王虹雅,陳胡羚,李思峰,嚴(yán)元寵,田國(guó)泰,李崇婕,王 軍,李引乾*

(1.西北農(nóng)林科技大學(xué) 動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西楊陵 712100；2.陜西省畜牧技術(shù)推廣總站，陜西西安 710016；3.西安泰樂星生物科技有限公司，陜西西安 710000)

增益素(益新愛可)是一種新型生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑和免疫增強(qiáng)劑[1]。西安泰樂星生物科技有限公司在“多抗甲素(polyactin A，PAA)”基礎(chǔ)上[2-3]，對(duì)菌種誘變選育使其生物活性提高了3～5倍。其生產(chǎn)的動(dòng)物專用高效免疫調(diào)節(jié)劑含多種生物活性物質(zhì)，進(jìn)入消化道后，被消化酶分解為多種聚糖、低聚糖和堿性多肽等活性成分發(fā)揮作用。增益素具有免疫調(diào)節(jié)、吸附病原體和霉菌毒素的作用，同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生多種維生素和消化酶，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化和吸收。本試驗(yàn)旨在研究西安泰樂星生物科技有限公司生產(chǎn)的增益素對(duì)雛雞的生長(zhǎng)發(fā)育、免疫功能、生長(zhǎng)激素水平的影響，為該產(chǎn)品的開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)。

1. 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)藥品 增益素由西安泰樂星生物科技有限公司提供，主要成分為 α-甘露聚糖、堿性多肽、α-甘露寡糖等，1 kg/袋。新城疫Ⅳ系+傳染性支氣管炎H120疫苗，哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司。法氏囊弱毒疫苗，哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司。新城疫+傳染性支氣管炎+禽流感((H5+H7)二價(jià)滅活疫苗(細(xì)胞源，H5N1 Re-11株+H7N9 H7-Re2株)，山東濱州沃華生物工程有限公司。雞新城疫Ⅳ系凍干活疫苗，哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司。雞生長(zhǎng)激素(GH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒，西安晶彩生物科技有限公司。

1.1.2 試驗(yàn)用動(dòng)物 1日齡健康、體質(zhì)量相近且同批孵化的羅曼粉蛋雛雞 200只，雌雄各半，購(gòu)自楊陵巨隆禽業(yè)有限公司養(yǎng)雞場(chǎng)。

1.1.3 儀器設(shè)備 電子分析天平(FA2004)，上海恒平公司產(chǎn)品；低溫高速離心機(jī)(TD-4M)，山東博科科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；酶標(biāo)儀(DG5030)，南京華東電子集團(tuán)公司產(chǎn)品；96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板。

1.2 方法

1.2.1 動(dòng)物分組及處理 采用單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)，將200只雛雞隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只雞。按產(chǎn)品說明書將原藥液100倍稀釋。高、中、低3個(gè)試驗(yàn)組的稀釋液用量為2.5、1.25、0.63 mL/只。 現(xiàn)用現(xiàn)配，當(dāng)日用完。每個(gè)試驗(yàn)組每日早晨給新鮮配制含藥飲水1次，水杯每日沖洗清潔。另設(shè)不做任何添加處理僅提供清潔飲水的對(duì)照組。試驗(yàn)持續(xù)31 d。

1.2.2 增益素對(duì)雛雞生長(zhǎng)發(fā)育的影響 分別在1日齡、7日齡、14日齡、21日齡、28日齡時(shí)，每組10只抽樣，單只空腹稱體重；同時(shí)每組5只抽樣處死，采取消化道、氣管、脛骨進(jìn)行長(zhǎng)度測(cè)量(單位/cm)；采集消化道、肺、肝、腎進(jìn)行重量測(cè)量(單位/g)；采集免疫器官組織(胸腺、脾臟、法氏囊)進(jìn)行重量測(cè)量，計(jì)算器官指數(shù)。計(jì)算公式為：免疫器官指數(shù)=免疫器官質(zhì)量/體質(zhì)量

1.2.3 雞新城疫血清抗體(HI抗體)水平檢測(cè) 1日齡、14日齡、21日齡和28日齡時(shí)，免疫接種前后每組抽樣8只，采用血凝抑制試驗(yàn)[4]測(cè)定雞新城疫血清抗體效價(jià)(HI抗體)。

1.2.4 雞血清樣本中生長(zhǎng)激素(GH)含量測(cè)定 14、28日齡時(shí)，每組抽樣5只，按試劑盒操作說明書，測(cè)定雞血清內(nèi)源性生長(zhǎng)激素水平。

2 結(jié)果

2.1 增益素對(duì)雛雞生長(zhǎng)發(fā)育的影響

2.1.1 增益素對(duì)雛雞體重的影響 在本試驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，給雛雞添加增益素后，可顯著提高其體重。同期試驗(yàn)組雞體重水平顯著高于對(duì)照組；試驗(yàn)組間高劑量組顯著高于低劑量組 (P<0.05)，中劑量組極顯著高于低劑量組(P<0.01)(表1)。

表1不同日齡雛雞體重

2.1.2 增益素對(duì)雛雞組織器官的影響 對(duì)于肝、肺、腎、消化道、氣管、脛骨等組織器官，第2周后，高、中劑量組與低劑量組、對(duì)照組有一定差異，高、中劑量組間，低劑量和對(duì)照組間無差異；第3周后，中、低劑量組與對(duì)照組差異極顯著，中高之差異不顯著；第4周后，高、中、低劑量組和對(duì)照組差異極顯著(P<0.01)。4周后對(duì)照組和低、中、高劑量組差異增大，且表現(xiàn)為重量/長(zhǎng)度隨增益素用量增加而增加(表2和表3)。試驗(yàn)中雞未見臨床中毒癥狀,剖檢后也無組織器官病理變化。故在該試驗(yàn)劑量下,給雞每天 1 次,連續(xù) 4 周(中劑量連續(xù)2周)添加增益素是安全的。

表2不同日齡雛雞組織器官重量

表3不同日齡雛雞不同組織器官長(zhǎng)度

2.2 增益素對(duì)雛雞免疫器官指數(shù)的影響

免疫器官如法氏囊、胸腺、脾等在第1、2周高劑量組與對(duì)照組差異極顯著(P<0.01)，第4周高中低劑量組差異顯著，中、低劑量組與對(duì)照組差異顯著(P<0.05)，說明該增益素對(duì)雞免疫器官的發(fā)育作用強(qiáng)度高，可用于提高雞免疫力(表4)。

2.3 雞新城疫血清抗體(HI抗體)水平檢測(cè)

對(duì)照組和低劑量組新城疫抗體(ND-HI) 水平在21日齡后明顯低于高劑量組和中劑量組，說明“增益素”配合新城疫疫苗可以顯著增強(qiáng)免疫力(表5)。

2.4 雛雞血清樣本中生長(zhǎng)激素(GH)含量測(cè)定

在雛雞飲水中添加不同濃度的免疫調(diào)節(jié)劑，能夠顯著或極顯著地提高雛雞血液中 GH的濃度，且激素水平隨著免疫調(diào)節(jié)劑添加水平的增加而升高(表6)。

表4增益素對(duì)雞免疫器官指數(shù)的影響

表5不同日齡雞新城疫血清抗體(HI抗體)水平

表6雞血清樣本中生長(zhǎng)激素(GH)水平(OD均值)

3 討論

免疫增強(qiáng)劑效應(yīng)的靶細(xì)胞為免疫細(xì)胞、骨髓造血干細(xì)胞、黏膜上皮細(xì)胞。主要靶器官為免疫器官、消化道、肺、肝、腎、生殖器官等。免疫增強(qiáng)劑配合豬偽狂犬病疫苗可以顯著提高疫苗的保護(hù)率[5]。飲服增益素可增強(qiáng)雛雞對(duì)致病性大腸埃希氏菌的抵抗力。本試驗(yàn)從免疫器官指數(shù)的增長(zhǎng)對(duì)比證明增益素對(duì)雛雞存在顯著的免疫增強(qiáng)作用，具有刺激免疫系統(tǒng)，促進(jìn)免疫器官發(fā)育，增強(qiáng)基礎(chǔ)免疫力和抗體應(yīng)答能力，可協(xié)同新城疫疫苗顯著提高疫苗保護(hù)率。本試驗(yàn)還揭示，從雛雞出殼至28日的定期稱重和器官稱重，顯示增益素對(duì)雛雞肺臟、腎臟、肝臟等器官、消化道，以及骨骼生長(zhǎng)，內(nèi)源性激素調(diào)節(jié)具有刺激作用，可促進(jìn)雛雞的生長(zhǎng)發(fā)育。綜合免疫器官指數(shù)和生長(zhǎng)發(fā)育情況，試驗(yàn)組能明顯地促進(jìn)雛雞生長(zhǎng)發(fā)育和免疫器官發(fā)育。

增益素可通過增強(qiáng)細(xì)胞殺傷活性，激活單核巨噬細(xì)胞系統(tǒng)吞噬功能、增加外周血白細(xì)胞數(shù)目及增強(qiáng)骨髓造血作用等多種途徑來提高機(jī)體的免疫功能[6-7]。對(duì)淋巴細(xì)胞有直接激活作用，能促進(jìn)胸腺淋巴細(xì)胞分化與增殖，促進(jìn)補(bǔ)體和IL-1的生成，提高機(jī)體的應(yīng)激能力。甘露聚糖可輔助治療多種臨床疾病，有效維持患者的免疫水平[8-10]。增益素可作為免疫增強(qiáng)劑、組織修復(fù)劑，配合畜禽免疫接種和治療，防控疾病，特別適合于幼齡培育期或成年高產(chǎn)期等易感階段。增益素也可以在無抗養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域發(fā)揮其獨(dú)特功效，防病促生長(zhǎng)，作為一種綠色健康的優(yōu)秀產(chǎn)品在無抗飼料里添加，能夠最大限度的提升生產(chǎn)效益，保障畜產(chǎn)品安全，發(fā)揮最大生產(chǎn)潛力。