馬家寶，楊正騰

（1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，廣西 南寧 530023；2.廣西壯瑤藥技術(shù)研究中心，廣西 南寧 530200）

歷代醫(yī)書(shū)本草文獻(xiàn)對(duì)惡性腫瘤的病因、病機(jī)、治法等均有較為系統(tǒng)的論述。中醫(yī)將惡性腫瘤歸為“積聚”“癥瘕”等范疇，歷來(lái)認(rèn)為瘀血痰濁、痰凝濕聚、邪毒內(nèi)蘊(yùn)等體內(nèi)的病理變化是誘發(fā)腫瘤形成和發(fā)展的重要因素，并提出活血化瘀、散結(jié)通絡(luò)、以毒攻毒為祛除腫瘤的重要原則[l-3]。歷代名醫(yī)用于治療腫瘤的傳統(tǒng)藥物中，有毒中藥占據(jù)了大部分，側(cè)面說(shuō)明古人善用有毒中藥治療癌癥，以藥毒攻毒正是中醫(yī)辨證施治的精髓。在常用的以毒攻毒藥中，有一部分蟲(chóng)類藥性通常較為猛烈，善搜剔攻毒，可入里入絡(luò)，在草藥不能有效發(fā)揮作用的地方，可引藥力直達(dá)病所攻頑除堅(jiān)，沉疴愈頑疾，故而國(guó)內(nèi)外醫(yī)者對(duì)有毒動(dòng)物類中藥抗腫瘤作用的探究越來(lái)越多[4]。在我國(guó)全蝎、蜈蚣、蟾酥和土鱉蟲(chóng)4味動(dòng)物藥應(yīng)用于抗腫瘤已有幾千年的歷史，現(xiàn)代藥理研究亦證實(shí)其具有顯著的抗腫瘤效果。筆者以近年全蝎、蜈蚣、蟾酥和土鱉蟲(chóng)的毒性及其減毒增效的炮制工藝研究為基礎(chǔ)，對(duì)其抗腫瘤作用的研究進(jìn)行總結(jié)。

1 全蝎

1.1 毒性及其炮制工藝 全蝎為鉗蝎科動(dòng)物東亞鉗蝎的干燥體，具有息風(fēng)鎮(zhèn)痙、通絡(luò)止痛、攻毒散結(jié)之功效[5]。歷代醫(yī)學(xué)著作中特別指出蝎尾為含蝎毒部位，同樣也是藥效部位，現(xiàn)代藥理亦證實(shí)，全蝎的毒性成分主要來(lái)源于蝎尾部毒囊中的蝎毒液。蝎毒由蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)兩大類物質(zhì)構(gòu)成，蛋白質(zhì)是主要活性成分，活性蛋白又可分為多肽和酶，非蛋白組分主要為脂類、有機(jī)酸及少量游離氨基酸[6]。全蝎毒素類似蛇毒具有神經(jīng)毒特性，毒性甚劇屬高毒范圍，中毒表現(xiàn)為皮膚過(guò)敏伴瘙癢、麻痹四肢、腎臟功能受損、呼吸麻痹、神經(jīng)毒反應(yīng)等，嚴(yán)重者甚至中毒死亡。各代醫(yī)家一直注重全蝎炮制減毒及臨證配伍，經(jīng)過(guò)鹽制、枯礬制、蒸制、酒制等方法炮制后的蝎毒蛋白凝固變性從而毒性降低，還可增加全蝎中的元素含量和更好的發(fā)揮藥性，達(dá)到減毒增效的效果[7]。

1.2 抗腫瘤的有效成分 全蝎在臨床上具有較高的防治惡性腫瘤價(jià)值，多種活性成分被證實(shí)具有抗腫瘤作用，其中蝎毒液為主要效用部分。王晶娟等[8]采用改良MTT法、流式細(xì)胞法研究全蝎蛋白對(duì)Bel7402腫瘤細(xì)胞的作用后，表明全蝎蛋白藥效組分對(duì)癌細(xì)胞毒性明顯，并具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制增殖的作用。賀源等[9]觀察蝎毒素對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞Caco-2的影響發(fā)現(xiàn)，蝎毒素可使癌細(xì)胞的細(xì)胞膜受損、乳酸脫氫酶釋放率增加，促進(jìn)機(jī)體淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化提高機(jī)體免疫力，其抑制腫瘤細(xì)胞增殖的能力隨毒素濃度增多和時(shí)間加長(zhǎng)而增強(qiáng)。

1.3 抗腫瘤機(jī)制 張璐璐等[10]研究發(fā)現(xiàn)，蝎毒多肽能明顯減緩小鼠S180肉瘤細(xì)胞增殖，提示其機(jī)理可能是蝎毒多肽能夠通過(guò)上調(diào)自噬相關(guān)因子Beclin1、MAP1LC3A的蛋白表達(dá)促進(jìn)自噬的發(fā)生及降低腫瘤組織中CD133的表達(dá)從而發(fā)揮作用。周青等[11]研究發(fā)現(xiàn)，全蝎水提物取物在體外可通過(guò)影響細(xì)胞周期使人前列腺癌PC-3細(xì)胞停滯于S期，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)凋亡。孫曉佳等[12]研究觀察了蝎毒多肽對(duì)血管生成主要調(diào)控因子的作用，發(fā)現(xiàn)蝎毒多肽能明顯抑制血管生成而發(fā)揮抗腫瘤的功效，可能與減少腫瘤微環(huán)境中血管生成相關(guān)因子Dll4及Notch1的表達(dá)相聯(lián)系。

2 蜈 蚣

2.1 毒性及其炮制工藝 蜈蚣為蜈蚣科動(dòng)物少棘蜈蚣的干燥體，具有息風(fēng)鎮(zhèn)痙、活血化瘀、解毒散結(jié)等功效，秦漢時(shí)期藥學(xué)著作《神農(nóng)本草經(jīng)》中蜈蚣被列為下品，為防治疾病且有毒的藥物，之后記載蜈蚣的醫(yī)學(xué)書(shū)籍均言其“有毒”。蜈蚣毒液位于蜈蚣頭部領(lǐng)足的毒腺和胸部及尾部基板下腺體中，毒液包括多種酶類、活性多肽和一些小分子化合物，蛋白質(zhì)含量高達(dá)86%為主要活性物質(zhì)?，F(xiàn)代毒理學(xué)研究表明，蜈蚣的毒性反應(yīng)多是組織胺樣物質(zhì)、溶血性蛋白質(zhì)及多肽毒素等引起，可致皮膚過(guò)敏，溶血反應(yīng)，神經(jīng)系統(tǒng)、肝腎和妊娠毒性，心肌損傷等[13]。本草文獻(xiàn)記載的蜈蚣炮制方法大致可分為如下兩類，不加輔料炮制工藝包括烘培法、燒灰、煨、炒炙，加輔料的有酒浸、姜制焙法、薄荷制及酥制等。蜈蚣的毒性主要存在于活體中，高溫炮制能降低毒性和滅菌，加入輔料可起到改善藥性、矯臭矯味的作用[14]。

2.2 抗腫瘤的有效成分 蜈蚣在臨床上被廣泛應(yīng)用于腫瘤治療，綜合前人的研究發(fā)現(xiàn)，蜈蚣毒素、多糖、蜈蚣多肽、堿性蛋白、類組胺物質(zhì)、多種提取物等均報(bào)道過(guò)有抗腫瘤活性。蜈蚣水提物在一定劑量范圍內(nèi)能有效抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，減輕實(shí)體瘤小鼠的瘤質(zhì)量，具有顯著的體內(nèi)抗腫瘤活性。

廖興華[16]研究發(fā)現(xiàn)，蜈蚣小分子多肽類有效部位對(duì)肝癌細(xì)胞有明顯的殺傷作用，并能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡和有效抑制腫瘤生長(zhǎng)，表明在體外有確切的抗腫瘤功效。陳茂華等[17]開(kāi)展體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)研究金頭蜈蚣多糖抗肝癌的作用，結(jié)果顯示金頭蜈蚣多糖能夠使細(xì)胞周期停留在S期，干預(yù)癌細(xì)胞DNA合成、阻斷細(xì)胞分裂，從而抑制人肝癌HepG2細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖，有一定的調(diào)節(jié)小鼠免疫功能。

2.3 抗腫瘤機(jī)制 周永芹等[18]用不同濃度、不同蜈蚣提取物處理荷瘤小鼠，結(jié)果顯示蜈蚣提取物能有效阻礙小鼠宮頸腫瘤生長(zhǎng)，明顯上調(diào)Bax和降低Bcl-2的表達(dá)，相關(guān)的機(jī)制可能是通過(guò)Bax和Caspase-3介導(dǎo)的線粒體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑來(lái)誘導(dǎo)腫瘤組織凋亡和壞死。李興暖等[19]研究發(fā)現(xiàn)，在一定濃度范圍內(nèi)蜈蚣多糖（SSP）可顯著抑制Hela腫瘤細(xì)胞的增殖,進(jìn)一步探索其機(jī)制，提示SSP能影響Hela腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期,使細(xì)胞阻滯于G2/M期，抑制細(xì)胞周期進(jìn)程，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。劉細(xì)平等[20]指出，蜈蚣提取液可通過(guò)下調(diào)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子和促血管生成素2的表達(dá)來(lái)抗新生血管生成、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，從而達(dá)到抑制裸鼠Bel-7404人異位肝癌移植瘤生長(zhǎng)的目的。

3 蟾 酥

3.1 毒性及其炮制工藝 蟾酥是蟾賒科動(dòng)物中華大蟾蜍或黑眶蟾蜍耳后腺及皮膚腺的的干燥分泌物，蟾酥辛、溫，有毒，歸心經(jīng)，具有解毒、止痛、開(kāi)竅醒神的功效。根據(jù)近代醫(yī)學(xué)研究分析，蟾酥的毒性成分為蟾蜍甾烯類、吲哚類生物堿、甾醇等物質(zhì)，蟾蜍甾烯類分為蟾毒配基和蟾蜍毒素兩類，脂蟾毒配類有脂蟾毒配基、華蟾毒精、蟾毒靈等，蟾酥毒素類包括蟾毒、蟾毒配基脂肪酸酯和蟾毒配基硫酸酯等，其中脂蟾毒配基和華蟾酥毒基為主要毒性成分，又是蟾酥的重要有效成分。蟾酥毒性較大用藥不當(dāng)會(huì)引起循環(huán)、消化及神經(jīng)系統(tǒng)等的中毒癥狀，蟾蜍毒素及蟾蜍配基可作用于心臟迷走神經(jīng)中樞或末梢引起心律失常，吲哚烷基類化合物有致幻作用，兒茶酚類化合物能引起微小血管劇烈收縮，導(dǎo)致組織缺血缺氧等[21-22]。研究表明，蟾酥毒性經(jīng)過(guò)煮沸或酒泡后減緩，配伍牛黃能減小毒副作用，故臨床可采用炮制、應(yīng)用新劑型、適當(dāng)配伍等起到降低蟾酥毒性，提高藥效的目的[23]。

3.2 抗腫瘤的有效成分 現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明蟾酥的抗腫瘤有效成分有水溶性和脂溶性兩類，水溶性成分大部分為吲哚類生物堿，有效成分為蟾蜍噻嚀，脂溶性成分可分類為游離型和結(jié)合型化合物，游離型稱為蟾毒配基，如蟾毒靈、蟾毒它靈、華蟾酥毒基等，結(jié)合型稱為蟾蜍毒素等[24]。陳稀煩等[25]研究發(fā)現(xiàn)，從蟾酥皮中提取出來(lái)的華蟾素可顯著降低肺癌模型大鼠的腫瘤體積和血清腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原水平，抑瘤率顯著增加。朱大誠(chéng)等[26]研究發(fā)現(xiàn)蟾酥具有逆轉(zhuǎn)白血病CEM/VCR細(xì)胞多藥耐藥，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡的功效。胡紅珍等[27]研究發(fā)現(xiàn)蟾酥水提取可通過(guò)降低對(duì)子宮頸癌HeLa細(xì)胞外基質(zhì)和基底膜的降解，而削弱細(xì)胞侵襲力，阻止癌細(xì)胞的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，同時(shí)能在體外誘導(dǎo)HeLa細(xì)胞凋亡。

3.3 抗腫瘤機(jī)制 牛天力等[28]研究發(fā)現(xiàn)華蟾酥毒基能夠較好地抑制前列腺癌PC3細(xì)胞的增殖，顯著促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，其可能是通過(guò)降低抗凋亡蛋白髓樣細(xì)胞白血病-1蛋白表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。何春鋒等[29]采用CCK-8法和流式細(xì)胞術(shù)證明了蟾毒靈能導(dǎo)致人膀胱癌細(xì)胞株T24細(xì)胞周期停滯于G0/G1期，延緩細(xì)胞周期的進(jìn)展，從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制增殖。馮靜等[30]研究發(fā)現(xiàn)蟾酥作用于肝癌HepG2細(xì)胞，可以殺傷腫瘤細(xì)胞并阻礙增殖和誘導(dǎo)其凋亡，凋亡機(jī)制與蟾酥能引起線粒體膜電位下降，同時(shí)與活化凋亡相關(guān)因子Caspase9/3有聯(lián)系。

4 土鱉蟲(chóng)

4.1 毒性及其炮制工藝 土鱉蟲(chóng)為鱉蠊科昆蟲(chóng)地鱉或冀地鱉的雌蟲(chóng)干燥體，是一味傳承久遠(yuǎn)、藥理活性廣泛的動(dòng)物類藥材，早在秦漢時(shí)期就開(kāi)始用于預(yù)防和治療疾病?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》記載土鱉蟲(chóng)“味咸、性寒、有微毒”,有破血逐瘀、續(xù)筋接骨之功效，目前對(duì)于土鱉蟲(chóng)的毒性成分研究較少，其毒性可能來(lái)源于所含的生物堿。田軍鵬[31]開(kāi)展土鱉蟲(chóng)生物堿提取物的急性毒理研究后發(fā)現(xiàn)，土鱉蟲(chóng)生物堿提取物對(duì)小鼠半數(shù)致死劑量為294.26 mg/kg，95%置信區(qū)間（CI）為（373.77，231.63）mg/kg，屬中等毒性物質(zhì)，但與全蟲(chóng)的毒理作用區(qū)別較大。人體應(yīng)用土鱉蟲(chóng)發(fā)生的中毒癥狀為皮膚過(guò)敏、全身乏力、腹痛、治療量出現(xiàn)人竇性心率減慢等。在臨床使用，雜質(zhì)較多，主要是土鱉蟲(chóng)腹內(nèi)容物較多，影響了藥物的質(zhì)量和臨床用藥的劑量準(zhǔn)確性，故炮制多以去除雜質(zhì)的凈土鱉蟲(chóng)炒制為主，亦有酒制，文火焙干。不僅去除了雜質(zhì)、降低了毒性，也提高了藥效[32]。

4.2 抗腫瘤的有效成分 近年來(lái)，藥用土鱉蟲(chóng)抗腫瘤活性成分的研究取得了一定的進(jìn)展，研究人員指出土鱉蟲(chóng)抗腫瘤有效成分為脂溶性脂肪酸、纖溶活性蛋白、多糖、多種提取物等。張東梅等[33]發(fā)現(xiàn)地鱉蟲(chóng)活性蛋白對(duì)人舌癌細(xì)胞Tea-8113有直接殺傷和抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用，有較強(qiáng)的體外抗腫瘤活性。葛鋼鋒等[34]研究發(fā)現(xiàn)，土鱉蟲(chóng)醇提物能有效的抑制人肝癌細(xì)胞株和人胃癌細(xì)胞株的增殖，同時(shí)還能促進(jìn)人肝癌細(xì)胞株的凋亡，并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系。

4.3 抗腫瘤機(jī)制 李興暖等[35]將地鱉蟲(chóng)纖溶活性蛋白組分作用于體外培養(yǎng)的Hela腫瘤細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞周期被阻斷在G2/M期，不能進(jìn)行分裂生長(zhǎng)，從而抑制腫瘤細(xì)胞的增殖，最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。韓雅莉等[36]采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)土鱉蟲(chóng)纖溶活性蛋白對(duì)小鼠S180和H22實(shí)體瘤組織細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用，結(jié)果顯示是通過(guò)下調(diào)瘤細(xì)胞端粒酶活性，增加Caspase-3表達(dá)水平，從而達(dá)到誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的目的。

5 展 望

在我國(guó)秦漢時(shí)期就開(kāi)啟了運(yùn)用藥性劇烈的有毒中藥治療惡性腫瘤的先河，應(yīng)用動(dòng)物類有毒中藥以毒攻毒治療腫瘤歷史悠久，經(jīng)過(guò)多代醫(yī)者大量臨床觀察與反復(fù)實(shí)踐驗(yàn)證后取得較好成果，并成為了一大特色。尤其隨著近代中藥毒理學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)、分子生物學(xué)等現(xiàn)代醫(yī)學(xué)逐漸融入到有毒藥物抗癌研究中，其主要毒性、發(fā)揮藥效成分及作用機(jī)制的研究取得了一定的進(jìn)展，這為有毒中藥合理使用提供了科學(xué)依據(jù)。目前華蟾素注射液、去甲斑蝥素等從毒性動(dòng)物類中藥中提取開(kāi)發(fā)出來(lái)的抗癌中成藥已在臨床使用數(shù)年，且療效顯著。然而，動(dòng)物類有毒中藥本身具有的毒性也限制了其臨床使用范圍和程度，其有毒成分可分為非有效成分和有效成分的活性成分，對(duì)于前者可除去毒性部位，后者在應(yīng)用中可結(jié)合現(xiàn)代制藥工藝運(yùn)用新炮制工藝、藥物配伍、分離純化技術(shù)、有機(jī)化學(xué)等方法以期減少毒性，降低不良反應(yīng)，提高藥物的生物利用度和臨床療效。在中醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，融入現(xiàn)代科學(xué)理論和技術(shù)，有毒類動(dòng)物藥有望能更好的應(yīng)用在腫瘤患者身上。