張素娥，何金花，李 娜，高麗娟，馬紅敏，鄭 韜

石家莊市第二醫(yī)院：1.神經(jīng)內(nèi)二科；2.內(nèi)分泌科，河北石家莊 050051；3.河北省人民醫(yī)院肝膽外科，河北石家莊 050051；4.石家莊辛集鑫苑中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院內(nèi)科，河北石家莊 050051

腦卒中是臨床上較常見的一種腦血管疾病，該病多發(fā)生于中老年人群，且已成為造成該人群死亡的首要原因，嚴(yán)重威脅患者的生活質(zhì)量[1-2]。有研究顯示，糖尿病是腦卒中的危險(xiǎn)因素之一[3]。腦卒中合并糖尿病可造成患者水腫加重、梗死灶擴(kuò)大，極大地增加了治療的難度，且患者雖進(jìn)行有效治療，但預(yù)后不佳[4]。肥胖抑制素(Obestatin)是近年來(lái)在血液循環(huán)中發(fā)現(xiàn)的一種活性多肽，研究發(fā)現(xiàn)Obestatin具有降低胰島素抵抗、刺激胰島素分泌等多重生物學(xué)作用[5]。攝食抑制因子1(nesfatin-1)是一種多效能細(xì)胞因子，在調(diào)節(jié)能量代謝、糖脂代謝、減輕體質(zhì)量等方面發(fā)揮重要作用[6]。然而，目前血清Obestatin和nesfatin-1的表達(dá)水平與腦卒中合并糖尿病的發(fā)病機(jī)制及其與患者認(rèn)知功能的關(guān)系尚不完全清楚?；诖耍狙芯繑M通過檢測(cè)腦卒中合并糖尿病患者血清Obestatin和nesfatin-1的表達(dá)情況，探討其水平與腦卒中合并糖尿病患者認(rèn)知功能的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年11月至2020年5月在石家莊市第二醫(yī)院確診的腦卒中患者100例為研究對(duì)象，并根據(jù)是否合并糖尿病分為糖尿病組和非糖尿病組。糖尿病組43例，其中男25例、女18例，年齡35～65歲。非糖尿病組57例，其中男35例、女22例，年齡36～67歲。糖尿病組和非糖尿病組的性別構(gòu)成、平均年齡、體質(zhì)量指數(shù)(BMI)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平、高脂血癥和高血壓患者比例之間比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；糖尿病組總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)水平顯著高于非糖尿病組(P<0.05)。見表1。

糖尿病組患者納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)確診為腦卒中，并符合《中國(guó)2型糖尿病防治指南(2017年版)》中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]；(2)患者及家屬選擇在本院接受治療；(3)臨床資料齊全者。非糖尿病組患者納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《中國(guó)各類主要腦血管病診斷要點(diǎn)2019》中有關(guān)腦卒中的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[8]；(2)患者及家屬選擇在本院接受治療者；(3)臨床資料齊全者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)同時(shí)患有心、腎等臟器功能不全者；(2)同時(shí)患有嚴(yán)重內(nèi)分泌疾病者；(3)同時(shí)患有其他系統(tǒng)性疾病者。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過，所有標(biāo)本采集均取得患者及家屬知情并簽署同意書。

1.2試劑與儀器 Obestatin和nesfatin-1酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)試劑盒均購(gòu)自上海通蔚生物科技有限公司(批號(hào)YB-K2807、YB-K2705)；TGL20M型離心機(jī)購(gòu)自湖南凱達(dá)科學(xué)儀器設(shè)備有限公司；7180型全自動(dòng)生化分析儀購(gòu)自日本日立公司；本研究中其他化學(xué)藥品均購(gòu)自北京甘棠飛華生物科技有限公司。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集及保存 于清晨抽取所有受試者空腹?fàn)顩r下的靜脈血5 mL，3 000 r/min(4 ℃)離心10 min分層后收集上層血清，置于-80 ℃冰箱中保存待測(cè)。

1.3.2血清Obestatin、nesfatin-1水平的檢測(cè) 采用ELISA法檢測(cè)各組研究對(duì)象血清Obestatin、nesfatin-1水平。嚴(yán)格按照各試劑盒使用說(shuō)明書進(jìn)行測(cè)定，其具體操作步驟如下：將已配制好的100 μL標(biāo)準(zhǔn)樣品分別加入標(biāo)準(zhǔn)孔和空白孔中，37 ℃溫育30 min后洗滌。然后將酶標(biāo)板內(nèi)液體棄去，拍干后向其中加入酶標(biāo)試劑，在37 ℃溫育30 min，洗滌后加入顯色劑并混合均勻，使其進(jìn)行顯色。最后加入終止液，并測(cè)定其吸光度。

1.3.3生化指標(biāo)檢測(cè) 取出待測(cè)血清，在實(shí)驗(yàn)室用全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定TC、TG、HDL-C、LDL-C。

表1 兩組一般資料的比較

組別nTC(mmol/L,x±s)TG(mmol/L,x±s)LDL-C(mmol/L,x±s)HDL-C(mmol/L,x±s)糖尿病組435.23±1.153.67±1.543.02±0.561.28±0.25非糖尿病組574.51±0.802.35±1.292.81±0.511.36±0.18t/χ23.6914.6591.9541.861P<0.001<0.0010.0540.066

1.4認(rèn)知功能評(píng)定 采用蒙特利爾認(rèn)知評(píng)估量表(MoCA)對(duì)受試者進(jìn)行評(píng)價(jià)[9]。所有研究對(duì)象入院后由經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)的神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師對(duì)其進(jìn)行問卷調(diào)查，該量表主要包括命名、視空間及執(zhí)行能力、注意力、記憶、定向力、抽象、語(yǔ)言、延遲回憶8個(gè)維度，總分為30分，<26分為認(rèn)知功能障礙，≥26分為正常，分?jǐn)?shù)越高表示患者認(rèn)知功能越好。

2 結(jié) 果

2.1各組血清Obestatin、nesfatin-1水平比較 糖尿病組血清Obestatin水平顯著低于非糖尿病組(P<0.05)；血清nesfatin-1水平顯著高于非糖尿病組(P<0.05)；MoCA評(píng)分顯著低于非糖尿病組(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血清Obestatin、nesfatin-1水平的比較

2.2不同血清Obestatin、nesfatin-1水平患者認(rèn)知功能的比較 分別以血清Obestatin、nesfatin-1的平均值(30.83 ng/L、6.89 mg/mL)將腦卒中合并糖尿病患者分組，其中高Obestatin組19例，低Obestatin組24例；高nesfatin-1組23例，低nesfatin-1組 20例。高Obestatin組患者M(jìn)oCA評(píng)分顯著高于低Obestatin組(P<0.05)；高nesfatin-1組患者M(jìn)oCA評(píng)分顯著低于低nesfatin-1組(P<0.05)。見表3。

表3 各組患者認(rèn)知功能的比較(分，

2.3血清Obestatin、nesfatin-1與MoCA評(píng)分的相關(guān)性 Spearman相關(guān)分析結(jié)果顯示，腦卒中合并糖尿病患者血清Obestatin水平與MoCA評(píng)分呈正相關(guān)，nesfatin-1水平與MoCA評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(r=0.599，r=-0.358，P<0.05)。

2.4腦卒中合并糖尿病患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的影響因素分析 以腦卒中合并糖尿病患者是否發(fā)生認(rèn)知功能障礙為因變量(0=否，1=是)，血清Obestatin、nesfatin-1及TC、TG水平為自變量，采用多因素Logistic回歸進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，血清Obestatin低表達(dá)、nesfatin-1高表達(dá)均是影響腦卒中合并糖尿病患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表4。

表4 腦卒中合并糖尿病患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的危險(xiǎn)因素分析

3 討 論

腦卒中是由腦血管病變或大腦內(nèi)血液循環(huán)出現(xiàn)障礙所致的一種慢性疾病，糖尿病是腦卒中發(fā)病的重要影響因素，研究顯示，糖尿病患者腦卒中發(fā)病率是非糖尿病患者的2～5倍[10]。腦卒中合并糖尿病的主要臨床表現(xiàn)為偏癱、癡呆等，且患者認(rèn)知功能障礙發(fā)生率較高，若未得到及時(shí)有效的治療，對(duì)患者的康復(fù)造成極大影響[11-12]。流行病學(xué)研究顯示，隨著中國(guó)人口老齡化速度的加快，近年來(lái)腦卒中合并糖尿病的發(fā)病率呈逐年升高趨勢(shì)，嚴(yán)重影響患者的生命健康安全[13]。因此，尋找新的疾病標(biāo)志物并研究其對(duì)患者認(rèn)知功能的影響具有重要的臨床意義。

Obestatin是一種由23個(gè)氨基酸組成的多肽，該物質(zhì)主要是由Ghrelin基因經(jīng)翻譯及修飾后產(chǎn)生[13]。相關(guān)研究顯示，Obestatin的功能廣泛，在全身各個(gè)系統(tǒng)中均可發(fā)揮作用，具有促進(jìn)脂肪細(xì)胞分化、抑制食物攝取、抗炎等作用，并對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)具有重要影響[14]。有研究顯示，Obestatin與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。王鍵等[15]研究發(fā)現(xiàn)，Obestatin在老年糖尿病胃輕癱患者血清中表達(dá)水平升高，且與胃排空的時(shí)間密切相關(guān)，其表達(dá)水平可作為評(píng)估老年糖尿病胃輕癱患者病情嚴(yán)重程度的臨床指標(biāo)。TOOSI等[16]研究發(fā)現(xiàn)，使用Obestatin可改善因酒精引起的后代空間記憶障礙，調(diào)節(jié)神經(jīng)炎性反應(yīng)，增加谷胱甘肽和總超氧化物歧化酶活性，保護(hù)神經(jīng)功能等作用。本研究結(jié)果顯示，糖尿病組血清Obestatin水平顯著低于非糖尿病組(P<0.05)，提示血清Obestatin可能參與腦卒中合并糖尿病的發(fā)展進(jìn)程。

nesfatin-1是一種分泌性多肽，主要來(lái)源于核組蛋白2，該物質(zhì)廣泛存在于腦干、下丘腦及脊髓的神經(jīng)核團(tuán)中，在能量代謝及攝食等方面具有重要作用[17-18]。有研究顯示，nesfatin-1與多種疾病的發(fā)生及發(fā)展有關(guān)。徐海波等[19]研究發(fā)現(xiàn)，nesfatin-1在新診斷的2型糖尿病患者血清中表達(dá)水平升高，并可通過胰島素信號(hào)通路影響糖脂代謝，進(jìn)而參與該疾病的病理過程。石杰等[20]研究發(fā)現(xiàn)，腦卒中患者血漿nesfatin-1水平及神經(jīng)功能缺損程度與其抑郁程度密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，糖尿病組血清nesfatin-1水平顯著高于非糖尿病組(P<0.05)，提示血清nesfatin-1可能參與腦卒中合并糖尿病的發(fā)展進(jìn)程。進(jìn)一步分析顯示，糖尿病組MoCA評(píng)分顯著低于非糖尿病組(P<0.05)，且腦卒中合并糖尿病患者血清Obestatin水平與MoCA評(píng)分呈正相關(guān)(P<0.05)，nesfatin-1水平與MoCA評(píng)分呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。糖尿病患者機(jī)體內(nèi)各生化指標(biāo)常伴有異常，且其水平變化與患者病情有關(guān)。因此檢測(cè)腦卒中合并糖尿病患者LDL-C、HDL-C、TC、TG水平具有重要意義。本研究結(jié)果顯示，糖尿病組TC、TG水平顯著高于非糖尿病組(P<0.05)，提示TC、TG水平異常與腦卒中合并糖尿病有關(guān)。本研究還發(fā)現(xiàn)，高Obestatin組患者M(jìn)oCA評(píng)分顯著高于低Obestatin組(P<0.05)，高nesfatin-1組患者M(jìn)oCA評(píng)分顯著低于低nesfatin-1組(P<0.05)，提示血清Obestatin、nesfatin-1水平與腦卒中合并糖尿病患者認(rèn)知功能密切相關(guān)。上述分析顯示，Obestatin、nesfatin-1及TC、TG水平與腦卒中合并糖尿病密切相關(guān)，多因素Logistic回歸分析結(jié)果顯示，血清Obestatin低表達(dá)、nesfatin-1高表達(dá)均是影響腦卒中合并糖尿病患者發(fā)生認(rèn)知功能障礙的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示監(jiān)測(cè)兩者表達(dá)水平，對(duì)評(píng)估腦卒中合并糖尿病患者認(rèn)知功能有一定的臨床價(jià)值。

綜上所述，Obestatin水平在腦卒中合并糖尿病患者中明顯降低，nesfatin-1水平明顯升高，兩者參與腦卒中合并糖尿病的發(fā)生及發(fā)展，且其表達(dá)情況與患者認(rèn)知功能密切相關(guān)，提示血清Obestatin和nesfatin-1可用于腦卒中合并糖尿病患者病情的評(píng)估，但其具體的作用機(jī)制還有待深入研究。