程麗娟樂治平易 航* 何純斌楊 明文萬江

（1 南昌大學(xué)，江西 南昌 330000；2 江西濟民可信藥業(yè)有限公司，江西 宜春 336000）

阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物β-環(huán)糊精包合工藝研究

程麗娟1樂治平1易 航2* 何純斌2楊 明2文萬江2

（1 南昌大學(xué)，江西 南昌 330000；2 江西濟民可信藥業(yè)有限公司，江西 宜春 336000）

目的 應(yīng)用多指標(biāo)綜合評分法結(jié)合正交設(shè)計，優(yōu)選阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物β-環(huán)糊精最佳包合工藝。方法 以包合物油利用率、包合物含油率、包合物收得率為考察指標(biāo)，經(jīng)多指標(biāo)綜合評分法結(jié)合正交設(shè)計，考察油狀物/β-環(huán)糊精（mL/g）、包合時間、包合溫度、乙醇/油狀物（%）等因素，最終確立阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物β-環(huán)糊精最佳包合工藝。結(jié)果 最佳包合工藝：即油狀物/β-環(huán)糊精為1∶10，包合溫度為40 ℃，乙醇/油狀物為20%，包合1 h。結(jié)論 采用多指標(biāo)評分法結(jié)合正交設(shè)計優(yōu)選得到阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物最佳包合工藝，為阿歸養(yǎng)血顆粒制備及相關(guān)研究提供了一定理論依據(jù)。

阿歸養(yǎng)血顆粒；油狀物；β-環(huán)糊精；包合

阿歸養(yǎng)血顆粒是由當(dāng)歸、川芎、阿膠、黨參、白芍等藥材加工制成的顆粒劑，具有補氣養(yǎng)血之功效，主要用于面色萎黃，頭暈乏力，肌肉消瘦，經(jīng)閉，赤白帶下等癥狀。然而該顆粒油狀物氣味較濃，刺激性較強，不利于患者服用，且成分易受溫度和光照影響，不穩(wěn)定。本研究應(yīng)用β-環(huán)糊精將上述油狀物進行包合處理，采用多指標(biāo)綜合評分法結(jié)合正交實驗設(shè)計，優(yōu)選得到阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物β-環(huán)糊精最佳包合工藝。

1 儀器與材料

XL-250兩級膠體磨（溫州精密儀表機床廠），揮發(fā)油測定器（上海玻璃儀器廠），DF-101S型集熱式恒溫加熱磁力攪拌器（鞏義市英峪予華儀器廠），BT25S型電子分析天平（德國Startorius公司），KQ-250VDB型雙頻數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

2 方法與結(jié)果

2.1 包合物制備方法的考察[1-2]

2.1.1 飽和水溶液法：取適量的β-環(huán)糊精，加入一定量的蒸餾水，在規(guī)定溫度下配制成飽和水溶液。另取上述油狀物適量，用適量無水乙醇溶解，緩慢加入上述飽和水溶液中，保溫攪拌一定時間，使成混懸態(tài)，冷藏24 h，抽濾，得白色沉淀物，用石油醚清洗，干燥，即得。

2.1.2 超聲波法：取適量的β-環(huán)糊精，制成規(guī)定溫度下的飽和溶液，定量加入無水乙醇溶解的上述油狀物，置超聲波清洗器中按規(guī)定時間超聲處理，冷藏24 h，抽濾，得白色沉淀物，用石油醚清洗，干燥，即得。

2.1.3 膠體磨法：取適量β-環(huán)糊精，置膠體磨中，加入一定量的蒸餾水，在規(guī)定溫度下緩慢定量加入上述無水乙醇溶解的上述油狀物，按規(guī)定時間研磨，冷藏24 h，抽濾，得白色沉淀物，用石油醚清洗，干燥，即得。

2.2 揮發(fā)油空白回收率實驗：精密量取揮發(fā)油1 mL，置500 mL圓底燒瓶中，加蒸餾水200 mL。按照《中國藥典》（2010年版）一部附錄頁揮發(fā)油測定法項下甲法測定。測得揮發(fā)油的回收率為77%?；厥章剩?）=測得揮發(fā)油量/加入揮發(fā)油量×100%。包合物得收率=包合物重量/β-環(huán)糊精+投入揮發(fā)性重量×100%。包合物油利用率=包合物中揮發(fā)性成分量/投入揮發(fā)性重量×100%。以上結(jié)果見表1。

表1 3種包合方法的結(jié)果比較

以上結(jié)果表明，超聲波法和膠體磨法包合效果較好，從生產(chǎn)成本以及生產(chǎn)操作考慮，后者實用，且快速、簡便，適合工業(yè)化生產(chǎn)。因此，我們選用膠體磨法作為阿歸養(yǎng)血顆粒中包合物的制備方法。

2.3 膠體磨法包合工藝的優(yōu)化

2.3.1 正交實驗設(shè)計：本研究主要考察了影響包合效果的關(guān)鍵參數(shù)油與β-環(huán)糊精的配比、研磨時間、溶解油的乙醇用量以及包合溫度等因素，設(shè)置3個水平，采用L934正交實驗設(shè)計表，以包合物油利用率、包合物含油率和收得率為評價指標(biāo)，設(shè)定其加權(quán)系數(shù)分別為0.4、0.4、0.2，采用綜合加權(quán)評分法，優(yōu)選包合最佳工藝。正交設(shè)計因素水平表見表2。

表2 阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物包合正交設(shè)計因素水平表

2.3.2 包合物的制備：按照正交設(shè)計表的要求，取適量β-環(huán)糊精，置膠體磨中，加入2倍量的蒸餾水，碾勻，在規(guī)定溫度下緩慢定量加入無水乙醇溶解的上述油狀物，按規(guī)定時間研磨，冷藏24 h，抽濾，得白色沉淀物，用石油醚清洗，40 ℃真空干燥，即得。正交實驗設(shè)計及結(jié)果見表3。

由結(jié)果可知，以綜合評分值為考察指標(biāo)，采用極差直觀分析顯示影響因素大小A＞C＞D＞B，方差分析結(jié)果表明，因素A、C、D對綜合評分值具有顯著影響。根據(jù)K值，因素A應(yīng)選3，因素C應(yīng)選3，因素D應(yīng)選2。綜合上述分析，確定最佳工藝為A3C3D2B1，即油狀物/β-環(huán)糊精為1∶10，包合溫度為40 ℃，乙醇/油狀物為20%，包合1 h。

表3 正交試驗設(shè)計及結(jié)果

表4 綜合評分法方差分析

2.3.3 膠體磨法包合工藝的驗證：按優(yōu)選的最佳包合工藝條件A3C3D2B1，即油狀物/β-環(huán)糊精為1∶10，包合溫度為40 ℃，乙醇/油狀物為20%，包合1 h，進行3次驗證試驗，測得結(jié)果見表3。結(jié)果表明該制備工藝穩(wěn)定可靠。

表5 驗證試驗結(jié)果

將驗證所得的包合物，加入適量石油醚萃取出其中的油狀物，揮去乙醚，適量甲醇溶解，作為供試液；另取未包合的阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物，加入適量甲醇溶解，照薄層色譜色譜法[3]實驗，吸取上述溶液各10 μL，點于同一塊硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-二氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（4∶1∶1∶0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365 nm下檢視。發(fā)現(xiàn)包合物中的油狀物和未包合的油狀物斑點一致，表明二者成分一致，阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物包合后成分未發(fā)生改變。

3 討 論

本研究對3種常見的包合方法進行了考察，出于工業(yè)上生產(chǎn)要求綜合考慮，我們選擇膠體磨法作為該產(chǎn)品的包合方法。阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物氣味較濃，刺激性較強，如果不進行包合，不利于患者服用，且成分易受溫度和光照影響，不穩(wěn)定。本研究采用多指標(biāo)綜合評分法結(jié)合正交設(shè)計優(yōu)選得到阿歸養(yǎng)血顆粒油狀物最佳包合工藝，即油狀物/β-環(huán)糊精為1∶10，包合溫度為40 ℃，乙醇/油狀物為20%，包合1 h。驗證實驗表明該工藝穩(wěn)定可靠，克服了阿歸養(yǎng)血顆粒傳統(tǒng)生產(chǎn)工藝的缺點，提高了藥物穩(wěn)定性和療效，為今后阿歸養(yǎng)血顆粒臨床運用及相關(guān)科學(xué)研究提供了合理的科學(xué)依據(jù)。

[1] 張愛軍,朱寧,楊安東.川芎超臨界流體CO2萃取揮發(fā)油β-環(huán)糊精包合物制備工藝研究[J].中國中藥雜志,2004,29(1):39-41.

[2] 景明,李季文,吳紅彥.復(fù)方甘草片揮發(fā)性成分β-環(huán)糊精包合工藝的研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2008,14(3):27-29.

[3] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].一部.北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:附錄ⅥB34-35.

Extracting Process of Aguiyangxue particles by the Continuous Counter-current Equipment

CHENG Li-juan1,LE Zhi-ping1, YI Hang2*, HE Chun-bin2, YANG Ming2, WEN Wan-jiang2
(1 Nanchang University, Nanchang 330000, China; 2 Jimin Kexin Pharmaceutical Co., Ltd. Yichun 336000, China)

Objective To optimize the β-cyclodextrin inclusion process of Aguiyangxue particles under the application of multi-index comprehensive evaluation method combined with orthogonal experiment design. Methods Using the indexes of the rate of utilization of inclusion oil and the content of inclusion oil and the amount of the inclusion to investigate the oil-like substances/β-cyclodextrin(mL/g), inclusion time, inclusion temperature and ethanol/ oil-like substances(%),and then to establish the optimical β-cyclodextrin inclusion process. Results The optimum β-cyclodextrin inclusion process: the oillike substances/β-cyclodextrin(mL/g) is 1∶10, inclusion temperature is 40 ℃, and inclusion time is 1 h, ethanol/ oil-like substances (%) is 20%. Conclusion The β-cyclodextrin inclusion process of Aguiyangxue particles after the multi-index scores conbined with orthogonal experiment design provides a scientific basis for the clinical use.

Aguiyangxue particles; Oil-like substances; β-cyclodextrin; Inclusion

R283.6

：B

：1671-8194（2014）31-0014-02

*通訊作者:E-mail: yihang08@163.com