蘇進(jìn)姬

廣東省陽(yáng)春市食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)站 廣東陽(yáng)春 529600

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

試劑：糖精鈉、甜蜜素、安賽蜜、乙腈、硫酸銨。

儀器：HP1100高效液相色譜儀、超聲波振蕩器、超聲波振蕩器、離心機(jī)、電子天平、固相萃取柱。

1.2 色譜條件

色譜柱：ODS-C18；流動(dòng)相：20mmol/L硫酸銨-乙腈；流速/mL/min：0.8；柱溫/℃：30；檢測(cè)波長(zhǎng)/nm：200、226；進(jìn)樣量/μL：20。

1.3 樣品前處理

（1）介質(zhì)為液體的樣品。如碳酸飲料，分別稱(chēng)取10g（±0.001g），放在25毫升的玻璃器皿中，使用超純水進(jìn)行定容至25毫升，搖勻，使用0.45μm的濾膜進(jìn)行過(guò)濾，放置等待測(cè)定。

（2）介質(zhì)為固體的樣品。把樣品分別粉碎，各稱(chēng)取2g（±0.001g），放置在25毫升的玻璃器皿中，加水，并持續(xù)20分鐘的超聲震蕩后加入超純水進(jìn)行定容至25毫升，然后取上層的清液，放置等待測(cè)定。

（3）含乳飲料和植物蛋白飲料。分別取樣品6 g（±0.001g），放置在25毫升的玻璃器皿中，按照順序加入2毫升的0.08mol/LK4[Fe（CN）6]溶液和2毫升的0.25mol/LZn（CH3COO）2溶液，并持續(xù)2分鐘的震蕩后，沉淀蛋白質(zhì)，加入超純水進(jìn)行定容至25毫升，然后取上層的清液，放置等待測(cè)定[1]。

1.4 試樣的凈化

分別取3毫升上層清清液，使用固相萃取柱進(jìn)行萃取，然后再按照順序使用3毫升20mmol/L的（NH④2SO4和3毫升的乙腈進(jìn)行洗脫，再把洗脫的溶液分別取10毫升放置在容量瓶中，使用超純水進(jìn)行定容至25毫升，并混合均勻，使用0.45μm濾膜進(jìn)行過(guò)濾，放置等待測(cè)定[2]。

1.5 測(cè)定

分別取20μL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和處理液放入高效液相色譜分析儀中進(jìn)行分離，以保留時(shí)間定性，峰面積進(jìn)行外標(biāo)法定量。

1.6 計(jì)算公式

按照以下公式進(jìn)行計(jì)算。

公式中：

X——糖精鈉、甜蜜素、安賽蜜含量/（mg/kg）或/（mg/L）；

A2——樣品峰面積；

A1——標(biāo)液峰面積；

K——稀釋倍數(shù)；

C——標(biāo)液質(zhì)量濃度/（μg/mL）；

M——樣品質(zhì)量/g；

V——樣品洗脫液濃縮定容體積/mL。

2 結(jié)果與分析

2.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

在本文中使用的是二極管陣列檢測(cè)器，在190-400nm的范圍中對(duì)所需要分析的物質(zhì)進(jìn)行有效的光譜掃描，經(jīng)過(guò)掃描可以看出，文中的3種甜味劑最大的吸收波長(zhǎng)如表1所示。其中除了安賽蜜是按照按226nm波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，其余的都是按照200nm波長(zhǎng)進(jìn)行測(cè)定，在此色譜條件下，3種甜味劑的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)色譜圖見(jiàn)圖1。

表1 3 種甜味劑最大的吸收波長(zhǎng)

圖1 標(biāo)準(zhǔn)混合溶液的色譜圖

2.2 線性范圍、精密度和檢出限

在檢驗(yàn)線性關(guān)系、相關(guān)系數(shù)、檢出限和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，見(jiàn)表2。根據(jù)相關(guān)的結(jié)果可以看出，分析物在0.4-120mg/L范圍之內(nèi)都有著比較好的線性關(guān)系，能夠充分地滿(mǎn)足于定量分析的需求[3]。

2.3 實(shí)際樣品中甜味劑含量及加標(biāo)回收率的測(cè)定

在如表5種測(cè)定結(jié)果的基礎(chǔ)上，加入一定的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，每種樣品都需要進(jìn)行三次的平行測(cè)定，最終的測(cè)定結(jié)果如表所示。

表2 線性關(guān)系與檢出限

表3 實(shí)際樣品的測(cè)定結(jié)果（n=3）

表4 實(shí)際樣品的加標(biāo)回收率結(jié)果

相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差 安賽蜜 0.71% 2.69% 1.99% 1.5% 1.46%糖精鈉 0.86% 3.02% 2.32% 3.12% 2.12%甜蜜素 1.41% 1.15% 1.57% 1.97% 0.92%

3 結(jié)語(yǔ)

總而言之，通過(guò)本文對(duì)3種飲料中甜味劑進(jìn)行高效液相色譜法的實(shí)驗(yàn)分析中可以看出，糖精鈉、甜蜜素、安賽蜜在4.0-20.0mg/kg的范圍之內(nèi)，且在加標(biāo)回收率方面為百分之88到107，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差＜百分之3.12，此種方法簡(jiǎn)單、容易操作，且具有比較好的凈化效果，能夠使用在飲料中多種調(diào)味劑同時(shí)檢測(cè)的方法，且還可以有效消除對(duì)飲料中單一甜味劑檢測(cè)過(guò)程中而出現(xiàn)其他甜味劑漏檢的狀況。