劉斌

風(fēng)疹是一種傳染性疾病，因風(fēng)疹病毒感染所致，臨床癥狀以發(fā)熱、出診子、淋巴結(jié)腫大等為主，主要通過(guò)飛沫經(jīng)呼吸道進(jìn)行傳播[1-2]。IgM 抗體檢測(cè)是臨床診斷風(fēng)疹的主要參考依據(jù)，目前常用的檢測(cè)方法是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，該試驗(yàn)方法具有敏感度高、操作簡(jiǎn)易、成本低等優(yōu)勢(shì)，在臨床中得到了廣泛運(yùn)用[3-4]。但是，已有的文獻(xiàn)報(bào)道指出，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)會(huì)受到溫度、洗板、顯色等諸多因素的影響，導(dǎo)致其檢測(cè)結(jié)果存在一定的誤差，因此必須加強(qiáng)檢測(cè)過(guò)程中的室內(nèi)質(zhì)量控制[5]。鑒于此，本研究為了進(jìn)一步探討風(fēng)疹I(lǐng)gM 抗體檢測(cè)中的有效室內(nèi)質(zhì)量控制方法，就62 例疑似風(fēng)疹患者酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)中即刻法和雙質(zhì)控法的應(yīng)用效果進(jìn)行對(duì)照分析，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

篩選出本科室2018 年4 月—2020 年4 月的62 例疑似風(fēng)疹患者，均出現(xiàn)一定程度的皮疹、黏膜疹、淋巴結(jié)腫大、發(fā)熱等癥狀。對(duì)所有進(jìn)行IgM 抗體檢測(cè)，根據(jù)不同室內(nèi)質(zhì)量控制方法將其分為A 組與B 組，每組31 例。A 組：男21 例，女20 例；年齡8 ～53歲，平均（31.69±10.91）歲。B 組：男20 例，女21 例；年齡8 ～54歲，平均（31.74±11.00）歲。兩組基本資料對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集患者的血液標(biāo)本，3 000 r/min 離心10min，提取上層血清，于2 ～10℃的冰箱中冷藏保存待測(cè)。

1.2.2 IgM 抗體檢測(cè) 參照衛(wèi)生部發(fā)布的風(fēng)疹診斷標(biāo)準(zhǔn)（WS297-2008）[6]，運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，試劑盒源于深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司，均與有效期內(nèi)使用，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。

1.2.3 室內(nèi)質(zhì)量控制 內(nèi)部對(duì)照質(zhì)控血清根據(jù)麻疹網(wǎng)絡(luò)實(shí)驗(yàn)室SOP（麻疹風(fēng)疹I(lǐng)gM 抗體檢測(cè)的內(nèi)部質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程），利用陽(yáng)性病例血清自行配制，分裝100 μL 一管，不反復(fù)凍融。儀器包括運(yùn)用Thermo MUITISKAN MK3 酶標(biāo)儀與Thermo WELLWASH酶標(biāo)洗板機(jī)；HWS-28 電熱恒溫水浴鍋，源于上海合恒儀器設(shè)備有限公司。

A 組應(yīng)用即刻法，按照公式計(jì)算出定值血清的密光度值（OD）/試劑盒臨界值（CO）的比值（S/CO）的上限與下限，再查離散指數(shù)值表判定質(zhì)控結(jié)果，若結(jié)果為“告警”或“失控”，則舍棄并重新測(cè)定，其他測(cè)定值可繼續(xù)使用[7]。

B 組應(yīng)用雙質(zhì)控法。替換質(zhì)控血清時(shí)，將新質(zhì)控血清在舊質(zhì)控血清用完前與其一起檢測(cè)≥3 次，即于同一個(gè)酶標(biāo)板上各加新舊質(zhì)控血清1 ～2 孔。舊質(zhì)控血清的OD 值參照原數(shù)據(jù)組繼續(xù)進(jìn)行“即刻法”分析。替換試劑批號(hào)時(shí)，于舊試劑用完前將新試劑2 排（18 孔）與舊試劑于同一個(gè)酶標(biāo)板上進(jìn)行3 次檢測(cè)，兩種批號(hào)的試劑皆加入到同一質(zhì)控血清與部分相同樣本中；舊試劑質(zhì)控的OD 值參照原數(shù)據(jù)組繼續(xù)進(jìn)行“即刻法”分析。新試劑質(zhì)控的OD 值劑同時(shí)進(jìn)行原數(shù)據(jù)組的“即刻法”分析與新一組數(shù)據(jù)的“即刻法”分析。從第3 次檢測(cè)開(kāi)始應(yīng)用新試劑進(jìn)行標(biāo)本檢測(cè)，質(zhì)控的OD 值也只進(jìn)行新一組數(shù)據(jù)的“即刻法”分析。若新試劑質(zhì)控的OD 值在原始數(shù)據(jù)的“即刻法”分析中出現(xiàn)負(fù)值偏移至警報(bào)與失控，且同一個(gè)酶標(biāo)板舊試劑的質(zhì)控結(jié)果為可控狀態(tài)，則新試劑棄用。

1.3 觀察指標(biāo)

對(duì)比兩組的室內(nèi)質(zhì)控效果，分析舊試劑與新試劑試驗(yàn)結(jié)果的可控情況。

2 結(jié)果

舊試劑第5 ～7 次與新試劑第1 ～2 次對(duì)應(yīng)的同一個(gè)酶標(biāo)板試驗(yàn)結(jié)果以及舊試劑的第7 次與新試劑的4 次試驗(yàn)結(jié)果均處于可控狀態(tài)。見(jiàn)表1。

表1 兩組的室內(nèi)質(zhì)控效果對(duì)比

3 討論

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是免疫學(xué)診斷的主要方法之一，其檢測(cè)結(jié)果較為穩(wěn)定，適用于大規(guī)模的檢測(cè)。但臨床實(shí)踐表明，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的影響因素較多，要確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，就必須讓每次檢測(cè)均保持可控，因此就需要進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制[8]。此前較為常用的室內(nèi)質(zhì)控方法是即刻法和常規(guī)質(zhì)控圖相結(jié)合的方式，具有簡(jiǎn)單、實(shí)用、易操作的特點(diǎn)[9]。但實(shí)際操作過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，即刻法的前幾次試驗(yàn)存在可控性無(wú)法判定的不足，特別是對(duì)于異常不常檢測(cè)的指標(biāo)以及有效期較短的試劑盒，其可控狀態(tài)存在較為明顯的不穩(wěn)定性[10-11]。所以，需要探討一種更為有效、能夠準(zhǔn)確反映檢測(cè)過(guò)程可控狀態(tài)的室內(nèi)質(zhì)量控制方法。

雙質(zhì)控法采取雙重質(zhì)控，有效解決了新舊試劑替換時(shí)檢測(cè)結(jié)果不可控的情況[12]。本研究對(duì)比即刻法與雙質(zhì)控法的應(yīng)用效果，結(jié)果顯示，新舊試劑的各次檢測(cè)結(jié)果均處于可控狀態(tài)，提示兩種方法在風(fēng)疹I(lǐng)gM 抗體檢測(cè)的室內(nèi)質(zhì)量控制中均有效，由此進(jìn)一步證實(shí)了酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在風(fēng)疹I(lǐng)gM 抗體檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值。另外，分析即刻法有效的原因，主要在于：風(fēng)疹I(lǐng)gM 檢測(cè)的樣本數(shù)量少、時(shí)間短，因此采用即刻法進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制也能獲得較為滿(mǎn)意的效果。

必須一提的是，進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制的最終目的是確保試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。而酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的試劑盒與質(zhì)控血清的有效期較短，所以應(yīng)盡量選擇更具有效性的雙質(zhì)控法進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，以提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可靠性。同時(shí)應(yīng)保證在試劑盒與質(zhì)控血清的有效期內(nèi)進(jìn)行風(fēng)疹I(lǐng)gM 抗體檢測(cè)，以確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率，為患者的臨床診斷與治療提供科學(xué)、有價(jià)值的參考依據(jù)。

綜上所述，風(fēng)疹I(lǐng)gM抗體檢測(cè)中雙質(zhì)控法的應(yīng)用效果優(yōu)于即刻法，有助于提高檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確率，對(duì)風(fēng)疹的臨床診斷具有重要意義。