刁鑫宇,楊 敏,孔繁斌,耜華兵,張國鋒
(吉林農(nóng)業(yè)科技學院·吉林吉林·132101)
《健胃散》記載于《中獸醫(yī)藥典》,主要是以山楂、麥芽、神曲、檳榔等為原料加工制成的中獸藥散劑,具有消食理氣、開胃寬腸之功效,用于傷食積滯、消化不良等癥。方中山楂、麥芽、神曲消食導積,化谷寬腸;檳榔理氣消積,殺蟲截瘧,四藥皆為消伐克削之品,專主食滯。臨床實踐證明,山楂是臨床重要的消導藥,對肉食過多,積滯不化,噯腐吞酸,胃脘飽脹,腹痛瀉痢等,均為常用之藥,并能收到良好的效果[1]。山楂中有機酸部位是山楂中促消化功能的主要藥效部位[2]。本試驗是擬將《健胃散》進行劑型改良添加適合寵物吸收的營養(yǎng)物質(zhì),制備寵物營養(yǎng)膏為其劑型開發(fā)和臨床應用提供參考。
山楂飲片、麥芽、神曲、檳榔飲片(購于吉林大藥房)。
超聲波提取機(濟寧天華超聲電子儀器有限公司,THC);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海EYELA,N-1100);循環(huán)水式真空泵(上海豫康科教儀器設備有限公司,SHB-111);數(shù)顯恒溫水浴鍋(上海皓莊儀器有限公司,JHH-6A);離心機(湖南湘儀,L600)。
稱取粉碎過篩的山楂原料,參照文獻[3]進行超聲波輔助水浸提法提取山楂中的有機酸,提取后趁熱抽濾,取濾液,進行水浴加熱濃縮,濃縮至1g(生藥)/ml,作為山楂提取物浸膏。密封置于4℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>
稱取粉碎過篩的檳榔原料,參照文獻[4]采用超聲波提取法提取檳榔中的生物堿,提取后趁熱抽濾,取濾液,回收乙醇。減壓濃縮至1g(生藥)/ml,得到檳榔生物堿提取液。密封置于4℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>
2.2.1 處方的初步確定
將麥芽、神曲經(jīng)粉碎機粉碎,過120目篩,收集濾過的粉末,保存?zhèn)溆?。《中獸醫(yī)藥典》中記載的處方用藥比例為山楂∶麥芽∶神曲∶檳榔=5∶5∶5∶1。稱取山楂提取物浸膏1g、麥芽粉1g、神曲粉1g、檳榔提取液0.2g。參考文獻[5]營養(yǎng)物質(zhì)的配比,在進行單因素考察的基礎上,初步確定一些營養(yǎng)物質(zhì)的添加量為0.08g破壁脫敏花粉、0.6g脫脂羊奶粉、0.15g蜂膠液。
2.2.2 處方篩選
參考文獻[5]營養(yǎng)物質(zhì)的配比,在單因素考察的基礎上設計正交試驗。以玉米蛋白粉的加入量、蜂王漿凍干粉的加入量、蜂蜜的加入量3個因素為考察對象,每個因素選擇3個水平,詳見表1,通過對感官評價、離心穩(wěn)定性進行分析,篩選出復方健胃散寵物營養(yǎng)膏的最佳處方。
表1 處方篩選的正交設計因素水平表
2.2.3 考察指標及評價方法
在篩選處方過程中,通過感官評價、離心穩(wěn)定性作為考察指標,記錄綜合評分。參考文獻[6]并進行改良,具體各項考察指標的評價方法如下。
2.2.3.1 感官評價
取適量樣品,目檢外觀膏體是否成型、色澤是否均勻,評價等級分為優(yōu)秀、良好、適中、較差;優(yōu)秀得分9~10分,良好得分7~8分,適中得分5~6分,較差得分3~4分,記錄目檢結(jié)果并評分。
2.2.3.2 離心穩(wěn)定性評價
分別取各處方下的膏體樣品2g,置于10ml離心管中,于1000r/min條件下離心10min,觀察是否發(fā)生分層、變色等分離現(xiàn)象,評價等級分為優(yōu)秀、良好、適中、較差;優(yōu)秀得分9~10分,良好得分7~8分,適中得分5~6分,較差得分3~4分,記錄結(jié)果并評分。
對上述兩項考察指標的得分進行加和,作為最終綜合評分結(jié)果。
2.3.1 制備工藝的初步確定
參考文獻[5]進行預實驗,初步確定營養(yǎng)膏的制備工藝,將麥芽粉、神曲粉與營養(yǎng)物質(zhì)干粉(玉米蛋白粉、蜂王漿凍干粉、破壁脫敏花粉、羊奶粉)混合,之后依次加入蜂蜜、山楂提取物、檳榔提取物、蜂膠液,然后按照藥物與基質(zhì)比例為1∶5加入水,在55℃下攪拌30min,調(diào)配成營養(yǎng)膏。
2.3.2 正交試驗設計
以制備工藝為研究對象,通過預試驗發(fā)現(xiàn)攪拌溫度、藥物與基質(zhì)比例、攪拌時間對膏體成型影響較大,所以將其作為考察因素,每個因素各取5個水平,進行單因素試驗。根據(jù)單因素試驗結(jié)果每個因素選取3個水平進行正交試驗篩選最佳制備工藝,復方健胃散寵物營養(yǎng)膏制備工藝的正交設計見表2??疾熘笜伺c評價方法參照2.2.3。
表2 膏體制備工藝的正交設計因素水平表
2.4.1 營養(yǎng)膏中君藥含量測定
參考文獻[7],精密稱定樣品1g,加水100ml,于50℃超聲波法浸提30min,過濾,精密量取濾液25ml,加水50ml,加酚酞指示液2滴,用氫氧化鈉液(0.1mol/L)滴定,即得。每1ml的氫氧化鈉溶液(0.1mol/L)相當于6.404mg的枸櫞酸(C6H8O7)。根據(jù)總酸含量(%)=6.404VM/W計算山楂中有機酸的含量。
式中:V—滴定時消耗氫氧化鈉標準溶液的體積(ml);M—氫氧化鈉標準溶液的濃度(mol/L);W—滴定所取濾液含樣品重(g)。
2.4.2 營養(yǎng)膏的驗證性試驗考察
在優(yōu)選的處方設計及制備工藝下制備3批復方健胃散寵物營養(yǎng)膏,對其外觀、耐熱耐寒性以及離心穩(wěn)定性進行考察。參考文獻[6]并進行改良,考察優(yōu)選處方以及制備工藝的穩(wěn)定性。
2.4.2.1 外觀
復方健胃散寵物營養(yǎng)膏應成型、外觀均勻,在常溫時無不良性狀。
2.4.2.2 耐熱穩(wěn)定性及耐寒穩(wěn)定性
將制備好的復方健胃散寵物營養(yǎng)膏裝入10mL離心管中,將其放入-5℃~-10℃的冰箱中12h,12h之后拿出恢復到室溫,復方健胃散寵物營養(yǎng)膏性狀無明顯變化。
將制備好的復方健胃散寵物營養(yǎng)膏裝入10mL離心管中,將其放入(40±1)℃的恒溫箱中12h,12h之后拿出恢復到室溫,復方健胃散寵物營養(yǎng)膏性狀無明顯變化。
2.4.2.3 離心穩(wěn)定性
將制備好的復方健胃散寵物營養(yǎng)膏裝入10mL離心管中,放入離心機中以1000r/min的速度離心,10min后拿出,復方健胃散寵物營養(yǎng)膏性狀無明顯變化。
表3 處方篩選的正交設計試驗結(jié)果
表3 可以看出,各營養(yǎng)物質(zhì)加入量對膏體的影響順序為A>B>C,即最主要的因素是玉米蛋白粉的加入量,其次是蜂王漿凍干粉的加入量,影響最小的是蜂蜜的加入量。最優(yōu)的處方組合為A2B2C1。即營養(yǎng)物質(zhì)中蛋白粉加入量為2g、蜂王漿凍干粉的加入量為0.3g、蜂蜜的加入量為0.6g。
表4 膏體制備工藝的正交試驗結(jié)果
表4 可以看出,各因素對膏體的影響順序為B>A>C,即最主要的因素是藥物與基質(zhì)的比例,其次是攪拌溫度,影響最小的是攪拌時間。最優(yōu)的制備工藝為A3B1C2。即復方健胃散寵物營養(yǎng)膏的最佳制備工藝為藥物與基質(zhì)的比例為1∶4,在60℃條件下攪拌30min,可制備成膏體并達到預期效果。
按照最優(yōu)處方條件以及最優(yōu)制備工藝制備了3批復方健胃散寵物營養(yǎng)膏,考察結(jié)果表明,優(yōu)選處方及最優(yōu)制備工藝下,制備出的復方健胃散寵物營養(yǎng)膏中有機酸含量為(6.02±0.8)%,目檢膏體呈黃色,外觀均勻,無不良性狀。耐寒耐熱性評價結(jié)果中均未見油水分離的現(xiàn)象;離心穩(wěn)定性良好,于1000 r/min條件下離心10 min,均未發(fā)生分層、變色等油水分離等現(xiàn)象。
試驗前期進行過大量預實驗,試驗后期在文獻基礎上、前期試驗探索上通過單因素試驗及正交試驗,以感官評價與離心穩(wěn)定性作為評價指標對處方設計以及制備工藝進行篩選。結(jié)果:最佳營養(yǎng)物質(zhì)的添加量為2g玉米蛋白粉,0.3g蜂王漿凍干粉,0.6g蜂蜜,0.08g破壁脫敏花粉、0.6g脫脂羊奶粉、0.15g蜂膠液;最佳制備工藝為加入4ml水后在60℃條件下進行攪拌30min,可調(diào)制成寵物營養(yǎng)膏。營養(yǎng)膏的形式彌補了健胃散原本的缺陷,結(jié)合營養(yǎng)物質(zhì),讓動物服用更為方便;有助于保證寵物的健康成長。該工藝操作簡單方便,具有一定的實用性,為成型工藝奠定了基礎。