賴玉青，鄧國生

頸部透明層(nuchal translucency,NT)是早孕期胎兒頸后皮膚下液體積聚，超聲征象表現(xiàn)為頸后無回聲區(qū)[1]。目前關(guān)于NT增厚的截斷值仍存在爭議，臨床上一般將NT≥2.5 mm或NT≥3.0 mm視為NT增厚[2]。早孕期胎兒NT增厚與染色體異常、結(jié)構(gòu)異常密切相關(guān)。目前，染色體核型分析是診斷染色體疾病的金標準。本研究通過分析72例NT增厚胎兒的核型，探討NT增厚與胎兒的染色體異常風(fēng)險及妊娠結(jié)局情況的關(guān)聯(lián)性，現(xiàn)報告如下。

1 對象與方法

1.1研究對象 選擇2019-01～2020-04在我院優(yōu)生遺傳科就診的NT增厚(NT≥2.5 mm)胎兒72例，均于妊娠早期經(jīng)超聲檢查確診，并行絨毛染色體核型檢測。孕婦年齡21～40歲，孕周11～13+6周。其中單純性NT增厚54例，NT增厚且合并其他超聲特征異常(包括頸部水囊瘤、鼻骨未顯示、淋巴水囊瘤、腹部液性暗區(qū)、臍膨出、心臟結(jié)構(gòu)異常、全身皮膚水腫、臍帶根部稍強回聲團、靜脈導(dǎo)管血流異常、頸部無回聲區(qū)、胎兒A波倒置、露腦畸形等)18例。本研究獲我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(批號YX20200306-3)，所有研究對象簽署知情同意書。

1.2研究方法

1.2.1 絨毛染色體核型分析 在超聲引導(dǎo)下經(jīng)腹穿刺絨毛10～20 mg，用0.9%無菌NaCl溶液清洗干凈后在日本奧林巴斯SZ61雙目體視顯微鏡下挑選出絨毛組織，經(jīng)手術(shù)刀片剁碎，0.25%胰酶消化，并接種于3 ml羊水細胞培養(yǎng)基(廣州白云山)的培養(yǎng)瓶中，置37 ℃，5%CO2條件培養(yǎng)(美國Thermo Forma 3111 CO2培養(yǎng)箱)。后經(jīng)傳代、收獲細胞和制片，將制好的片分AB線各1～2張，采用德國蔡司AXIO Imager.Z2全自動掃描儀進行掃描，應(yīng)用Metasystem分析軟件進行分析。常規(guī)計數(shù)20個細胞，分析5個細胞的核型。

1.2.2 超聲測量NT及分組方法 采用日本東芝TOSHIBA APLIO400彩色多普勒彩超診斷儀、PVT-674BT10C3經(jīng)腹部探頭頻率3～10 MHz進行測量，測量時胎兒頭臀長為45～84 mm，相當(dāng)于11～13+6孕周。NT測量在正中矢狀切面上進行，此切面亦是測量頭臀長的標準切面。應(yīng)盡可能放大圖像至只顯示胎兒頭頸部及上胸部，使測量游標的輕微移動只改變測量結(jié)果的0.1 mm。并根據(jù)NT的增厚情況將研究對象分為2.5 mm≤NT<3.5 mm組(30例)、3.5 mm≤NT<4.5 mm組(25例)和NT≥4.5 mm組(17例)。

1.3隨訪 隨訪通過電話方式進行，隨訪內(nèi)容：(1)絨毛膜穿刺術(shù)后7 d胎兒丟失情況；(2)妊娠結(jié)局,包括終止妊娠、繼續(xù)妊娠情況；(3)分娩時間、方式及分娩孕周；(4)新生兒性別及出生體重；(5)新生兒出生后外觀有無畸形及其一般生長發(fā)育情況。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料以例數(shù)(百分率)[n(%)]表示，組間比較采用χ2檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1染色體核型情況 在72例NT增厚胎兒中，檢出染色體異常22例(30.56%)。其中21三體8例(11.11%)，18三體5例(6.94%)，45,X 4例(5.56%)，13三體2例(2.78%)，47,XYY 1例(1.39%)，平衡易位1例(1.39%)，嵌合體1例(1.39%)。

2.2三組染色體核型異常率比較 檢測結(jié)果顯示，2.5 mm≤NT<3.5 mm組、3.5 mm≤NT<4.5 mm組和NT≥4.5 mm組的染色體核型異常率分別為16.67%(5/30)、24.00%(6/25)和64.71%(11/17)，三組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=12.577,P=0.002)。其中，NT≥4.5 mm組染色體核型異常率顯著高于2.5 mm≤NT<3.5 mm組和3.5 mm≤NT<4.5 mm組(P<0.05)，2.5 mm≤NT<3.5 mm組與3.5 mm≤NT<4.5 mm組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

2.3NT增厚特征與染色體核型異常的關(guān)聯(lián)性 54例單純性NT增厚者中檢出染色體異常11例(20.37%)，18例NT增厚合并其他超聲特征異常者中檢出染色體異常11例(61.11%)，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=10.560,P=0.001)。

2.4妊娠結(jié)局 從抽取絨毛1周起隨訪至胎兒足月分娩。72例NT增厚胎兒，絨毛膜穿刺術(shù)后7 d無胎兒丟失。22例終止妊娠，其中因嚴重致死、致殘染色體病終止妊娠16例(包括21三體8例，18三體5例，13三體2例，嵌合體1例)，應(yīng)孕婦及其家屬要求選擇終止妊娠5例(包括45,X 4例，47,XYY 1例)，NT增厚合并顱內(nèi)結(jié)構(gòu)異常終止妊娠1例。成功分娩50例，其中1例右耳前發(fā)現(xiàn)5 mm×5 mm肉芽腫性贅生物，其余均存活，無明顯不良預(yù)后。

3 討論

3.1目前在產(chǎn)前診斷染色體疾病的檢查中，G顯帶染色體核型分析是臨床常用的檢測方法，可以檢測出染色體的數(shù)目異常和結(jié)構(gòu)異常。本研究72例NT增厚胎兒中檢出染色體異常22例(30.56%)，以21三體為主(11.11%)。21三體是21號染色體在減數(shù)分裂過程中不分離或姐妹染色單體提前分離所致。歐陽魯平等[3]報道的130例胎兒NT增厚病例中，異常核型檢出率為26.9%(35/130)，亦以21三體為主(7.69%)。莫偉英等[4]報道的62例NT增厚胎兒中，21三體檢出率達6.45%，說明NT增厚胎兒21三體檢出率較高。國外學(xué)者[5]的研究顯示，NT增厚胎兒中染色體核型異常發(fā)生率達14.2%。因此，在超聲軟指標中，NT增厚可作為胎兒染色體異常診斷的強指標[6]。本次研究有22例孕婦選擇終止妊娠，成功分娩50例，其中1例右耳前發(fā)現(xiàn)5 mm×5 mm肉芽腫性贅生物，其余均存活，無明顯不良預(yù)后。

3.2早孕期胎兒NT增厚與染色體異常等密切相關(guān)，且NT增厚的程度越大，胎兒染色體異常的風(fēng)險越高。本研究結(jié)果顯示，2.5 mm≤NT<3.5 mm組、3.5 mm≤NT<4.5 mm組和NT≥4.5 mm組的染色體核型異常率分別為16.67%(5/30)、24.00%(6/25)和64.71%(11/17)，三組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=12.577,P=0.002)。其中NT≥4.5 mm組染色體核型異常率顯著高于2.5 mm≤NT<3.5 mm組和3.5 mm≤NT<4.5 mm組(P<0.05)，2.5 mm≤NT<3.5 mm組和3.5 mm≤NT<4.5 mm組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。這與馬瑩和陳奕[7]的研究結(jié)果相似。薛淑雅等[8]的研究報道也提示，NT增厚的程度與染色體異常具有關(guān)聯(lián)。

3.3本研究結(jié)果顯示，單純性NT增厚胎兒的染色體異常發(fā)生率顯著低于NT增厚合并其他超聲特征異常者(20.37% vs 61.11%，P<0.05)，提示NT增厚且合并其他超聲特征異常時，胎兒染色體異常風(fēng)險更高，這與相關(guān)文獻[5，8～10]結(jié)果相似。染色體核型分析是目前應(yīng)用最為廣泛的產(chǎn)前診斷手段，也是診斷染色體疾病的金標準[11～13]，然而其常受到細胞培養(yǎng)成功率、細胞分裂指數(shù)及標本質(zhì)量的影響，且不利于快速診斷,也不能檢出染色體片段<5 Mb的微小缺失及微重復(fù)[14，15]。染色體微陣列分析(chromosomal microarray analysis，CMA)能夠檢出100 kb以上染色體微小缺失及微重復(fù)[8]，能在一定程度上彌補染色體核型分析的不足，這可能會是將來分子遺傳技術(shù)發(fā)展方向。

綜上所述，孕早期胎兒NT增厚與染色體異常密切相關(guān)，NT增厚的程度越大，胎兒發(fā)生染色體異常的風(fēng)險越高；且超聲提示NT增厚合并其他異常指征時，胎兒染色體異常風(fēng)險更高。