趙聲蘭，張鳳，張麗明，郭琰，陳朝銀

（1.云南中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，云南昆明 650500）（2.云南省林業(yè)與草原科學(xué)院，云南昆明 650201）（3.云南經(jīng)濟(jì)管理學(xué)院醫(yī)學(xué)院，云南昆明 650106）

隨著生活水平的提高，2 型糖尿病的發(fā)病率逐年升高，在2040 年預(yù)計(jì)達(dá)到6.42 億人[1]。2 型糖尿病是一種由胰島素相對(duì)缺乏或敏感性下降引起的糖脂代謝性紊亂疾病，會(huì)導(dǎo)致糖尿病腎病、眼病及殘足等并發(fā)癥[2]。目前臨床上治療2 型糖尿病大多使用化學(xué)藥物，具有一定的副作用，相比西藥，中藥成分復(fù)雜多樣，可通過多靶點(diǎn)、多途徑、多層次、多環(huán)節(jié)來改善疾病，治療糖尿病具有安全、溫和、持久的優(yōu)點(diǎn)[3]。如：人參皂苷CK 能通過增強(qiáng)大鼠腎組織的抗氧化能力，抑制腎組織中TGF-β1（轉(zhuǎn)化生長因子β1）的表達(dá)，從而降低糖尿病大鼠的血糖，調(diào)節(jié)血脂[4]；肉桂多酚除了通過抗氧化機(jī)制發(fā)揮作用外，還可通過調(diào)節(jié)胰島細(xì)胞AKT（絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶）信號(hào)通路而促進(jìn)胰島β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖[5]。

核桃系胡桃科（Juglandaceae）的核桃屬（JuglanLinn.）、山核桃屬（Carya）、緣核桃屬（Annamocarya）等喬木植物[6]，其果仁食用及藥用價(jià)值非常高，有健胃、補(bǔ)血、潤肺、養(yǎng)神、延年益壽等功效[7,8]，是我國傳統(tǒng)的藥食同源佳品。核桃仁含有萘醌及其苷類、黃酮及其苷類、二芳基庚烷類、萜類、有機(jī)酸類等化合物[9]，具有抗氧化、延緩衰老、降低血液黏度、防止血栓形成等多種生物學(xué)功能[10,11]，可用于防預(yù)防糖尿病[12]。

薈萃分析以系統(tǒng)生物學(xué)為基礎(chǔ)，闡述機(jī)體與藥物相互作用的原理和規(guī)律，可用來預(yù)測中藥單體或復(fù)方的各有效成分及其作用靶點(diǎn)和參與的相關(guān)通路，探索藥物與疾病間的關(guān)聯(lián)性，解釋藥物治療疾病的作用機(jī)制，可稱之為元分析、系統(tǒng)藥理學(xué)或網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)[13,14]。本研究運(yùn)用薈萃分析探尋核桃仁化學(xué)成分防治2 型糖尿病的潛在靶點(diǎn)及相關(guān)通路，探討核桃仁對(duì)糖尿病的多成分-多靶點(diǎn)的干預(yù)作用機(jī)制，為核桃仁的開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 核桃仁活性成分與潛在靶點(diǎn)的篩選

通過TCMSP[15]（Traditional Chinese Medicine Systems pharmacology）數(shù)據(jù)庫（http://tcmspw.com/tcmsp.php）獲得中藥核桃仁的化學(xué)成分，篩選具有靶點(diǎn)的活性成分，匯集各活性成分的潛在靶點(diǎn)并通過Uniprot 數(shù)據(jù)庫（http://www.uniprot.org./）對(duì)藥物靶點(diǎn)的相關(guān)基因信息名稱進(jìn)行交集統(tǒng)一。

1.2 2 型糖尿病靶點(diǎn)搜集

在OMIM（Online Mendelian Inheritance in Man）（http://www.omim.org/）、Genecards（http://www.genecards.org/）和TTD（Therapeutic Target Database）（https://db.idrblab.org/ttd/）三個(gè)疾病數(shù)據(jù)庫[16]以“Type 2 diabetes mellitus”為關(guān)鍵詞進(jìn)行搜索2 型糖尿病相關(guān)靶點(diǎn)，并將三個(gè)數(shù)據(jù)庫的靶點(diǎn)進(jìn)行歸并得到2 型糖尿病的靶點(diǎn)[17]。

1.3 藥物-活性成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)和PPI 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將活性成分靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)通過R3.6.2 軟件取交集，將交集靶點(diǎn)信息整理成Excel 格式，導(dǎo)入Cystoscape 3.7.2 軟件，構(gòu)建核桃仁-活性成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖，并運(yùn)用Meta-analysis 和Network Analyzer 插件分析網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋮?shù)：選取節(jié)點(diǎn)度（Degree）前三位的活性成分為主要活性成分[18]。目前STRING（search tool for recurring instances of neighbouring genes）是蛋白質(zhì)相互作用覆蓋種類最多的數(shù)據(jù)庫[19]，將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入 STRING（https://string-db.org/cgi/input.pl）在線分析平臺(tái)進(jìn)行蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用 PPI（protein protein interaction network），將獲得的PPI 數(shù)據(jù)導(dǎo)出為TSV文件格式并導(dǎo)入到Cystoscape 3.7.2 軟件繪制網(wǎng)絡(luò)圖，利用Metascape 和CytoNCA 插件對(duì)其進(jìn)行拓?fù)鋵W(xué)分析，包括度中心性（DC）、特征向量（EC）、中介中心性（BC）、接近中心性（CC），各值越大代表了該點(diǎn)在網(wǎng)絡(luò)圖中越重要，取DC、EC、BC、CC 值大于其2 倍中位數(shù)進(jìn)行關(guān)鍵靶點(diǎn)篩選[20]。

1.4 GO 功能富集和KEGG 信號(hào)通路分析

將獲得的交集靶點(diǎn)在STRING 平臺(tái)進(jìn)行京都基因和基因組百科全書（KEGG）的信號(hào)通路富集分析和基因本體（GO）的生物過程富集分析，以p＜0.05 進(jìn)行靶基因篩選，分析核桃仁干預(yù)2 型糖尿病的主要信號(hào)通路及生物過程[21]。

2 結(jié)果與分析

2.1 核桃仁活性成分與靶點(diǎn)收集

表1 核桃仁的11 種潛在活性成分Table 1 11 potential active ingredients of walnut kernel

表2 核桃仁防治2 型糖尿病的28 個(gè)潛在預(yù)測靶點(diǎn)Table 2 Potential 28 predicted targets of walnut kernel for type 2 diabetes

在TCMSP 數(shù)據(jù)庫搜索到核桃仁有作用靶點(diǎn)的化學(xué)成分有11 種（見表1），共作用于83 個(gè)潛在靶點(diǎn)。藥物要通過由脂質(zhì)雙分子層構(gòu)成的生物膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，通常需有一定的疏水性。只有具有適宜的AlogPo/w（脂水分布系數(shù)2-6）的藥物才能在體內(nèi)易于到達(dá)目標(biāo)結(jié)合部位，進(jìn)而發(fā)揮藥效，過高或過低需通過乳化、修飾等適當(dāng)方法加以調(diào)整?？诜锢寐剩∣B）低的成分（如表1 中的胡桃苷、四沒食子酰葡萄糖和五沒食子酰葡萄糖）一般不宜口服給藥，可注射給藥。成藥性DL（drug-like 主要由溶解性和穩(wěn)定性等因素構(gòu)成）較低的也可通過包埋、乳化等適當(dāng)方法加以調(diào)整。

2.2 核桃仁活性成分干預(yù)2 型糖尿病的相關(guān)靶點(diǎn)

在疾病數(shù)據(jù)庫以“Type 2 diabetes mellitus”為關(guān)鍵詞搜索2 型糖尿病相關(guān)靶點(diǎn)，Genecards 中選擇score≥10 的靶點(diǎn)共獲得2968 個(gè)靶點(diǎn)，OMIM 數(shù)據(jù)庫獲得31 個(gè)靶點(diǎn)，TTD 獲得81 個(gè)靶點(diǎn)，合并三個(gè)數(shù)據(jù)庫的靶點(diǎn)共有3015 個(gè)靶點(diǎn)。將核桃仁活性成分靶點(diǎn)與2 型糖尿病靶點(diǎn)通過R 軟件取交集，得出28 個(gè)核桃仁干預(yù)2 型糖尿病作用靶點(diǎn)（見表2）。主要有SOD1、MAOB（胺氧化酶B）、CAT（過氧化氫酶）、DUOX2（雙氧化酶2）、G6PD（葡萄糖-6-磷酸脫氫酶）、GSTA2（谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶A2）等氧化還原酶類，MMP9（基質(zhì)金屬蛋白酶9）、PRSS1（胰蛋白酶1）、MMP2（膠原酶IV），PTGS2（前列腺素G/H 合酶2）、FASN（脂肪酸合酶）以及激酶類的PRKCA（蛋白激酶α）、PRKCB、PRKCG、PRKCE、PRKCZ、PRKD1，因子類的IL5（白介5）、ILRL1、IGF2（胰島素樣生長因子II）、F10（凝血因子X）、F2、VEGFA（血管內(nèi)皮生長因子A），以及ESR1（雌激素受體1）、NCOA2（核受體共激活劑2）等。

2.3 核桃仁活性成分-干預(yù)2 型糖尿病靶點(diǎn)可視化網(wǎng)絡(luò)

采用Cystoscape 3.7.2 軟件構(gòu)建核桃仁-活性成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖（圖1），圖中包含39 個(gè)節(jié)點(diǎn)（1 個(gè)中藥，1 個(gè)疾病，9 個(gè)活性成分與28 個(gè)靶點(diǎn)），組成了74條核桃仁活性成分與2型糖尿病靶點(diǎn)之間相互作用關(guān)系，其中鞣花酸（ellagic acid）作用于GSTA2、MMP2、MMP9、PRKCB和AR等8 個(gè)靶點(diǎn)，五沒食子酰葡萄糖（Pentagalloylglucose）作用于PRKCB、PRKCZ、FASN和F2等8 個(gè)靶點(diǎn)，胡桃醌（juglone）作用于G6PD1、DUOX2、IL-5和SOD等6 個(gè)靶點(diǎn)，euprostin A 作用于PRKCB、PRKCZ和PRKCA等靶點(diǎn)，9-環(huán)丙基壬酸甲酯（Methyl 9-cyclopropylnonanoate）分別作用于PTGS2、MAOB和NCOA2等靶點(diǎn)，2,2",3,3",4,4"-四甲氧基-6,6"-聯(lián)苯二甲酸二甲酯（2,2",3,3",4,4"-Tetramethoxy-6,6"-biphenyldicarboxylic acid，dimethyl ester）作用于KCNMA1（鈣激活鉀通道亞基α1）和PTGS2等靶點(diǎn)，沒食子單寧（Eugeniin）、胡桃苷（Juglanin）分別作用于2 個(gè)靶點(diǎn)，且PRKCA、PRKCB和PRKCE等靶點(diǎn)同時(shí)對(duì)應(yīng)于euprostin A 和Methyl 9-cyclopropylnonanoate 等活性成分，F(xiàn)2和F10等靶點(diǎn)同時(shí)對(duì)應(yīng)于Eugeniin、Methyl 9-cyclopropylnonanoate等成分，體現(xiàn)出中藥多成分、多靶點(diǎn)的作用體系。

根據(jù)拓?fù)鋵W(xué)分析，節(jié)點(diǎn)度為前三位的是五沒食子酰葡萄糖(9)、鞣花酸(8)和胡桃醌(6)，有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道，五沒食子?；咸烟蔷哂芯徑庖葝u素抵抗、減少胰島淀粉樣多肽、模擬胰島素和刺激葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)等作用，可作為治療糖尿病的先導(dǎo)化合物的候選化合物之一[22]；鞣花酸可能通過改善糖尿病小鼠肝臟胰島素信號(hào)通路和促進(jìn)肝臟自噬流來改善糖尿病小鼠肝臟自噬障礙等機(jī)制來達(dá)到降糖保肝作用[23]，此外，鞣花酸可能通過下調(diào)TXNIP、IL-1β炎癥信號(hào)和抑制凋亡來改善糖尿病小鼠胰腺[24]，說明鞣花酸是潛在的抗糖尿病的化合物[25]；胡桃醌可抑制人肝癌HepG2 細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞周期阻滯和凋亡[26]。由此可見，鞣花酸、五沒食子酰葡萄糖和胡桃醌可能是核桃仁干預(yù)2 型糖尿病的主要活性成分。

2.4 PPI 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)

不同的靶點(diǎn)和信號(hào)通路之間會(huì)存在一定程度的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，藥物的治療作用除表現(xiàn)為成分靶點(diǎn)的直接結(jié)合外，更多見于直接調(diào)控靶點(diǎn)與間接調(diào)控其他靶點(diǎn)相結(jié)合的調(diào)控方式，研究蛋白之間的相互作用網(wǎng)絡(luò)，有助于挖掘核心的調(diào)控基因。將藥物靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)的28 個(gè)交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行PPI 蛋白互作網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果如圖2，網(wǎng)絡(luò)中包含28 個(gè)節(jié)點(diǎn)，77 個(gè)邊數(shù)，平均節(jié)點(diǎn)數(shù)5.5，根據(jù)拓?fù)鋵W(xué)分析，DC、EC、BC 和CC 的中位數(shù)分別是：1、0.0396、0、0.351，取DC、EC、BC、CC 大于其2 倍中位數(shù)進(jìn)行關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)篩選，得到PPI 網(wǎng)絡(luò)圖的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)[27]，該網(wǎng)絡(luò)的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)(節(jié)點(diǎn)數(shù)≥5)包括PRKD1、PRKCA、PRKCB、PRKCE、PRKCZ、PRKCG、IL5、DUOX2、F2、CAT、G6PD、SOD、PTGS2、MMP2、MMP9、ESR1、VEGFA、AR、FASN、IGF2，這些關(guān)鍵靶點(diǎn)起到連接其它蛋白的重要作用，且可能是核桃仁干預(yù)2 型糖尿病的靶蛋白。

圖1 核桃仁-活性成分-疾病-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)Fig.1 Walnut kernel-active ingredient-disease-target network

圖2 藥物-疾病靶標(biāo)相互作用圖Fig.2 Drug-disease target interaction diagram

2.5 核桃仁干預(yù)2 型糖尿病的GO 功能富集

將交集靶點(diǎn)基因在STRING 數(shù)據(jù)庫進(jìn)行GO 生物過程富集，篩選到p＜0.05 的GO 生物過程432 條，GO分子功能過程49 條，GO 細(xì)胞成分過程6 條。GO 生物過程按p 值從小到大排前20 的結(jié)果（見圖3a）依次為：對(duì)有機(jī)物的應(yīng)答、對(duì)刺激應(yīng)答的正向調(diào)控、對(duì)含氧化合物的應(yīng)答、對(duì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)節(jié)、對(duì)有機(jī)物的細(xì)胞應(yīng)答、對(duì)細(xì)胞通信的正向調(diào)節(jié)、信號(hào)的正向調(diào)節(jié)、對(duì)化學(xué)刺激的細(xì)胞應(yīng)答、對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的正向調(diào)節(jié)，以及對(duì)生物加工的正調(diào)控、對(duì)細(xì)胞加工的正調(diào)控、細(xì)胞增殖的正調(diào)控、轉(zhuǎn)運(yùn)方面的調(diào)節(jié)、DNA 結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子活性的正調(diào)控、有機(jī)氮化合物代謝加工、蛋白磷酸化正調(diào)控、定位調(diào)控等。

GO 分子功能注釋結(jié)果按照p 值從小到大排前20的結(jié)果（見圖3b）依次為：蛋白激酶C 活性、催化活性、鈣依賴性蛋白激酶C 活性，離子結(jié)合、絲氨酸型內(nèi)肽酶活性、抗氧化活性、蛋白結(jié)合、醇基作為受體的磷酸轉(zhuǎn)移酶活性、鋅結(jié)合、組氨酸激酶活性、激酶活性、標(biāo)識(shí)蛋白結(jié)合、作用于蛋白的催化活性、信號(hào)受體結(jié)合、過氧化物酶活性、NADP（輔酶II）結(jié)合、氧化還原酶活性等。GO細(xì)胞組分注釋結(jié)果按照P值從小到大排前的結(jié)果（見圖3c）包括：胞外間隙、質(zhì)膜、細(xì)胞外區(qū)部分、細(xì)胞外基質(zhì)和內(nèi)膜系統(tǒng)。

圖3 核桃仁干預(yù)2 型糖尿病的GO 注釋Fig.3 GO function annotation of walnut kernel intervention 2 diabetes

以上結(jié)果表明，糖尿病發(fā)病涉及多個(gè)體內(nèi)生物過程的異常，同時(shí)說明核桃仁中的多個(gè)成分參與了多個(gè)體內(nèi)生物過程來共同干預(yù)糖尿病的發(fā)生。核桃含有萘醌及其苷類、黃酮及其苷類等化合物，具有抗氧化、延緩衰老、降低血液黏度、防止血栓形成等多種生物學(xué)功能[11,28]，這與本研究的GO 功能分析結(jié)果顯示細(xì)胞對(duì)含氧化合物的反應(yīng)、過氧化氫代謝過程及生物合成等過程有關(guān)。

2.6 核桃仁干預(yù)2 型糖尿病的KEGG 信號(hào)通路分析

將交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING 數(shù)據(jù)庫中篩選出p＜0.05的信號(hào)通路86 條及其相關(guān)靶標(biāo)，按p值從小到大排列的主要信號(hào)通路注釋及其相關(guān)靶標(biāo)見圖4。直接參與糖尿病相關(guān)的通路有9 條：AGE-RAGE（糖尿病并發(fā)癥中的糖基化終末產(chǎn)物受體）信號(hào)通路、MAPK（腺苷酸激活蛋白激酶）信號(hào)通路、胰島素抵抗、胰島素分泌、PI3K-Akt（肌醇磷脂激酶-蛋白激酶）信號(hào)通路、胰腺分泌、2 型糖尿病、胰島素信號(hào)通路、碳代謝，參與循環(huán)系統(tǒng)相關(guān)信號(hào)通路4 條：VEGF（血管內(nèi)皮生長因子）信號(hào)通路、HIF-1（hypoxia inducible factor-1，缺氧誘導(dǎo)因子-1）信號(hào)通路、cGMP-PKG（環(huán)磷鳥苷-蛋白激酶G）信號(hào)通路、血管平滑肌收縮；內(nèi)分泌相關(guān)的通路2 條：促性腺激素（GnRH）信號(hào)通路、雌激素（Estrogen）信號(hào)通路；炎癥相關(guān)通路2 條：IL-17信號(hào)通路、腫瘤壞死因子（TNF）信號(hào)通路、自然殺傷細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性；信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)的通路4 條：VEGF 信號(hào)通路、松弛素信號(hào)通路、單體GTP 結(jié)合蛋白R(shí)as 信號(hào)通路、HIF-1 信號(hào)通路；癌相關(guān)通路3 條：膀胱癌、肝細(xì)胞癌、癌相關(guān)MicroRNA；甲狀腺相關(guān)通路2 條：甲狀腺激素合成、甲狀腺激素信號(hào)通路；神經(jīng)遞質(zhì)通路3 條：膽堿能突觸、谷氨酸能突觸、血清素神經(jīng)突觸及與血清素代謝有關(guān)的色氨酸代謝；另有與氧化應(yīng)激相關(guān)的谷胱甘肽代謝等信號(hào)通路。

由圖4 可知，RKCE、PRKCZ等靶點(diǎn)參與2 型糖尿病信號(hào)通路，IGF2、PRKCA、PRKCB、PRKCG和VEGFA等靶點(diǎn)參與MAPK 信號(hào)通路，MMP2、PRKCA、PRKCB、PRKCE、PRKCZ和VEGFA等靶點(diǎn)參與糖尿病并發(fā)癥的AGE-RAGE 信號(hào)通路，IGF2、PRKCA和VEGFA等靶點(diǎn)參與PI3K-Akt 信號(hào)通路，PRKCB、PRKCE和PRKCZ等靶點(diǎn)參與胰島素抵抗通路，IL5、MMP9和PTGS2等靶點(diǎn)參與IL-17 信號(hào)通路，MMP9和PTGS2參與腫瘤壞死因子信號(hào)通路。由此可見核桃仁可能是通過調(diào)控PRKCA、PRKCB、PRKCE、PRKCZ、IGF2、IL5、MMP9和PTGS2等靶點(diǎn)參與2 型糖尿病信號(hào)通路、MAPK 信號(hào)通路、PI3K-Akt 信號(hào)通路等信號(hào)通路達(dá)到干預(yù)2 型糖尿病的作用。

PPI 網(wǎng)絡(luò)圖發(fā)現(xiàn)PRKD1、PRKCA、PRKCB、PRKCE、PRKCZ、IL5、F2、CAT、G6PD等靶點(diǎn)是蛋白互作的關(guān)鍵蛋白，起到連接其它蛋白的重要作用，通過KEGG 富集分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些關(guān)鍵靶蛋白參與糖尿病、癌癥、循環(huán)系統(tǒng)、炎癥等四大類17 條相關(guān)通路及其他內(nèi)分泌、信號(hào)傳導(dǎo)、甲狀腺和神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)通路中。本研究發(fā)現(xiàn)與糖尿病相關(guān)通路主要是糖尿病并發(fā)癥中的AGE-RAGE 信號(hào)通路、MAPK 信號(hào)通路、胰島素抵抗、胰島素分泌、PI3K-Akt 信號(hào)通路、2 型糖尿病、胰島素信號(hào)通路和谷胱甘肽代謝等相關(guān)通路。AMPK 是生物能量代謝調(diào)節(jié)的關(guān)鍵分子，可以調(diào)節(jié)脂肪酸氧化和線粒體功能，促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GLUT4轉(zhuǎn)運(yùn)到質(zhì)膜，增加葡萄糖攝取，是研究糖尿病及其他代謝相關(guān)疾病的核心[29,30]。胰島素是機(jī)體內(nèi)唯一降血糖的激素，胰島素信號(hào)通路是一條很重要的2 型糖尿病通路，對(duì)糖尿病的發(fā)展非常重要[31]。由此可見， 核桃仁活性成分可能通過PRKD1、PRKCA、PRKCB、PRKCE、PRKCZ、IL5、F2、CAT、G6PD等多靶點(diǎn)參與MAPK 信號(hào)通路、AGE-RAGE 信號(hào)通路、胰島素抵抗和PI3K-Akt 信號(hào)通路等多條信號(hào)通路調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，從而實(shí)現(xiàn)干預(yù)2 型糖尿病的作用。

圖4 核桃仁干預(yù)2 型糖尿病的KEGG 主要信號(hào)通路注釋及其相關(guān)靶點(diǎn)Fig.4 Annotated diagram of KEGG main related signal pathways and targets of walnut kernel in type 2 diabetes

3 結(jié)論

本研究應(yīng)用薈萃分析方法篩選出沒食子酸、沒食子單寧、五沒食子酰葡萄糖、木麻黃素及胡桃醌等11個(gè)核桃仁活性成分及其83 個(gè)潛在靶點(diǎn)，與糖尿病靶點(diǎn)交集的有28 個(gè)靶點(diǎn)，其中鞣花酸和五沒食子酰葡萄糖分別作用于前列腺素G/H 合酶2 和蛋白激酶等8 個(gè)靶點(diǎn)，胡桃醌作用于葡萄糖6 磷酸脫氫酶1 等6 個(gè)靶點(diǎn)，蛋白激酶α、β、ε等靶點(diǎn)同時(shí)受euprostin A 和9-環(huán)丙基壬酸甲酯等活性成分所作用，凝血因子II 和X 等靶點(diǎn)同時(shí)受沒食子單寧、9-環(huán)丙基壬酸甲酯等成分作用，體現(xiàn)了核桃仁多成分、多靶點(diǎn)協(xié)同干預(yù)2 型糖尿病的作用機(jī)制[2]。