彭曉輝，樊曉杰，劉曉佳，白 皎，李達(dá)翃，李占林，華會(huì)明

藤黃屬植物中二苯甲酮衍生物的研究進(jìn)展

彭曉輝，樊曉杰，劉曉佳，白 皎，李達(dá)翃，李占林，華會(huì)明*

沈陽藥科大學(xué)，遼寧 沈陽 110000

天然的二苯甲酮衍生物主要來源于藤黃屬植物，是藤黃屬藥用植物的主要有效成分之一，具有抗腫瘤、抗炎、抗病毒和抗氧化等生物活性。歸納總結(jié)了藤黃屬植物中二苯甲酮衍生物的結(jié)構(gòu)分類、生物合成途經(jīng)、波譜特征及其提取分離方法，為藤黃屬植物中二苯甲酮衍生物的深入研究與開發(fā)利用提供參考。

藤黃屬；二苯甲酮衍生物；結(jié)構(gòu)分類；生物合成途經(jīng)；波譜特征；提??；分離

藤黃屬Linn.植物是隸屬于藤黃科的喬木或灌木，全球有450余種，主要分布于熱帶亞洲、澳大利亞東北部、熱帶非洲及非洲南部和熱帶美洲等地[1]；在中國有22種，主要分布于云南和廣西，其中的云南藤黃.H. H. Hu.、怒江藤黃.C. Y. Wu ex Y. H. Li.等14種藤黃屬植物為中國特有種[2]。藤黃屬植物的次級代謝產(chǎn)物主要為雙苯吡酮、二苯甲酮衍生物、雙黃酮和三萜等類型的化合物。其中，二苯甲酮衍生物是一類主要分布于藤黃屬植物中的結(jié)構(gòu)多樣、具有廣泛生物活性的天然產(chǎn)物。如在.Mart.的果實(shí)和葉中的7-表豬膠樹酮對肺癌A549細(xì)胞[3]、惡性膠質(zhì)瘤U251MG和U138MG細(xì)胞增殖具有抑制活性[4]，以及一定的抗過敏活性[5]，此外該化合物還具有顯著的抗炎和鎮(zhèn)痛活性[6]。在藤黃屬植物中廣泛存在的火葉藤黃醇具有顯著抑制人白血病細(xì)胞增殖的活性[7]以及與萬古霉素活性相近的抗耐甲氧西林金黃色葡萄球菌生長活性[8]。Jackson等[9]研究表明火葉藤黃醇可以有效地抑制真菌芽管的出現(xiàn)和生長，而且能夠使氟康唑的半最大效應(yīng)濃度（concentration for 50% of maximum effect，EC50）值從大于1024 μg/mL降至13 μg/mL。.、云樹.Roxb.、.Roxb.、非洲山竹.T. Anderson、拇指藤黃.Pierre和金絲李.Chun et How中均有分布的藤黃酮K具有很強(qiáng)的抗人直腸癌HCT-116和HT-29細(xì)胞增殖的活性[10]。目前已從42種藤黃屬植物中發(fā)現(xiàn)二苯甲酮類化合物（表1），且分布于植物的根、莖、葉、花序、果實(shí)等各個(gè)部位（表2）。復(fù)雜多樣的結(jié)構(gòu)和廣泛的生物活性，使二苯甲酮衍生物受到了藥理學(xué)、天然藥物化學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域?qū)W者的廣泛關(guān)注。本文對從藤黃屬植物中分離得到二苯甲酮衍生物的結(jié)構(gòu)類型、生物合成途經(jīng)、波譜特征和提取分離方法進(jìn)行了歸納、總結(jié)，為其深入研究與開發(fā)利用提供參考。

表1 藤黃屬植物的名稱

表2 植物材料的部位

1 二苯甲酮衍生物的結(jié)構(gòu)類型

二苯甲酮衍生物是由1個(gè)酮羰基與2個(gè)苯環(huán)相連，形成具有13個(gè)碳原子（C6-C1-C6）基本骨架的一類化合物。其中1個(gè)苯環(huán)（A環(huán)）結(jié)構(gòu)相對保守，而另1個(gè)苯環(huán)（B環(huán)）則變化較大。根據(jù)B環(huán)是否具有完整的苯環(huán)結(jié)構(gòu)，將二苯甲酮衍生物分為2大類：簡單的二苯甲酮衍生物（simple benzophenone derivatives，SBDS或basic benzophenone skeletons，BBS）和多異戊烯基取代的二苯甲酮骨架化合物（polyprenylated benzophenones，PPBS）。

SBDS中2個(gè)苯環(huán)均保持完整，苯環(huán)上可連有羥基、異戊烯基等，也可以成環(huán)。PPBS常具有異戊烯基、香葉基、羥基、甲氧基等取代基團(tuán)，這些基團(tuán)可以進(jìn)一步發(fā)生加成、環(huán)合等反應(yīng)而形成復(fù)雜的多元環(huán)結(jié)構(gòu)。PPBS的B環(huán)因與之相連的多異戊烯基、香葉基等取代基發(fā)生環(huán)化反應(yīng)，形成[3.3.1]壬烷-2,4,9-三酮結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)與苯甲?；噙B，構(gòu)成了PPBS的基本骨架。關(guān)于該基本骨架的編號，通常的標(biāo)記方法是將B環(huán)上與異丙基或取代異丙基相連的橋頭碳原子標(biāo)記為C-1，然后將[3.3.1]壬烷- 2,4,9-三酮中的八元環(huán)依次標(biāo)記為C-1～C-8；將B環(huán)中剩余的羰基碳標(biāo)記為C-9，將連接A、B兩環(huán)的羰基碳標(biāo)記為C-10；最后，將A環(huán)中的碳原子按相關(guān)的順序規(guī)則標(biāo)記為C-11～C-16[11]。根據(jù)PPBS基本骨架中的苯甲?；c[3.3.1]壬烷-2,4,9-三酮的連接位置不同，將PPBS分為A、B、C型3類，即苯甲?；cC-1相連的為A型PPBS，與C-3相連的為B型PPBS，與C-5相連的為C型PPBS。此外，將B環(huán)上沒有形成[3.3.1]壬烷-2,4,9-三酮結(jié)構(gòu)或不能歸屬為A、B、C型的二苯甲酮衍生物歸屬為D型PPBS[12]。二苯甲酮衍生物存在酮-烯醇式互變，各種類型二苯甲酮衍生物的基本骨架見圖1。

1.1 SBDS

SBDS的A環(huán)多為無取代、單取代、雙取代苯。取代基多為羥基、甲氧基。B環(huán)較A環(huán)復(fù)雜，常為三取代和四取代，取代基包括羥基、甲氧基、異戊烯基和香葉基及其衍生物等（圖2）。異戊烯基可進(jìn)一步與鄰位羥基環(huán)合形成吡喃環(huán)。從藤黃屬植物中發(fā)現(xiàn)的SBDS（1～31）見表3，結(jié)構(gòu)見圖3。

圖1 二苯甲酮衍生物的基本骨架

圖2 藤黃屬植物中二苯甲酮類化合物的取代基

表3 藤黃屬植物中的簡單的二苯甲酮衍生物

圖3 藤黃屬植物中SBDS的結(jié)構(gòu)

1.2 A型PPBS

已報(bào)道的藤黃屬中的A型PPBS的A環(huán)取代較簡單，多為無取代或3,4-二羥基取代。B環(huán)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，取代基多為香葉草基和異戊烯基，且多發(fā)生環(huán)化反應(yīng)，形成雙環(huán)、三環(huán)甚至四環(huán)系統(tǒng)，部分化合物還形成籠狀結(jié)構(gòu)，如化合物41、42。從藤黃屬植物中發(fā)現(xiàn)的A型PPBS（32～47）見表4，結(jié)構(gòu)見圖4。

表4 藤黃屬植物中的A型PPBS

圖4 藤黃屬植物中的A型PPBS

1.3 B型PPBS

B型PPBS的數(shù)量最多，結(jié)構(gòu)復(fù)雜、多樣。A環(huán)主要有4種取代模式：苯甲?；?,4-二羥基苯甲?；?-羥基苯甲?；?-羥基-3-甲氧基苯甲酰基。除了常見的羥基、甲氧基等基團(tuán)外，香葉草基和異戊烯基及其衍生物在該類化合物中也是廣泛存在的。這些取代基可進(jìn)一步發(fā)生環(huán)化反應(yīng)，形成四環(huán)、五環(huán)和多環(huán)體系；香葉草基上的烯基常發(fā)生羥基化反應(yīng)，形成連羥基的手性中心。從藤黃屬植物中發(fā)現(xiàn)的B型PPBS（48～114）見表5，結(jié)構(gòu)見圖5。

表5 藤黃屬植物中的B型PPBS

續(xù)表5

圖5 藤黃屬植物中的B型PPBS

Fig. 5 Structures of type-B PPBS in Garcinia

1.4 C型PPBS

藤黃屬中的C型PPBS很少見，事實(shí)上，與其他幾類二苯甲酮衍生物相比，在自然界中發(fā)現(xiàn)的C型PPBS也是非常少的。這主要是由于在生物合成C型PPBS的過程中，對于中間體結(jié)構(gòu)的要求較其他類型的二苯甲酮衍生物更為苛刻。這類化合物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是A環(huán)形成3,4-二羥基苯甲酮基，而B環(huán)則形成金剛烷基。從藤黃屬植物中發(fā)現(xiàn)的C型PPBS（115～121）見表6，結(jié)構(gòu)見圖6。

1.5 D型PPBS

D型PPBS的結(jié)構(gòu)復(fù)雜、多樣。藤黃屬中發(fā)現(xiàn)的D型PPBS具有以下結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：（1）A、B 2環(huán)由酯鍵相連（A環(huán)與酯羰基相連）；（2）[3.3.1]壬烷- 2,4,9-三酮結(jié)構(gòu)擴(kuò)環(huán)，形成[3.3.2]癸烷結(jié)構(gòu)（如gambogenone，122）或[4.3.1]癸烷結(jié)構(gòu)（如xerophenone C，131）的二苯甲酮衍生物；（3）由SBDS與呫噸酮聚合形成的二聚體；（4）在A、B 2環(huán)上的2對相鄰碳原子分別與羰基和碳原子（或氧原子）相連，形成閉合的環(huán)（如garcixanthochymone D，137）。從藤黃屬植物中發(fā)現(xiàn)的D型PPBS（122～142）見表7，結(jié)構(gòu)見圖7。

2 生物合成途經(jīng)

天然的二苯甲酮衍生物經(jīng)醋酸-丙二酸-莽草酸途經(jīng)合成，二苯甲酮合成酶（benzophenone synthase，BPS）是其合成的限速酶[97]。二苯甲酮衍生物基本母核的生物合成途徑見圖8[12,34]。PPBS在其生物合成過程中常發(fā)生Diels-Alder反應(yīng)、異戊烯基化反應(yīng)、自由基環(huán)化反應(yīng)、氧化反應(yīng)等形成復(fù)雜的多環(huán)結(jié)構(gòu)。雖然缺乏實(shí)驗(yàn)研究以闡述其具體的生物合成途經(jīng)，但是一些學(xué)者針對分離得到的化合物結(jié)構(gòu)，提出了一些相關(guān)生物合成途經(jīng)的合理假設(shè)[27,43,56,91]。當(dāng)一個(gè)化合物的結(jié)構(gòu)不能用現(xiàn)有的生物合成理論得到合理解釋時(shí)，該化合物常被懷疑可能為人工產(chǎn)物，這時(shí)需要采用一些方法（如LC-MS法）進(jìn)行驗(yàn)證。Zhang等[47]從嶺南山竹子的葉子中分離得到了oblongifolins J（115）和oblongifolins K（116），但是由于這2個(gè)化合物中均含有1個(gè)丙酮基（這一基團(tuán)在二苯甲酮衍生物中十分罕見），而且在實(shí)驗(yàn)過程中使用過丙酮，因此懷疑該化合物為人工產(chǎn)物。通過對另一批嶺南山竹子葉子使用石油醚提取，并在接下來的分離、分析過程中避免使用丙酮，采用LC-MS分析，成功地鑒定嶺南山竹子葉子的石油醚提取物中存在這2個(gè)化合物，從而證明它們是天然產(chǎn)物。

3 波譜特征

3.1 質(zhì)譜

具有3,4-二羥基苯甲?；亩郊淄苌锿ǔ?huì)發(fā)生α裂解，形成/137 [C7H5O3]?的碎片離子；具有苯甲酰基的二苯甲酮衍生物則常常會(huì)生成/105 [C7H5O]2＋的碎片離子[13]。這2種碎片離子會(huì)進(jìn)一步發(fā)生誘導(dǎo)裂解，生成/109 [C6H5O2]?和/77 [C6H5]＋的脫羰基碎片[28]。由于二苯甲酮衍生物中多含有異戊烯基，因此在質(zhì)譜信號中會(huì)出現(xiàn)/相差68 [C5H8]的2個(gè)信號[36]，也可能會(huì)出現(xiàn)/69 [C5H9]＋的碎片離子峰[57]。二苯甲酮衍生物母核中具有羰基，當(dāng)其同時(shí)具有γ-H時(shí)，可能會(huì)產(chǎn)生麥?zhǔn)现嘏臶86]。

表6 藤黃屬植物中的C型PPBS

圖6 藤黃屬植物中C型PPBS的結(jié)構(gòu)

表7 藤黃屬植物中的D型PPBS

圖7 藤黃屬植物中D型PPBS的結(jié)構(gòu)

圖8 二苯甲酮衍生物的生物合成途經(jīng)

3.2 核磁共振譜

二苯甲酮衍生物常含有異戊烯基，該基團(tuán)的2個(gè)甲基氫的H均在1.55～1.75，可以根據(jù)氫譜高場區(qū)的甲基信號數(shù)目，大致推測化合物中的異戊烯基數(shù)目；甲基碳的C分別為17.5～18.5、25.5～26.5；2個(gè)烯碳原子的C常在132～136、119～126。當(dāng)異戊烯基與鄰位羥基環(huán)合成吡喃環(huán)時(shí)，存在順式偶合的2個(gè)烯氫雙峰的H6.4～6.5、5.2～5.4，二者的偶合常數(shù)約為10 Hz。對于PPBS而言，C-9位非共軛羰基的碳信號通常在C207～210[98]；C-8的碳信號通常在C46～53，但當(dāng)C-8參與構(gòu)成金剛烷基時(shí)，其碳信號將向低場位移，甚至達(dá)到C58.9（如化合物37）。

PPBS中的β-羥基-α,β-不飽和酮存在酮-烯醇式互變，直接測試得到的氫譜和碳譜往往信號重疊嚴(yán)重，十分復(fù)雜。為了簡化圖譜，通常使用CD3OD- 0.1%三氟乙酸為測試溶劑，以加快酮-烯醇式互變的速率，通常得到2-酮基-4-羥基異構(gòu)體的圖譜（可能是由于4位羥基與10位羰基形成分子內(nèi)氫鍵的緣故）。不過也有得到2-羥基-4-酮基異構(gòu)體的報(bào)道[32,54,61,68]。如Gustafson等[69]在測試化合物86的氫譜和碳譜時(shí)發(fā)現(xiàn)，在以CDCl3為溶劑時(shí)，得到2種互變異構(gòu)體以3∶1的比例存在的復(fù)雜圖譜；當(dāng)將溶劑改為CD3OD-0.1% TFA時(shí)，則得到了2-酮基-4-羥基異構(gòu)體的圖譜數(shù)據(jù)。此外，有些化合物（如化合物73）的氫譜和碳譜測試時(shí)，以C5D5N為溶劑可以簡化圖譜[58]。

酮-烯醇式互變使得PPBS中C-2與C-4的化學(xué)位移值大致相等，均位于C194附近，而C-3的化學(xué)位移值則約為C119。當(dāng)在C-2或C-4上形成烯醚時(shí)，該碳原子的信號向高場位移至C172附近。以化合物109[5]和化合物95[11]為例，二者結(jié)構(gòu)的主要差別在于化合物109在C-4位形成烯醚，而化合物95在C-4位則為烯醇基。在化合物95中C-2、C-4與C-3的C分別為193.8、195.3、116.4；而在化合物109中，C-4由于形成烯醚，其化學(xué)位移值向高場位移至C171.5，C-2、C-3的C值分別為194.8、123.8。在確定烯醇化的1,3-二酮中的羰基在C-2與C-4的相對位置時(shí)，Zhang等[37]總結(jié)出了一條經(jīng)驗(yàn)性規(guī)律，對于A型PPBS而言，當(dāng)C-1與C-5的化學(xué)位移值相差約21時(shí)，羰基位于C-2，烯醇基位于C-4；當(dāng)2者的化學(xué)位移值相差約7時(shí)，羰基位于C-4，烯醇基位于C-2。

PPBS由于含有多個(gè)手性中心，常常需要綜合運(yùn)用多種方法確定其立體構(gòu)型。對于相對構(gòu)型的確定可根據(jù)特定氫和/或碳的化學(xué)位移，以及偶合常數(shù)來判斷。

大部分PPBS的基本母核中具有成橋的雙環(huán)系統(tǒng)，這決定了其C-1和C-5位上的氫和側(cè)鏈位于e鍵[32,46,52,57,61]。

絕大多數(shù)PPBS的C-7為手性碳，關(guān)于確定C-7構(gòu)型的文獻(xiàn)報(bào)道很多，確定其主要有以下3種方法。（1）根據(jù)C-7的化學(xué)位移值：當(dāng)C41.0～44.0時(shí)，H-7位于a鍵；當(dāng)C46.0～48.0時(shí)，H-7位于e鍵[43,56,99]。（2）根據(jù)H-6與H-7的偶合常數(shù)：由于磁各向異性，2個(gè)H-6的化學(xué)位移值通常是H-6ax的化學(xué)位移值較小。當(dāng)H-6ax與H-7的偶合常數(shù)大于9 Hz（通常為10～13 Hz）時(shí)，H-6ax與H-7處于反式雙直立的位置，因而可以推斷H-7處于a鍵上；當(dāng)H-6ax與H-7的偶合常數(shù)不超過8 Hz（通常為7～8 Hz）時(shí)，H-7處于e鍵上。在典型的環(huán)己烷衍生物中，以椅式為優(yōu)勢構(gòu)象，鄰位偶合常數(shù)aa多在10～12 Hz，ae≈ee多在2～5 Hz?？梢?，當(dāng)H-7處于a鍵上時(shí)，H-7與H-6ax的偶合常數(shù)與典型環(huán)己烷衍生物的數(shù)值相近；而當(dāng)H-7處于e鍵上時(shí)，兩者則相差較大。這主要是由于C-7構(gòu)型不同時(shí)，PPBS基本骨架中的雙環(huán)系統(tǒng)的優(yōu)勢構(gòu)象不同，如化合物77（H-7處于a鍵）的優(yōu)勢構(gòu)象為椅式，而化合物86（H-7處于e鍵）的優(yōu)勢構(gòu)象則由椅式和扭船式共同構(gòu)成[67]。（3）根據(jù)C-8上角甲基的化學(xué)位移值：當(dāng)C-8上處于a鍵和e鍵上角甲基的C26～28、22～25時(shí)，提示C-7上的側(cè)鏈處于a鍵；當(dāng)C-8上處于a鍵和e鍵上角甲基的C15～17、22～24時(shí)，提示C-7上的側(cè)鏈處于e鍵。這主要是由于當(dāng)C-7上的側(cè)鏈處于e鍵時(shí)，該取代基與C-8上處于a鍵的甲基在空間上非常接近，產(chǎn)生了γ-效應(yīng)[98-99]。

對于C-6為亞甲基，C-7位的側(cè)鏈?zhǔn)钱愇煜┗珻-8上連有2個(gè)角甲基的A型和C型PPBS而言，當(dāng)含有C-6的飽和環(huán)為椅式構(gòu)象、C-7位的異戊烯基為exo型時(shí)，C-6上2個(gè)氫的化學(xué)位移值之差大約為0.5，C-8上2個(gè)角甲基的碳化學(xué)位移相差約為7.7，C-7的C43；當(dāng)含有C-6的飽和環(huán)為椅式構(gòu)象、C-7位的異戊烯基為endo型時(shí)，C-6上的2個(gè)氫的化學(xué)位移值相差大約為0.2，C-8上2個(gè)角甲基的碳化學(xué)位移相差約為4.0，C-7的C48[37]。

通常采用計(jì)算電子圓二色譜（electrostatic circular dichroism，ECD）法確定PPBS的絕對構(gòu)型，將實(shí)測的ECD譜與在相應(yīng)水平下計(jì)算得到的ECD譜對比，當(dāng)兩者在相應(yīng)波長下的Cotton效應(yīng)一致時(shí)，可認(rèn)為樣品分子的立體構(gòu)型與分子模型的立體構(gòu)型相同[51,92]。此外，對于存在手性仲醇碳的二苯甲酮衍生物，也有采用莫舍酯法確定二苯甲酮衍生物碳絕對構(gòu)型的[47,51]。

4 提取分離

藤黃屬植物二苯甲酮衍生物的提取分離常采用的方法是：（1）主要采用浸漬法和回流法提取，用丙酮[37,48,63,75]、甲醇[23]、乙醇[37,90]、二氯甲烷[38]、氯仿[38]、醋酸乙酯[61]等為提取溶劑。有時(shí)在提取之前還需要用小極性溶劑（如正己烷）脫脂[25]。（2）有液液萃取和固相萃取2種方法對提取物進(jìn)行粗分。萃取通常是用水懸浮提取物后，依次使用石油醚、二氯甲烷、醋酸乙酯和正丁醇等溶劑萃取。根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需要，可以靈活地采用適當(dāng)數(shù)量與種類的有機(jī)溶劑萃取。如Gao等[48]則直接用二氯甲烷萃取。對于難以水混懸，或容易發(fā)生乳化現(xiàn)象的樣品，則可以考慮使用固相萃取或硅膠柱色譜等方法對提取物進(jìn)行粗分。如Minami等[23]將樣品用硅藻土拌樣后，依次使用正己烷、二氯甲烷、醋酸乙酯和甲醇洗脫；Zhang等[37]將樣品用硅膠拌樣后，用三氯甲烷-甲醇-丙酮三元溶劑系統(tǒng)梯度洗脫。（3）樣品經(jīng)過上述處理后，綜合運(yùn)用硅膠柱色譜、葡聚糖凝膠色譜、制備型高效液相色譜等色譜技術(shù)，實(shí)現(xiàn)樣品的分離純化。

活性導(dǎo)向和結(jié)構(gòu)導(dǎo)向的分離策略也應(yīng)用于二苯甲酮衍生物的研究?；钚詫?dǎo)向分離有利于快速、有針對性地獲得活性化合物，因此廣泛應(yīng)用于二苯甲酮類化合物的分離[21,58-59]。Liu等[50]將多花山竹子枝的丙酮提取物用D101型大孔樹脂以60%和95%的乙醇分別洗脫，得到的95%乙醇洗脫部位，再用硅膠柱色譜粗分，得到組分A～I(xiàn)。分別測定這些組分對宮頸癌HeLa-C3細(xì)胞（經(jīng)過基因工程處理，能夠用于檢測涉及半胱氨酸蛋白酶-3激活的細(xì)胞凋亡）的促細(xì)胞凋亡活性后發(fā)現(xiàn)組分D、E、G的活性最強(qiáng)。進(jìn)一步應(yīng)用多種色譜技術(shù)從這3個(gè)組分中分離得到了化合物72、94、96、97、107等，均對HeLa-C3細(xì)胞具有誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡活性的化合物。Williams等[58]依次對長柱藤黃莖的醋酸乙酯和甲醇提取物進(jìn)行細(xì)胞毒活性篩選，對活性較強(qiáng)的醋酸乙酯提取物進(jìn)一步的活性跟蹤分離，最終得到了2個(gè)對人卵巢癌A2780細(xì)胞具有細(xì)胞毒活性的化合物73、84。

但是，在實(shí)際工作中，往往由于活性物質(zhì)含量過低，難以實(shí)現(xiàn)有效分離，或活性物質(zhì)性質(zhì)不穩(wěn)定在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)生變化，或由于相關(guān)成分在發(fā)揮生物活性時(shí)存在協(xié)同作用等原因，活性導(dǎo)向分離常常會(huì)導(dǎo)致活性降低甚至喪失，而得不到活性強(qiáng)的化合物。如Williams等[58]在對.的果皮進(jìn)行研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，己烷粗提物的抗利什曼原蟲活性高于從中分離得到的9個(gè)成分的生物活性之和，提示活性成分可能存在協(xié)同作用。

結(jié)構(gòu)導(dǎo)向分離是根據(jù)某類化合物的結(jié)構(gòu)特征與波譜特征，利用HPLC-DAD、LC-MS/MS或UPLC- QTOF/MSE等技術(shù)定向獲取某類化合物，甚至是新化合物的一種研究策略。Li等[92]對金絲李種子的乙醇提取物用石油醚脫脂后，用硅膠色譜柱將其分為9個(gè)流分，然后利用UPLC-QTOF/MSE技術(shù)在“MS全掃描”和“MSE實(shí)驗(yàn)”2個(gè)模式下，對每個(gè)流分進(jìn)行分析。根據(jù)分子式、診斷離子（/177.02）以及藤黃屬植物中化學(xué)成分?jǐn)?shù)據(jù)對比后，發(fā)現(xiàn)源自這9個(gè)流分中的31個(gè)色譜峰可能是二苯甲酮衍生物，其中19個(gè)色譜峰為已知的二苯甲酮衍生物，而另外12個(gè)色譜峰則由于在MSE譜中觀測到異戊烯基、苯環(huán)的丟失的碎片離子以及/177.018 8（C9H5O4）的診斷離子峰，提示其中很有可能含有二苯甲酮衍生物。對這12個(gè)色譜峰進(jìn)行跟蹤分離，得到了5個(gè)新的二苯甲酮衍生物（125～128、136）?？梢?，結(jié)構(gòu)導(dǎo)向分離的優(yōu)勢在于“去重復(fù)化”，有利于獲得新化合物。但遺憾的是，這5個(gè)化合物對人乳腺癌MDA-MB-231、SKBR3、MCF-7細(xì)胞均不具有細(xì)胞毒活性。

活性導(dǎo)向分離與結(jié)構(gòu)導(dǎo)向分離各有所長，綜合運(yùn)用2種研究策略，可以優(yōu)勢互補(bǔ)，得到更好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。如Xu等[60]測試了云南藤黃的枝、葉和果實(shí)粗提物的抗HeLa-C3細(xì)胞活性，發(fā)現(xiàn)果實(shí)的丙酮粗提物活性最好，然后進(jìn)一步對果皮和種子的粗提物做活性篩選，發(fā)現(xiàn)果皮的丙酮提取物活性最好，由此確定以果皮為實(shí)驗(yàn)材料。用硅膠柱色譜分離果皮的丙酮提取物，依次以三氯甲烷、醋酸乙酯和丙酮為洗脫劑，活性測定后發(fā)現(xiàn)三氯甲烷洗脫物的活性最好。然后利用UPLC/PDA/MS分析三氯甲烷洗脫物，并與該團(tuán)隊(duì)以前從該屬植物中分離得到的二苯甲酮類和雙苯吡酮類化合物的相關(guān)數(shù)據(jù)（保留時(shí)間、紫外光譜和質(zhì)譜）對比，初步判斷三氯甲烷洗脫物中含有4個(gè)已知的化合物和3個(gè)可能是二苯甲酮類或雙苯吡酮類的“未知”化合物。通過活性跟蹤對三氯甲烷洗脫物展開了分離和純化，只分離活性較好的部位，最終得到了1個(gè)具有抗HeLa-C3細(xì)胞活性的新的二苯甲酮衍生物（70）。

5 結(jié)語

天然的二苯甲酮衍生物由于其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)以及廣泛的生物活性，尤其具有顯著的抗腫瘤[31]和抑菌殺菌[8-9]活性，受到廣泛關(guān)注，具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景。藤黃屬植物是天然二苯甲酮衍生物的主要來源之一，有必要對該屬植物展開深入研究[100]，通過活性導(dǎo)向分離快速尋找活性成分，采用結(jié)構(gòu)導(dǎo)向分離定向獲取該類化合物，從而高效發(fā)現(xiàn)更多結(jié)構(gòu)新穎、有活性的化合物，為藤黃屬植物資源的開發(fā)利用以及天然二苯甲酮衍生物的新藥研發(fā)奠定科學(xué)基礎(chǔ)。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

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Research progress on benzophenone derivatives from

PENG Xiao-hui, FAN Xiao-jie, LIU Xiao-jia, BAI Jiao, LI Da-hong, LI Zhan-lin, HUA Hui-ming

Shenyang Pharmaceutical University, Shenyang 110000, China

Natural benzophenone derivatives are mainly distributed inplants. They are main effective constituents ofand showed antitumor, anti-inflammatory, and antioxidant activities. The structure classification, biosynthetic pathway, spectrascopic characteristics and extraction and separation methods of benzophenone derivatives inplants are summarized in this paper, in order to provide a reference for further study, development and application of benzophenone derivatives ofplants.

Linn.; benzophenone derivatives; structural classification; biosynthetic pathway; spectroscopic characteristics; extraction; separation

R282.71

A

0253 - 2670(2021)06 - 1799 - 17

10.7501/j.issn.0253-2670.2021.06.030

2020-06-13

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（31570350）

彭曉輝（1994—），男，湖北隨州人，碩士研究生，從事天然藥物化學(xué)研究。Tel: 18272359831 E-mail: 2755130849@qq.com

華會(huì)明，教授。E-mail: huimhua@163.com

[責(zé)任編輯 崔艷麗]