醉而言，時(shí)間較為充裕；蘇醒較為平穩(wěn)，這有助于診療后的護(hù)理工作。

3.3 口服麻醉對(duì)貂麻醉作用效果的影響

監(jiān)測(cè)麻醉狀態(tài)下的鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和肌松效果是評(píng)價(jià)麻醉藥物或方法是否適合臨床應(yīng)用的重要指標(biāo)，特別關(guān)系著貂外科診療和開展傷害性試驗(yàn)的內(nèi)容和范圍，并保證這些外科診療及試驗(yàn)過程中人畜安全。α-氯醛糖可明顯增強(qiáng)γ-氨基丁酸(GABA)A型受體對(duì)GABA的親和力，相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)其本身也可激活該受體[3]，因此α-氯醛糖具有較為確實(shí)的麻醉效應(yīng)；而右美托咪定具有鎮(zhèn)靜、肌松和鎮(zhèn)痛效果，被使用于多種動(dòng)物復(fù)合麻醉的臨床研究中，該藥有很強(qiáng)的表面穿透能力，可通過皮膚和黏膜發(fā)揮麻醉效應(yīng)[12]。將2種藥物進(jìn)行復(fù)合使用，不僅是為了降低兩藥的毒副作用，但更主要的目的還是為了達(dá)到平衡麻醉效果。本次試驗(yàn)中觀察到在口服這2種藥物后20～50 min，鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和肌松效果較為確實(shí)均衡，綜合麻醉效果較為良好。另外，結(jié)合對(duì)常規(guī)生理指標(biāo)的監(jiān)測(cè)結(jié)果分析發(fā)現(xiàn)，兩藥復(fù)合后對(duì)機(jī)體造成的影響是短暫可耐受的，這些均體現(xiàn)出復(fù)合麻醉的優(yōu)勢(shì)。

3.4 口服麻醉對(duì)貂生物反射活動(dòng)的影響

眼瞼、角膜和肛門等生物反射活動(dòng)是判定麻醉深度的重要方面，此方面的監(jiān)測(cè)的優(yōu)勢(shì)在于便捷、實(shí)用、無創(chuàng)和準(zhǔn)確，常被用于全麻監(jiān)測(cè)過程中[3,13]。在本次麻醉過程中這3種生物反射始終存在，表明未出現(xiàn)麻醉過深的現(xiàn)象，其中在20～50 min 3種生物反射受到了明顯的抑制作用，產(chǎn)生的麻醉深度較為適宜，將此部分監(jiān)測(cè)結(jié)果與鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和肌松作用效果結(jié)合進(jìn)行分析，可進(jìn)一步證實(shí)這種口服麻醉方式可產(chǎn)生30 min深度適宜、作用均衡的良好麻醉時(shí)間。

4 結(jié)論

將α-氯醛糖和右美托咪定進(jìn)行復(fù)合使用，可以達(dá)到平衡麻醉的效果。使用320 mg/kg α-氯醛糖聯(lián)合1 mg/kg右美托咪定對(duì)貂進(jìn)行口服麻醉，麻醉誘導(dǎo)迅速，可產(chǎn)生30 min深度適宜、作用均衡的良好麻醉效果，且蘇醒較為迅速、平穩(wěn)，但在麻醉過程中出現(xiàn)了體溫降低的情況，因此建議在麻醉過程中應(yīng)及時(shí)采取保溫措施，防止術(shù)后體溫過低。