吳慧

1.山東衛(wèi)康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)有限公司，淄博市精準(zhǔn)基因檢測(cè)關(guān)鍵技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，山東淄博 255000；2.山東省遺傳性疾病基因檢測(cè)技術(shù)應(yīng)用示范中心，山東濟(jì)南 250000

乳腺癌是女性常見并發(fā)癥，我國每年約有超過200萬新增乳腺癌患者。 目前該病的治療方法包括手術(shù)、化療、放療、內(nèi)分泌治療以及分子靶向治療等，早期乳腺癌患者可通過根治術(shù)治愈， 但是由于早期乳腺癌無特異性癥狀，因此很多患者在確診時(shí)已經(jīng)發(fā)展為中晚期，錯(cuò)過最佳手術(shù)時(shí)間，因此多采取以手術(shù)+化療為主的治療方案[1]。 但是患者在治療中所表現(xiàn)出的療效有個(gè)體差異，因此需要科學(xué)評(píng)估患者的化療效果，從而為后續(xù)治療方案確定提供有效依據(jù)。 循環(huán)腫瘤細(xì)胞常見于多種惡性腫瘤患者， 在健康人群和其他疾病患者中的水平較低。 有研究指出[2]，循環(huán)腫瘤細(xì)胞在乳腺癌臨床診斷、治療及預(yù)后評(píng)估中具有較好的應(yīng)用價(jià)值。 因此，該文方便選取2017 年1 月—2019 年2 月374 例乳腺癌患者，針對(duì)循環(huán)腫瘤細(xì)胞在乳腺癌患者預(yù)后判斷中的應(yīng)用價(jià)值展開分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取374 例乳腺癌患者，年齡為28～72 歲，平均為（50.4±5.1）歲，所有患者經(jīng)病理組織活檢確診為乳腺癌，TNM 分期為：Ⅱa 期 34 例、Ⅱb 期 152 例、Ⅲa 期132 例、Ⅲb 期 64 例。 納入標(biāo)準(zhǔn)：無其他惡性腫瘤及轉(zhuǎn)移灶、血尿常規(guī)檢查正常、肝腎功能正常。 排除標(biāo)準(zhǔn)：合并凝血障礙、急慢性炎癥、自體免疫性疾病。 該次研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)， 所有患者均對(duì)該次研究知情并簽署同意書，并經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

所有患者化療方案選擇FEC 方案，用藥方法為：第1 天和第 8 天靜脈滴注 5-Fu（國藥準(zhǔn)字 H33022622），計(jì)量為500 mg/m2；第1 天靜脈滴注吡柔比星（國藥準(zhǔn)字H10930105），劑量為 50 mg/m2；第 1 天和第 8 天靜脈滴注環(huán)磷酰胺（國藥準(zhǔn)字H20084627），計(jì)量為500 mg/m2。3 周為1 個(gè)療程，連續(xù)治療3 個(gè)療程后進(jìn)行療效評(píng)價(jià)。

循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)方法： 患者清晨空腹采取7.5 mL肘靜脈血并放置于EDTA 試管備用。 使用PBS 緩沖液稀釋后將靜脈血裝入聚蔗糖泛影葡胺細(xì)胞分層液試管，以3 500 r/min 離心處理25 min，吸附血沉層，然后加入5 mLPBS 緩沖液，然后以2 500 r/min 離心處理6 min，分離上清液， 再加入0.5 mLPBS 緩沖液和1 mL 固定液，標(biāo)記后放入4℃冰箱冷藏30 min，以2 300 r/min 離心處理3 min，取上清液加入4 mL 重懸細(xì)胞PBS 液，然后以2 300 r/min 離心處理3 min。 血液樣本加入70 μL血清PBS 液，然后加入10 μLFcR 封閉，之后加入CD45和CK18 抗體。 最后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)患者的臨床療效， 同時(shí)比較不同化療效果患者化療前后CTCs 計(jì)數(shù)的差異，并采用Spermans 相關(guān)分析法分析CTCs 與乳腺癌化療效果的相關(guān)性。 該次研究臨床療效參照WHO 關(guān)于實(shí)體瘤判斷標(biāo)準(zhǔn)，分為完全緩解：病灶完全消失；部分緩解：腫瘤直徑縮小超過30%；疾病穩(wěn)定：腫瘤直徑縮小程度＜30%；疾病進(jìn)展：腫瘤直徑增大＞20%后出現(xiàn)新發(fā)病灶。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 16.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件予以數(shù)據(jù)處理，計(jì)量資料以（）表示，行t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和百分比(%)表示，行 χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 乳腺癌患者的臨床療效

該次研究中374 例患者中經(jīng)規(guī)范治療后， 完全緩解105 例，部分緩解141 例，病情穩(wěn)定68 例，病情進(jìn)展60 例，見表 1。

表1 374 例乳腺癌患者的化療結(jié)局

2.2 不同結(jié)局乳腺癌患者化療前后CTCs 計(jì)數(shù)變化

完全緩解與部分緩解患者化療前后的CTCs 計(jì)數(shù)相比病情穩(wěn)定和病情進(jìn)展患者明顯更低， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表 2。

表2 不同結(jié)局乳腺癌患者化療前后CTCs 計(jì)數(shù)變化[()，個(gè)]

表2 不同結(jié)局乳腺癌患者化療前后CTCs 計(jì)數(shù)變化[()，個(gè)]

化療結(jié)局 化療前 化療后t 值 P 值完全緩解部分緩解病情穩(wěn)定病情進(jìn)展6.5±0.6 7.1±0.8 11.8±2.1 12.1±2.3 1.2±0.2 2.0±0.4 4.6±1.1 5.6±1.4 6.652 5.263 5.165 5.024 0.046 0.042 0.041 0.040

2.3 相關(guān)性分析

通過Spermans 相關(guān)分析法分析，CTCs 計(jì)數(shù)與乳腺癌患者化療效果呈正相關(guān)性（r=0.426，P＜0.05）。

3 討論

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤， 對(duì)女性患者的生活質(zhì)量與生命安全造成了較大的威脅。 根據(jù)我國衛(wèi)生部門統(tǒng)計(jì)報(bào)告指出， 乳腺癌是我國女性惡性腫瘤中發(fā)生率最高的癌癥，尤其是上海北京等一線城市，呈持續(xù)增長的趨勢(shì)。 乳腺癌是一種激素依賴性惡性腫瘤，與生物因素、遺傳因素以及理化因素有密切的相關(guān)性，雖然目前仍未明確該病的發(fā)生機(jī)制，但是多數(shù)學(xué)者認(rèn)為[3]多種癌癥基因和細(xì)胞因子參與該病的發(fā)生和進(jìn)展。 雖然該病的發(fā)生率不斷升高，但是隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，該病的病死率也不斷下降，除了早期診斷和治療外，外科手術(shù)聯(lián)合放化療的綜合治療方案提高了患者的臨床療效[4]。 早期乳腺癌患者可以實(shí)施根治術(shù)，但對(duì)于中晚期患者主要是采取化療為主的治療方案。 化療主要是通過敏感化療藥物的使用，加速腫瘤細(xì)胞凋亡[5]。 在治療過程中需要密切觀察患者的病情變化， 對(duì)于化療效果不佳的患者，需要轉(zhuǎn)為使用其他治療方案，避免疾病的進(jìn)一步進(jìn)展。 因此需要采用有效的觀察指標(biāo)來評(píng)價(jià)乳腺癌患者的化療效果。

乳腺癌作為一種全身性疾病， 在腫瘤形成后就可能出現(xiàn)轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)，從而影響患者的預(yù)后情況。 雌激素受體、 孕激素受體以及人類表皮生長因子受體2 是目前乳腺癌常用的觀察指標(biāo)， 能夠指導(dǎo)臨床治療和預(yù)后評(píng)估[6]。 但是這些指標(biāo)不適合進(jìn)行連續(xù)監(jiān)測(cè)，因此在動(dòng)態(tài)療效評(píng)價(jià)方面的應(yīng)用效果有限。 需要積極尋找新的觀察指標(biāo)[7]。 循環(huán)腫瘤細(xì)胞（CTCs）是指從腫瘤組織脫離或因?yàn)樵\療操作進(jìn)入外周血液的腫瘤細(xì)胞， 這些細(xì)胞能夠通過血液進(jìn)入其他組織和器官， 并且通過間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)化實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[8]。CTCs 檢測(cè)與傳統(tǒng)乳腺癌標(biāo)志物檢測(cè)相比具有穩(wěn)定性高的優(yōu)勢(shì)， 且與其他檢查方法相比，具有創(chuàng)傷小、可重復(fù)性好、不受疾病分期影響的優(yōu)勢(shì)。 有研究[9]指出，CTCs 在乳腺癌臨床診斷中具有較好的應(yīng)用效果，能夠提高乳腺癌檢出率，采用CTCs 檢測(cè)的敏感性為87.6%， 特異性為93.2%， 陽性預(yù)測(cè)率為100.0%， 陰性預(yù)測(cè)率為86.2%與該次研究結(jié)果一致，該次研究中 CTCs 檢測(cè)的敏感性為85.6%， 特異性為92.7%，陽性預(yù)測(cè)率為100.0%，陰性預(yù)測(cè)率為85.7%。該次研究中完全緩解與部分緩解患者化療前后的CTCs計(jì)數(shù)相比病情穩(wěn)定和病情進(jìn)展患者明顯更低（P＜0.05），通過Spermans 相關(guān)分析法分析，CTCs 計(jì)數(shù)與乳腺癌患者化療效果呈正相關(guān)性（r=0.426，P＜0.05），這說明預(yù)后好的患者化療前后的CTCs 計(jì)數(shù)相比于預(yù)后不好患者要更低，提示CTCs 計(jì)數(shù)高的患者往往預(yù)后較差，在臨床治療中需要加強(qiáng)此類患者的病情觀察。

隨著臨床醫(yī)學(xué)對(duì)乳腺癌研究深入， 遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移是影響乳腺癌患者預(yù)后的主要原因。 遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的主要因素為腫瘤細(xì)胞從血液進(jìn)入其他組織器官， 因此可以根據(jù)這一原因，利用外周血檢測(cè)循環(huán)中腫瘤細(xì)胞的數(shù)量，評(píng)價(jià)患者的預(yù)后情況[10]。同時(shí)外周血作為一個(gè)采集方便的樣本，采集難度小，可隨時(shí)進(jìn)行檢查，若能夠從外周血中發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞，可以根據(jù)CTCs 計(jì)數(shù)指導(dǎo)患者的治療[11]。腫瘤細(xì)胞從組織脫離進(jìn)入血液之后在24 h 內(nèi)會(huì)凋亡，僅有不到0.1%腫瘤細(xì)胞仍有活性， 雖然這些腫瘤細(xì)胞數(shù)量較少，且不一定會(huì)最終形成轉(zhuǎn)移灶，但是只有腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液之后才會(huì)完成腫瘤遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移， 是影響乳腺癌患者預(yù)后的重要基礎(chǔ)[12]。同時(shí)該方法與活檢樣本相比，外周血采集方便，患者對(duì)檢查的耐受性高，采血途徑多。因此，CTCs 能夠作為評(píng)價(jià)乳腺癌患者療效的重要指標(biāo)，觀察患者有無復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

綜上所述，化療前CTCs 計(jì)數(shù)低的乳腺癌患者往往預(yù)后較好，且化療后乳腺癌患者CTCs 明顯下降，循環(huán)腫瘤細(xì)胞在乳腺癌患者預(yù)后判斷中具有較好的應(yīng)用價(jià)值，可在臨床推廣使用。