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        血清miR-21、miR-200a水平變化與卵巢癌發(fā)生發(fā)展的關系

        2021-04-28 00:34:04張麗靜薛惠英
        實用癌癥雜志 2021年4期
        關鍵詞:血清影響

        張麗靜 薛惠英 胡 捷

        隨著篩查方式的改進,卵巢癌在部分人群中的檢出率呈現(xiàn)出了明顯的上升表現(xiàn)[1]。在卵巢癌發(fā)病機制的研究中,我們發(fā)現(xiàn)微小RNA水平的變化對卵巢癌細胞的轉(zhuǎn)錄有影響,同時在促進癌細胞生物學特征的惡化等方面發(fā)揮作用。微小RNA21(miR-21)的上升可通過增加轉(zhuǎn)錄啟動子的激活,促進腫瘤細胞的持續(xù)自我增殖[2];miR-21通過影響信號通路激活腫瘤細胞,最終促進不同效應因子的激活,加劇腫瘤細胞的持續(xù)性異常分裂[3]。有部分研究者探討了微小RNA在卵巢癌患者中的表達情況,認為微小RNA的表達在卵巢癌的發(fā)生或者增殖調(diào)控方面發(fā)揮作用[4],但缺乏對于miR-21、miR-200a的分析探討。為了揭示卵巢癌患者中miR-21、miR-200a的表達情況,進一步揭示卵巢癌的發(fā)病機制,本次研究選取我科收集的90例上皮性卵巢癌患者,分析miR-21、miR-200a的表達及其卵巢癌臨床病理特征的關系。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        選取我院2016年5月至2019年9月收集的90例上皮性卵巢癌患者為病例組,同期健康體檢婦女90例為對照組。診斷及入選標準:①卵巢癌診斷依據(jù)《卵巢惡性腫瘤診斷與治療指南(第四版)》中的標準[5];②本研究納入的卵巢癌患者在獲取血清標本前,患者無放化療史;③對照組為我院體檢中心結果為健康的志愿者;④本研究設計患者個人資料注意保密,研究方法不違背相關倫理學要求。排除標準:①其他部位惡性腫瘤患者;②未經(jīng)病理學檢查證實;③既往具有放化療病史;④基礎資料不完整,難以進行統(tǒng)計學分析。病例組,年齡35~70歲,平均(54.2±11.8)歲;分化程度:高分化22例、中分化37例、低分化31例;臨床分期:Ⅰ期22例、Ⅱ期35例、Ⅲ期26例、Ⅳ期7例;淋巴結轉(zhuǎn)移陽性47例;病理學類型:漿液性囊腺癌63例、其他類型27例;病灶最大徑≥5 cm 43例、<5 cm 47例。對照組,年齡33~69歲,平均(52.4±12.2)歲。2組婦女的年齡比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

        1.2 實時熒光定量PCR技術

        采集檢查者的肘部靜脈血3 ml,3 000 r/min離心20 min,收集上層清液,RNA的提取采用北京奧維亞生物公司生產(chǎn)的試劑盒進行,逆轉(zhuǎn)錄成cRNA后進行基因擴增,通過primer 5軟件進行檢測基因的合成和引物設計,取GADPH作為內(nèi)參,miR-21引物5’-CAAGGACCAACTACAACC-3’:下游5’-TGCCTCTTCTTTAATTG-3’,miR-200a引物F:AGGTCGGTGTGAACGGATTTG R:GGGGTCGTTGATGGCAACA,經(jīng)歷45個循環(huán)后進行曲線溶解,每個孔設置3個復孔,取平均值。Bio-Rad iQ5實時熒光定量PCR儀購自美國伯樂公司。

        1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法

        2 結果

        2.1 2組的血清中miR-21、miR-200a檢測結果對比

        對比2組血清中miR-21、miR-200a檢測結果,病例組高于對照組,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);見表1。

        表1 病例組和對照組的血清中miR-21、miR-200a表達水平比較

        2.2 卵巢癌患者血清中miR-21表達水平與病理學特征的關系

        miR-21表達水平在不同臨床分期、不同病理學分化程度、是否發(fā)生淋巴結轉(zhuǎn)移的卵巢癌患者血清中的檢測結果對比,差異均無統(tǒng)計學意義(P<0.05);見表2。

        表2 卵巢癌患者血清中miR-21表達水平與病理學特征的關系

        2.3 卵巢癌患者血清中miR-200a表達水平與病理學特征的關系

        如表2所示,卵巢癌患者的血清中miR-200a表達水平在不同組織學分化程度的患者中比較,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

        3 討論

        在長期不規(guī)則排卵、推遲絕經(jīng)或者合并有其他性激素受體敏感性改變的群體中,卵巢癌的整體發(fā)生風險可顯著上升[6],特別是在合并有相關家族史或者多囊卵巢綜合征的患者中,卵巢癌的發(fā)病率或者致殘風險可持續(xù)上升[7]。流行病學的隨訪分析發(fā)現(xiàn),卵巢癌患者總體生存時間往往不超過38個月,其遠期復發(fā)率或者遠處轉(zhuǎn)移的風險可超過35%以上[8]。對于卵巢癌整體臨床病理特征的病情評估,腫瘤相關調(diào)控因子的變化可能起一定作用。雖然現(xiàn)階段臨床上已有的指標如CA125或者CA199等,能夠在卵巢癌的隨訪或者預后評估過程中發(fā)揮參考價值,但CA125等指標評估卵巢癌臨床病理特征的符合率較低,其對于卵巢癌患者病情評估的滿意度較低[9]。本研究探討了卵巢癌患者血清中miR-21、miR-200a的表達,不僅可以部分揭示卵巢癌的發(fā)病機制,而且可以為評價卵巢癌的臨床病理特征提供參考。

        miR-21是癌細胞增殖調(diào)控因子,其能夠通過影響到癌細胞上游轉(zhuǎn)錄修飾因子的激活程度,最終促進癌細胞核DNA的分裂。miR-21對于轉(zhuǎn)錄閱讀開放區(qū)域的調(diào)控,能夠影響到癌基因的轉(zhuǎn)錄翻譯程度,最終影響到癌細胞的生物學特征[10];miR-200a是癌細胞內(nèi)腫瘤蛋白的調(diào)控因子,腫瘤細胞中腫瘤受體的結合調(diào)節(jié)可能影響腫瘤信號通路的激活,影響到癌細胞的浸潤和粘附能力。分子生物學方面的研究還顯示,miR-200a還能夠在腫瘤干細胞特性的維持或者腫瘤微環(huán)境的改變方面發(fā)揮作用,從而干預到腫瘤細胞的發(fā)生過程[9,11-12]。

        本研究分析卵巢癌患者血清中miR-21、miR-200a的表達,發(fā)現(xiàn)在卵巢癌患者血清中miR-21、miR-200a的表達明顯高于對照組,提示miR-21和miR-200a的高表達可能影響卵巢癌的發(fā)生。這主要與miR-21有關,而蛋白在調(diào)節(jié)腫瘤信號通路中的表達影響腫瘤細胞的能力和細胞死亡,從而影響到卵泡上皮細胞的異常分裂的風險。一部分研究者也認為,在發(fā)生了明顯腹腔內(nèi)轉(zhuǎn)移的患者中,miR-21的表達水平可隨著卵巢癌患者的整體病情進展而顯著上升,在5年內(nèi)病死率較高或者生存時間較短的患者中,miR-21的表達水平明顯上升[13-14]。在研究miR-21、miR-200a的表達與卵巢癌臨床病理特征的關系過程中,發(fā)現(xiàn)miR-21的表達與卵巢癌患者的臨床病理特征具有顯著的聯(lián)系,在臨床分期較晚、發(fā)生了明顯的淋巴結轉(zhuǎn)移或者卵巢癌細胞組織學分級較差的患者中,miR-21的表達水平較高,這主要是由于miR-21的表達上升,能夠在影響到癌細胞干細胞特性方面發(fā)揮作用,進而促進癌細胞浸潤范圍的增加,提高了臨床分期;miR-21對于癌細胞排列極性的影響,對于癌細胞形態(tài)學的改變,能夠最終促進組織學分級的惡化。而miR-200a在組織學分級較差的卵巢癌患者中,其表達濃度同樣的上升,miR-200a的表達對于卵巢癌組織學分級的影響,主要與其對于卵巢上皮細胞分化成熟誘導因子的表達調(diào)控有關,但并未發(fā)現(xiàn)miR-200a在不同臨床分期或者淋巴結轉(zhuǎn)移患者中的差異表達,提示miR-200a并不會影響到癌細胞粘附淋巴結組織的能力,并不會影響到卵巢癌細胞的病理學來源類型。

        綜上所述,卵巢癌患者的血清miR-21、miR-200a水平表達顯著升高,其在組織學分級較差等的卵巢癌患者中表達可顯著上升。至于miR-21、miR-200a的表達能否影響到卵巢癌患者的臨床預后,或者miR-21、miR-200a的具體診斷學參考意義仍然需要進一步探討。

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