李東棋，劉慧霞，田 理

(1.成都中醫(yī)藥大學(xué)，四川 成都 610000；2.成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，四川 成都 610000)

變應(yīng)性鼻炎(Allergic rhinitis，AR)，是由IgE介導(dǎo)的一種鼻黏膜慢性反應(yīng)性炎癥。AR是一個全球性健康問題，影響世界約40%的人口，流行病學(xué)研究表明，AR的患病率不僅在發(fā)達(dá)國家逐漸增加，而且在包括中國在內(nèi)的發(fā)展中國家也呈上升趨勢[1]。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，目前兒童為AR的高發(fā)群體，并以每年0.37%的速度增長[2]，因此更好地治療變應(yīng)性鼻炎患者成為耳鼻喉科研究的熱點。變應(yīng)性鼻炎在中醫(yī)學(xué)中稱為“鼻鼽”，治療多以補(bǔ)益肺氣、活血通竅為主，而芪丹益肺口服液以玉屏風(fēng)散為主方補(bǔ)益肺氣，又加入丹皮、川芎等活血化瘀、通利鼻竅，具有頗好的臨床療效。為此，本實驗建立了變應(yīng)性鼻炎大鼠模型，觀察芪丹益肺口服液的治療作用并判斷其對肝腎功能的影響，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 材料

1.1 實驗動物

SPF級SD大鼠，體質(zhì)量(230±10)g，雌雄各16只，由成都達(dá)碩實驗動物有限公司提供，生產(chǎn)許可證號：SCXK(川)2020-030。飼養(yǎng)房間采用12/12 h明暗交替照明，由中央控制室監(jiān)控并記錄，保持溫度20～26 ℃，相對濕度40%～70%，實驗動物使用許可證號：SYXK(川)2015-127。

1.2 藥物

芪丹益肺口服液(蜜制黃芪、生白術(shù)、防風(fēng)、牡丹皮、酒川芎、竹葉柴胡、酒黃芩、生荊芥、白芷、訶子、生甘草)(濃度約0.423 g/mL)，成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥劑科提供；氯雷他定片，批號：H20040797，海南海神同洲制藥有限公司生產(chǎn)；卵清蛋白(OVA)，批號：A5503-5G，Sigma-Aldrich公司生產(chǎn)；氫氧化鋁，大連美侖生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)；HyclonePBS緩沖液，杭州仟諾生物科技有限公司。

1.3 試劑

①0.3% OVA+AL(OH)3溶液的配置：稱取卵清蛋白0.3 mg+氫氧化鋁粉末30 mg+生理鹽水1 mL，混勻，備用；②0.5% OVA+HyclonePBS緩沖液的配置：稱取 0.5 g OVA +10 mL HyclonePBS緩沖液，混勻，備用；③檢測試劑：谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、白蛋白、總膽紅素、堿性磷酸酶、葡萄糖、尿酸、尿素及肌酐檢測試劑盒，購買于羅氏公司。

1.4 儀器

電子天平，型號：ML6001/02，梅特勒-托利多儀器(上海)有限公司；高速冷凍離心機(jī)，型號：ST16R，賽默飛世爾科技(中國)有限公司；全自動生化分析儀，型號：cabos c501，Roche公司。

2 方法

2.1 變應(yīng)性鼻炎大鼠模型的建立

將雌雄各16只大鼠按照體質(zhì)量隨機(jī)分為空白組、AR模型組、中藥組、西藥組，每組各8只。模型的建立分為基礎(chǔ)致敏和局部激發(fā)2個步驟?；A(chǔ)致敏將制好的0.3% OVA+AL(OH)3溶液，注入大鼠腹腔，隔天1次，共7次；局部激發(fā)將0.5%OVA+HyclonePBS緩沖液滴鼻，每個鼻孔50 μL，連續(xù)7 d滴鼻。在末次致敏30 min內(nèi)觀察鼻癢、噴嚏、流涕指標(biāo)并疊加定量評分進(jìn)行評價，總分>5分則造模成功(見表1)。

表1 大鼠鼻炎癥狀評分

2.2 給藥

建立模型的第22天開始給藥，按照每100 g大鼠1 mL給藥量給藥?？瞻捉M及AR模型組給予蒸餾水，中藥組給予芪丹益肺口服液，西藥組給予氯雷他定片。

2.3 樣品的采集與檢測

于末次給藥后24 h取全血約3 mL，3 000 r/min，15 ℃離心約15 min，取血清放置于潔凈干燥的0.6 mL EP管中，置于-20 ℃冰箱中保存。樣品中谷草轉(zhuǎn)氨酶、堿性磷酸酶、白蛋白、尿酸、尿素的含量采用比色法進(jìn)行檢測；谷丙轉(zhuǎn)氨酶的含量采用IFCC法進(jìn)行檢測；總膽紅素的含量采用重氮法進(jìn)行檢測；葡萄糖的含量采用己糖激酶法進(jìn)行檢測；肌酐的含量采用酶法進(jìn)行檢測。檢測方法均嚴(yán)格按照各試劑盒說明書進(jìn)行檢測。

2.4 統(tǒng)計方法

3 結(jié)果

3.1 造模結(jié)果判斷及各組大鼠變應(yīng)性鼻炎癥狀總分比較

將各組大鼠治療前后的評分及各組間的癥狀總分進(jìn)行比較。由表2可知，組間比較，治療前模型組、中藥組、西藥組與空白組對比結(jié)果均具統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；治療后，AR模型組與空白組對比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；中藥組及西藥組與AR模型組對比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。組內(nèi)比較，與本組治療前比較，中藥組及西藥組癥狀評分均有明顯下降，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

表2 大鼠變應(yīng)性鼻炎癥狀總分比較

3.2 各組大鼠治療后肝腎功指標(biāo)的對比

通過觀察對比表3中各組間指標(biāo)值的變化，比較組間及同組間雌雄兩性的差異，發(fā)現(xiàn)組間比較時，4組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；尿素(UREA)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、堿性磷酸酶(ALP)及肌酐(CREA)指標(biāo)的會受到雌雄性別的影響(P<0.01)。

表3 大鼠血清中肝腎功各項指標(biāo)的水平對比

4 討論

AR是發(fā)生在鼻黏膜的I型變態(tài)反應(yīng)，是以 IgE為主導(dǎo)，多種細(xì)胞因子和免疫細(xì)胞參與的非特異性炎癥反應(yīng)。目前，治療AR主要以抗組胺藥、糖皮質(zhì)激素、抗白三烯藥、色酮類藥、鼻內(nèi)減充血劑、鼻內(nèi)抗膽堿能藥物及中藥為主[3]，但由于變應(yīng)性鼻炎反復(fù)難愈的特點，長期使用抗組胺藥、糖皮質(zhì)激素類等藥物，可能會使年齡偏小的兒童產(chǎn)生頭暈、乏力、口干、惡心、嗜睡等不良反應(yīng)[4]。而且AR對于兒童的影響不僅局限于鼻部的炎性癥狀，也存在眼部炎癥及中耳炎發(fā)作的可能[5]，因此AR的治療方案和藥物選擇須兼顧整體并慎重用藥。

中醫(yī)藥治療AR優(yōu)勢顯著。中醫(yī)治療“鼻鼽”多從補(bǔ)益肺脾兩臟入手，加以活血藥物通利鼻竅。芪丹益肺口服液主要由蜜制黃芪、生白術(shù)、防風(fēng)、牡丹皮、酒川芎、白芷等組成，適用于肺脾氣虛，瘀阻鼻竅證。方中蜜黃芪為君，大補(bǔ)肺脾之氣，與白術(shù)、防風(fēng)合用則為玉屏風(fēng)散，具有益氣固表，驅(qū)邪外出的功效；牡丹皮、酒川芎、白芷活血化瘀通竅，兼以行氣。諸藥合用有補(bǔ)氣而不閉邪，活血而不傷正氣之特點。

本實驗結(jié)果表明，芪丹益肺口服液與氯雷他定一樣皆可有效緩解變應(yīng)性鼻炎的癥狀，通過組間比較發(fā)現(xiàn)，治療后中藥組與西藥組的鼻炎癥狀評分，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。在探討芪丹益肺口服液對肝腎功影響時，組間比較結(jié)果顯示，大鼠血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、總膽紅素(TBIL)、堿性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)、尿酸(UA)、尿素(UREA)、及肌酐(CREA)的水平，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。但組內(nèi)雌雄兩性比較發(fā)現(xiàn)，尿素(UREA)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、堿性磷酸酶(ALP)及肌酐(CREA)指標(biāo)會受到雌雄性別的影響。這說明芪丹益肺口服液安全有效，可用于長期用藥及肝腎功能不良的患者。

綜上，芪丹益肺口服液適用于肺脾氣虛、瘀阻鼻竅證，對于AR的治療效果不低于氯雷他定，且對肝腎無損傷，值得臨床推廣。目前，AR患兒逐漸增加，但適合長期使用的藥物不多，中醫(yī)藥在AR的預(yù)防與治療中則優(yōu)勢明顯。幼兒臟腑嬌嫩，易受外邪侵襲，出現(xiàn)肺脾兩虛證，芪丹益肺口服液補(bǔ)肺健脾，驅(qū)邪外出，不僅減輕了鼻炎的局部癥狀，且可調(diào)整患者的整體機(jī)能，療效確切。