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        常見消毒劑對(duì)塞內(nèi)卡病毒殺滅作用的比較研究

        2021-04-19 11:27:28齊志濤王娥娥張?jiān)菩?/span>郝蘇云路榮方建國高艷華張燕紅陳九連
        中國獸藥雜志 2021年1期
        關(guān)鍵詞:硬水中和劑消毒液

        齊志濤,王娥娥,張?jiān)菩?,郝蘇云,路榮,方建國,高艷華,張燕紅,陳九連

        (金宇保靈生物藥品有限公司,呼和浩特 010100)

        塞內(nèi)卡病毒(Senecavirus A,SVA)是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種主要引起豬水皰樣病變的病毒。早在1988年即在美國豬群中開始流行傳播,并且一直在豬群中循環(huán)[1]。我國2015年首次在廣東發(fā)現(xiàn)SVA的存在[2],此后,在我國福建、河南等多地相繼檢出SVA。豬感染后常表現(xiàn)為鼻端及蹄冠發(fā)生水皰、潰爛,發(fā)病特征與口蹄疫、豬水泡病、水泡性口炎極為相似,臨床上難以區(qū)分。在感染豬群中,母豬最易感,發(fā)病率高達(dá)70%~90%,其次是仔豬,發(fā)病率達(dá)70%,1~4日齡仔豬感染后死亡率達(dá)15%~30%[3]。雖然SVA危害性不及口蹄疫病毒,但由于感染后的發(fā)病特征類似于口蹄疫,從而在一定程度上影響了豬的上市及交易。我國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部2018年發(fā)布了《農(nóng)業(yè)農(nóng)村部辦公廳關(guān)于做好SVA病防治工作的通知》,可見對(duì)該疫病的重視程度。目前尚無商品化疫苗可預(yù)防該疫病,而環(huán)境與圈舍消毒則是最為有效、實(shí)用的防范措施,國外學(xué)者的研究發(fā)現(xiàn)過氧化氫[4]、酚類消毒劑、漂白粉能有效殺滅該病毒,國內(nèi)尚無此方面的研究。為切實(shí)開展相關(guān)研究,為疫病防控提供數(shù)據(jù)支持,維護(hù)養(yǎng)豬業(yè)生產(chǎn)及豬肉產(chǎn)品質(zhì)量安全,本文研究了8種常用消毒劑和紫外線對(duì)SVA的殺滅作用。

        1 材料與方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        1.1.1 試驗(yàn)毒株及細(xì)胞 毒株:SVA CH/ZZ/2016株;細(xì)胞:PK-15細(xì)胞(豬腎細(xì)胞),由金宇保靈生物藥品有限公司獸用疫苗國家工程實(shí)驗(yàn)室保存。

        1.1.2 主要試劑 消毒劑:分析純苯酚(天津市大茂化學(xué)試劑廠),常用消毒濃度為2%~5%;新潔爾滅消毒液(山東安杰高科消毒科技有限公司),苯扎溴銨含量為2.7%~3.3%,推薦稀釋比例(原液:水)為1∶4;84消毒液(山東利爾康醫(yī)療科技股份有限公司),一般物體表面消毒推薦稀釋比例(原液:水)為1∶100~1∶200,百毒殺(上海派斯德生化有限公司),圈舍器械消毒推薦使用濃度為0.02%~0.05%;NaOH(天津市北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開發(fā)有限公司),常用消毒濃度為2%~5%;檸檬酸(天津市申泰化學(xué)試劑有限公司),口蹄疫疫苗生產(chǎn)車間常用消毒濃度為0.2%;復(fù)方甲酚皂消毒液(山東利爾康醫(yī)療科技股份有限公司),推薦稀釋比例(原液:水)為1∶2;75%酒精消毒液(山東利爾康醫(yī)療科技股份有限公司);

        中和劑:百毒殺、新潔爾滅消毒液、84消毒液的中和劑為含有5.0 g/L硫代硫酸鈉的PBS溶液;苯酚、復(fù)方甲酚皂消毒液的中和劑為含有3%吐溫-80+3%卵磷脂的PBS溶液;檸檬酸溶液的中和劑為0.75% NaHCO3溶液;NaOH溶液的中和劑為0.5% HCl溶液[5]。

        標(biāo)準(zhǔn)硬水:硬度為342 mg/L,由CaCl20.034 g,MgCl2·6H2O 0.139 g,加蒸餾水至1.0 L配制而成。

        其他:0.04 mol/L PH為7.4的PBS。

        1.1.3 儀器設(shè)備 二級(jí)生物安全柜(香港力申發(fā)展有限公司)、水浴鍋(常州智博瑞儀器制造有限公司 HH-420)、二氧化碳培養(yǎng)箱(Thermo Fisher 14291)。

        1.2 試驗(yàn)方法

        1.2.1 試驗(yàn)用毒株病毒滴度測定 將SVA CH/ZZ/2016株病毒液用DMEM培養(yǎng)基進(jìn)行10倍系列倍比稀釋(101~108),分別接種于單層PK-15貼壁細(xì)胞(96孔細(xì)胞培養(yǎng)板),每個(gè)稀釋度接種4孔,置于37 ℃,含5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),以Reed-Muench法計(jì)算病毒的半數(shù)細(xì)胞感染量(TCID50)。

        1.2.2 消毒劑、中和劑、中和產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞的影響 根據(jù)衛(wèi)生2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》[6],評(píng)價(jià)中和劑、消毒劑及中和產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞生長狀況的影響,共設(shè)立6組試驗(yàn):

        第1組為消毒劑(正式試驗(yàn)的最高濃度),分別取消毒劑1.0 mL(用標(biāo)準(zhǔn)硬水分別配制5.0%苯酚溶液、5.0%檸檬酸溶液、2% NaOH溶液、0.5%百毒殺、1∶200稀釋的84消毒液、1∶2稀釋的復(fù)方甲酚皂消毒液、1∶4稀釋的新潔爾滅溶液以及未稀釋的75%酒精)接種單層PK-15細(xì)胞,補(bǔ)維持液9.0 mL,置37 ℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),48 h觀察細(xì)胞生長情況。

        第2組為中和劑,分別取1.0 mL含5.0 g/L硫代硫酸鈉的PBS溶液、含3%吐溫-80+3%卵磷脂的PBS溶液、0.75% NaHCO3溶液和0.5% HCl溶液接種單層PK-15細(xì)胞,補(bǔ)維持液9.0 mL,置37 ℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),48 h觀察細(xì)胞生長情況。

        第3組為中和產(chǎn)物,分別取消毒劑(5.0%苯酚溶液、5.0%檸檬酸溶液、2% NaOH溶液、0.5%百毒殺、1∶200稀釋的84消毒液、1∶2稀釋的復(fù)方甲酚皂消毒液、1∶4稀釋的新潔爾滅溶液)與適量相對(duì)應(yīng)中和劑混合,作用10 min后混合液即為中和產(chǎn)物,分別取中和產(chǎn)物1.0 mL接種單層PK-15細(xì)胞,補(bǔ)維持液9.0 mL,置37 ℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),48 h觀察細(xì)胞生長情況。

        其余3組為對(duì)照組,分別取標(biāo)準(zhǔn)硬水、PBS和細(xì)胞維持液對(duì)照組各1.0 mL,接種單層PK-15細(xì)胞,補(bǔ)維持液9.0 mL,置37 ℃二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng),48 h觀察細(xì)胞生長情況。

        1.2.3 中和劑中和效果鑒定、中和劑及中和產(chǎn)物對(duì)SVA TCID50的影響 根據(jù)衛(wèi)生2002版《消毒技術(shù)規(guī)范》[6],評(píng)價(jià)中和劑的中和作用,以及中和劑、中和產(chǎn)物對(duì)病毒滴度的影響,試驗(yàn)共設(shè)立6組:

        第1組為消毒劑+病毒液,分別取消毒劑5.0 mL(用標(biāo)準(zhǔn)硬水分別配制10%苯酚溶液、10%檸檬酸溶液、4% NaOH溶液、1%百毒殺、1∶100稀釋的84消毒液、1∶2稀釋的新潔爾滅溶液以及未稀釋的復(fù)方甲酚皂消毒液)與5.0 mL SVA病毒液混合,另取9.0 mL 75%酒精與1.0 mL SVA病毒液混合,于20 ℃水浴作用60 min,取樣測定TCID50;

        第2組為(消毒劑+病毒液)+中和劑,分別取消毒劑5.0 mL(用標(biāo)準(zhǔn)硬水分別配制10%苯酚溶液、10%檸檬酸溶液、4% NaOH溶液、1%百毒殺、1∶100稀釋的84消毒液、1∶2稀釋的新潔爾滅溶液以及未稀釋的復(fù)方甲酚皂消毒液)與5.0 mL SVA病毒液混合,另取4.5 mL 75%酒精與0.5 mL SVA病毒液混合,于20 ℃水浴作用60 min取出混合液0.1 mL,加0.9 mL相應(yīng)中和劑室溫作用5 min,75%酒精試驗(yàn)組加0.9 mL維持液稀釋即可,分別取樣測定TCID50;

        第3組為中和產(chǎn)物(消毒劑+中和劑)+病毒液,分別取消毒劑1.0 mL(用標(biāo)準(zhǔn)硬水分別配制10%苯酚溶液、10%檸檬酸溶液、4% NaOH溶液、1%百毒殺、1∶100稀釋的84消毒液、1∶2稀釋的新潔爾滅溶液以及未稀釋的復(fù)方甲酚皂消毒液)加入9.0 mL相應(yīng)中和劑室溫作用5 min,分別取混合液5.0 mL與等量SVA病毒液混合,20 ℃水浴作用60 min,取樣測定TCID50;

        第4組為(標(biāo)準(zhǔn)硬水+病毒液)+中和劑,取標(biāo)準(zhǔn)硬水5.0 mL與等量SVA病毒液混合,于20 ℃水浴作用60 min后取4.0 mL均分4份,每份1.0 mL,分別加入4種中和劑9.0 mL作用5 min,取樣測定TCID50;

        第5組為(標(biāo)準(zhǔn)硬水+病毒液)+PBS,取標(biāo)準(zhǔn)硬水5.0 mL與等量SVA病毒液混合,于20 ℃水浴作用60 min后取1.0 mL,加入1.0 mL PBS作用5 min,取樣測定TCID50;

        第6組為標(biāo)準(zhǔn)硬水+PBS不接毒組,取標(biāo)準(zhǔn)硬水5.0 mL與等量PBS混合,于20 ℃水浴作用60 min后取樣測定TCID50。

        1.2.4 SVA殺滅試驗(yàn) 用標(biāo)準(zhǔn)硬水將所有消毒劑配制為雙倍試驗(yàn)濃度,即4.0%、10.0%的苯酚溶液,復(fù)方甲酚皂原液及1∶2稀釋液,0.4%、4.0%、10.0%檸檬酸溶液,1.0%、2.0%、4.0%、10.0%NaOH溶液,0.04%、0.1%、0.4%、1.0%百毒殺,1∶2、1∶4稀釋的新潔爾滅,1∶50、1∶100、1∶200、1∶400稀釋的84消毒液,分別吸取5.0 mL上述消毒劑及5.0 mL標(biāo)準(zhǔn)硬水置于15 mL離心管內(nèi),于20 ℃水浴中作用5 min,分別加入5.0 mL SVA病毒液,另取9.0 mL 75%酒精加入1.0 mL SVA病毒液,立即混勻于20 ℃水浴中作用至試驗(yàn)規(guī)定時(shí)間(10 min、30 min、60 min),立即取出0.1 mL混合液,加入0.9 mL相應(yīng)中和劑混勻,75%酒精組及標(biāo)準(zhǔn)硬水組加入0.9 mL細(xì)胞維持液,作用10 min后測定TCID50。如此試驗(yàn)重復(fù)3次,計(jì)算各組平均滅活對(duì)數(shù)值。

        取SVA病毒液5.0 mL加5.0 mL細(xì)胞維持液混勻,吸取2.5 mL平鋪于底面積為12.56 cm2的平皿中,平皿開蓋置于生物安全柜中用紫外線照射,照射強(qiáng)度為90 μW/cm2,同時(shí)設(shè)立同等條件下遮擋紫外線的對(duì)照組。作用至試驗(yàn)規(guī)定時(shí)間(10 min、30 min、60 min),立即取出0.1 mL,加入0.9 mL細(xì)胞維持液混勻,測定TCID50。如此試驗(yàn)重復(fù)3次,計(jì)算各組平均滅活對(duì)數(shù)值。

        1.2.5 平均滅活對(duì)數(shù)值的計(jì)算及對(duì)比: 設(shè)陽性(病毒)對(duì)照組TCID50為NO,試驗(yàn)(消毒)組TCID50)NX,平均滅活對(duì)數(shù)值= log No-log Nx[6],對(duì)比各種消毒劑對(duì)SVA的殺滅效果。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 試驗(yàn)用毒株病毒滴度測定 經(jīng)測定,試驗(yàn)用SVA病毒液TCID50為10-7.0/0.1 mL。

        2.2 消毒劑、中和劑及中和產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞生長狀況的影響 結(jié)果如圖1所示,除百毒殺組(H所示)細(xì)胞出現(xiàn)稍許變圓、漂浮、數(shù)量減少以外,其他各組消毒劑均未對(duì)細(xì)胞生長產(chǎn)生明顯影響;5.0 g/L硫代硫酸鈉的PBS組(M所示)細(xì)胞出現(xiàn)少量變圓、漂浮的情況,其他中和劑實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長未見異常;各中和產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞生長未造成顯著影響;由消毒劑或中和劑造成的細(xì)胞異常生長與SVA引起的細(xì)胞病變有明顯區(qū)別。

        注:圖A~C分別為細(xì)胞維持液、PBS、標(biāo)準(zhǔn)硬水對(duì)細(xì)胞生長影響的情況;圖D細(xì)胞病變;圖E~L分別為消毒劑苯酚溶液、復(fù)方甲酚皂溶液、NaOH溶液、百毒殺溶液、新潔爾滅溶液、84消毒液、75%酒精及檸檬酸溶液對(duì)細(xì)胞生長影響情況;圖M~P分別為中和劑5.0 g/L硫代硫酸鈉的PBS、3%吐溫-80+3%卵磷脂的PBS、0.75%碳酸氫鈉溶液及0.5% HCl溶液對(duì)細(xì)胞生長影響情況;圖Q~W分別為苯酚、復(fù)方甲酚皂、檸檬酸、NaOH、百毒殺、新潔爾滅和84消毒液與相應(yīng)中和劑的中和產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞生長影響情況。

        2.3 中和劑中和效果鑒定、中和劑及中和產(chǎn)物對(duì)SVA TCID50的影響 表1、表2結(jié)果顯示,第1組試驗(yàn)中苯酚組、NaOH組和84消毒液組TCID50檢測結(jié)果為0,其他消毒劑組均不低于5.50;第2組試驗(yàn)中,苯酚組TCID50為2.50,NaOH組和84消毒液組TCID50為2.00,其他消毒劑組為5.50;第3、4、5組測定結(jié)果相同,TCID50在5.00~5.50之間;第6組細(xì)胞生長未見異常。結(jié)果表明,試驗(yàn)中所用中和劑均可中和相應(yīng)消毒劑的消毒作用,中和劑及中和產(chǎn)物均不影響病毒滴度。

        2.4 SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果 以下結(jié)果為不同消毒劑對(duì)SVA的平均滅活對(duì)數(shù)值,滅活對(duì)數(shù)值越大,表明滅活效果越強(qiáng)。

        2.4.1 不同濃度苯酚溶液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果 表3結(jié)果顯示,濃度為5.0%的苯酚溶液與SVA作用時(shí)間至少為10 min時(shí),對(duì)其滅活對(duì)數(shù)值為5.50,表明SVA被完全殺滅;當(dāng)苯酚濃度為2.0%時(shí),與SVA作用60 min滅活對(duì)數(shù)值為3.00,表明病毒未完全殺滅。

        2.4.2 不同濃度復(fù)方甲酚皂溶液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果 表4結(jié)果顯示,以1∶2和1∶4稀釋的復(fù)方甲酚皂消毒劑,與SVA作用60 min時(shí),滅活對(duì)數(shù)值分別為0.75和0.25,表明病毒未被殺滅。

        2.4.3 不同濃度檸檬酸溶液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果 表5結(jié)果顯示,濃度為0.2%與2.0%的檸檬酸溶液與SVA作用60 min時(shí),兩種濃度消毒劑對(duì)病毒的平均滅活對(duì)數(shù)值為0.75,濃度為5.0%的檸檬酸溶液與病毒作用60 min時(shí),滅活對(duì)數(shù)值為1.5,結(jié)果表明,試驗(yàn)所用濃度的檸檬酸溶液不能殺滅SVA。

        表1 中和產(chǎn)物對(duì)病毒滴度的影響

        表2 中和劑對(duì)病毒滴度的影響

        表3 苯酚對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果

        表4 不同濃度甲酚皂溶液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果

        表5 檸檬酸溶液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果

        2.4.4 不同濃度NaOH溶液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果表6結(jié)果顯示,用濃度為0.5%、1.0%、2.0%和5.0%的NaOH溶液,分別與SVA作用至少10 min時(shí),各組滅活對(duì)數(shù)值均為5.50,表明該病毒被完全殺滅。

        2.4.5 不同濃度百毒殺溶液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果表7結(jié)果顯示,濃度為0.02%的百毒殺與SVA作用60 min時(shí),滅活對(duì)數(shù)值為0.50;同樣作用60 min,百毒殺濃度為0.05%及0.2%時(shí),滅活對(duì)數(shù)值為0.75,百毒殺濃度為0.5%時(shí),滅活對(duì)數(shù)值為1.00,表明病毒未被殺滅。

        2.4.6 不同濃度新潔爾滅溶液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果 表8結(jié)果顯示,以1∶4比例稀釋的新潔爾滅消毒液與SVA作用60 min,平均滅活對(duì)數(shù)值為1.00;1∶8稀釋組平均滅活對(duì)數(shù)值為0.50,表明SVA未被殺滅。

        表6 NaOH對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果

        表7 百毒殺對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果

        表8 新潔爾滅對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果

        2.4.7 不同濃度84消毒液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果表9結(jié)果顯示,以1∶100、1∶200比例稀釋的84消毒液與SVA作用10 min,對(duì)病毒平均滅活對(duì)數(shù)值為5.50,表明病毒被完全殺滅,以1∶400、1∶800比例稀釋的84消毒液對(duì)SVA作用60 min,平均滅活對(duì)數(shù)值為1.00,表明病毒未被完全殺滅。

        表9 84消毒液對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果

        表10 75%酒精、紫外線對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果

        圖2 不同消毒劑對(duì)SVA殺滅效果的對(duì)比

        2.4.8 75%酒精、紫外線對(duì)SVA殺滅試驗(yàn)結(jié)果75%酒精與SVA作用10 min時(shí),平均滅活對(duì)數(shù)值為3.50,作用30 min時(shí),滅活對(duì)數(shù)值為5.00,當(dāng)作用60 min時(shí),平均滅活對(duì)數(shù)值為5.50,表明75%酒精作用60 min可將SVA完全殺滅;在紫外線照射作用10 min時(shí),對(duì)SVA的平均滅活對(duì)數(shù)值為4.25;照射30 min時(shí),平均滅活對(duì)數(shù)值為5.50,表明SVA被完全殺滅;紫外線對(duì)照組平均滅活對(duì)數(shù)值為0,表明毒價(jià)未降低;標(biāo)準(zhǔn)硬水與SVA作用60 min平均滅活對(duì)數(shù)值為0,表明標(biāo)準(zhǔn)硬水對(duì)SVA無殺滅作用,上述試驗(yàn)成立。

        2.5 不同消毒劑對(duì)SVA殺滅效果的對(duì)比 選取上述結(jié)果中消毒劑對(duì)SVA最佳殺滅濃度,以及完全殺滅病毒的最低濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比分析,結(jié)果如圖2所示。

        由圖2可知,5.0%苯酚溶液、0.5%NaOH溶液對(duì)SVA殺滅效果最好,均可在10 min殺滅病毒;其次為1∶200稀釋的84消毒液,作用30 min即可將SVA完全殺滅;紫外線對(duì)病毒殺滅作用比1∶200的84消毒液稍弱,但也能在30 min殺滅SVA;75%酒精對(duì)SVA殺滅作用不及前幾種消毒劑,需要60 min才能殺滅;其他消毒劑,包括1∶2復(fù)方甲酚皂消毒液、5.0%檸檬酸溶液、0.5%百毒殺及1∶4新潔爾滅溶液對(duì)SVA殺滅作用弱,60 min內(nèi)不能殺滅病毒。

        3 討論與結(jié)論

        選取8種常見消毒劑和紫外線,設(shè)置不同濃度和作用時(shí)間,評(píng)估對(duì)SVA的殺滅效果。結(jié)果表明,5.0%的苯酚溶液、0.5%以上的NaOH溶液、低于1∶200濃度的84消毒液、75%酒精以及紫外線對(duì)SVA有較強(qiáng)的殺滅作用,其他消毒劑對(duì)SVA殺滅作用較弱甚至無作用。

        臨床上常用1.0%~5.0%的苯酚溶液對(duì)醫(yī)療器械及排泄物進(jìn)行消毒[7],有研究表明,苯酚類消毒劑也適用于潔凈室的常規(guī)清潔消毒。Azad Singh等[8]的研究發(fā)現(xiàn),使用推薦濃度的酚醛類消毒劑在25 ℃和4 ℃的溫度下,能殺滅物體表面82.41%的SVA,本研究證明,5.0%的苯酚溶液對(duì)SVA有較強(qiáng)殺滅作用,且苯酚濃度符合國標(biāo)[9]。因此,開展SVA相關(guān)研究的實(shí)驗(yàn)室,可以參考用5.0%的苯酚溶液處理某些試驗(yàn)器械及廢棄物,以保證實(shí)驗(yàn)室生物安全;復(fù)方甲酚皂消毒劑與苯酚同屬于酚類消毒劑,但使用推薦濃度對(duì)SVA殺滅作用遠(yuǎn)遠(yuǎn)不及苯酚溶液。

        NaOH價(jià)格低廉、消毒作用強(qiáng)。養(yǎng)殖場在實(shí)際生產(chǎn)過程中,通常用2.0%~5.0%的NaOH溶液,對(duì)空舍、車輛及人員鞋底進(jìn)行消毒。依據(jù)本研究結(jié)果,用0.5%的NaOH溶液作用10 min即可有效殺滅SVA,遠(yuǎn)低于通常使用濃度,為豬場對(duì)SVA病的預(yù)防提供了重要的理論依據(jù)。0.2%濃度檸檬酸溶液對(duì)口蹄疫病毒具有良好的消毒效果,但0.2%、2.0%和5.0%三種濃度檸檬酸溶液對(duì)SVA均無明顯殺滅作用。研究結(jié)果提示,SVA與口蹄疫在發(fā)病臨床癥狀極為相似,但病原理化特性差異較大,適合口蹄疫病毒的消毒劑或消毒方法可能并不完全適用于SVA。

        百毒殺主要成分是溴化二甲基二癸基烴銨,畜舍、器具消毒推薦使用濃度為0.015%~0.05%。本研究發(fā)現(xiàn),以推薦濃度對(duì)SVA進(jìn)行消毒,效果極其微弱,甚至10倍推薦濃度的百毒殺對(duì)SVA作用也不顯著。新潔爾滅與百毒殺同屬于季銨鹽類消毒劑,推薦使用濃度(1∶4稀釋,苯扎溴銨含量約0.6%)對(duì)SVA殺滅效果也不理想,可見生產(chǎn)中不適合用百毒殺和新潔爾滅對(duì)SVA進(jìn)行消毒。

        84消毒液的主要成分是次氯酸鈉,是一種常見的含氯消毒劑。研究發(fā)現(xiàn),推薦濃度的84消毒液(有效氯含量700~100 mg/L)對(duì)SVA殺滅作用強(qiáng),濃度低于1∶400以下時(shí),對(duì)SVA殺滅效果明顯降低;Azad Singh等[8]的研究發(fā)現(xiàn),稀釋度為1∶20的漂白粉在10 min~15 min內(nèi)可殺滅物體表面99%以上的SVA,84消毒液與漂白粉都屬于次氯酸鹽,說明SVA對(duì)次氯酸鹽較敏感,臨床上可用此類消毒劑殺滅豬場圈舍地面或排泄物中的SVA。

        研究發(fā)現(xiàn)75%酒精對(duì)SVA有一定殺滅作用,但不能瞬間殺滅病毒,作用時(shí)間需要60 min以上。酒精易揮發(fā),通常用噴灑或涂擦的方式對(duì)物體表面消毒,噴灑或涂擦后濃度難以維持60 min,因此,在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不建議使用75%酒精處理SVA。

        紫外線對(duì)消毒物品損傷小,且不涉及藥物殘留及污染的問題,在口蹄疫生產(chǎn)車間常用于空氣和操作臺(tái)表面消毒[10]。本研究發(fā)現(xiàn),SVA經(jīng)生物安全柜內(nèi)的紫外線照射30 min,即可被殺滅。此結(jié)果提示,在生產(chǎn)中,可以用紫外線照射的方式對(duì)物體表面、無菌操作室及空氣消毒,以防止SVA的散播。

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