遲美秀,康辰凱

(延邊朝鮮族自治州檢驗(yàn)檢測(cè)中心（國(guó)家參茸產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心）·吉林延吉·133000)

人參[1]是我國(guó)傳統(tǒng)的名貴中藥，我國(guó)是生產(chǎn)人參、銷售人參的大國(guó)，主產(chǎn)吉林、遼寧、黑龍江等長(zhǎng)白山脈。人參[2]在其生長(zhǎng)過(guò)程中，病蟲(chóng)害較多已知的病蟲(chóng)害有40多種，目前防止人參病蟲(chóng)害的農(nóng)藥有60多種，其中啶蟲(chóng)脒、多菌靈、甲基硫菌靈是常用農(nóng)藥之一。對(duì)人參農(nóng)藥的檢測(cè)本文通過(guò)液相質(zhì)譜法[3]對(duì)人參中的啶蟲(chóng)脒、多菌靈、甲基硫菌靈的殘留進(jìn)行比較分析，探討。為規(guī)范在人參生產(chǎn)過(guò)程中合理使用農(nóng)藥提出建議供相關(guān)企業(yè)提供參考。

圖1 多菌靈

圖2 克百威

1 儀器與藥品

賽多利斯電子天平220S（北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司），超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司，型號(hào)KQ-100B），高效液相色質(zhì)譜聯(lián)用儀（安捷倫1260-6410）、克百威標(biāo)準(zhǔn)品和多菌靈標(biāo)準(zhǔn)品純度均大于99%；乙腈為色譜純，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜分析條件

色譜柱：Agilent Eclipsplus-C18（50mm×2.1mm，1.8μm），液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀帶電噴霧離子源，掃描方式：正離子掃描，流動(dòng)相：乙腈:梯度洗脫，乙腈:0～3min 1～30%，3～6min 30～40%，6～9min 40%，9～15 min 40～60%，19～23min99%，19～23min 99%。流速:0.3mL/min，克百威母離子分子量222、子離子分子量123、165，多菌靈母離子分子量192、子離子分子量160.1、132.2，進(jìn)樣量:2μL。柱溫：室溫。

表1 HPLC-MS-MS測(cè)定參數(shù)Table1HPLC-MS-MSacquisitionparametersforCarbofuranandCarbendazim

圖1 克百威質(zhì)譜圖Fig.1 C-MS-MS chromatogram of Carbofuran

圖2 .多菌靈質(zhì)譜圖Fig.2HPLC-MS-MS chromatogram of arbendazim

圖3 .添加在空白樣品中混標(biāo)的樣品圖（A）HPLC-MS-MS chromatogram of standard of Carbofuran and carbendazim（B）HPLC chromatogram of Carbofuran and carbendazim

2.2 對(duì)照品溶液的制備

將克百威、多菌靈素標(biāo)準(zhǔn)品溶液，用流動(dòng)相稀釋定容,分別得10.0mg/L的混合對(duì)照品溶液。

2.3 樣品溶液的配制

精密稱樣品2.0g，置于25mL離心管中加20mL乙腈超聲10min提取1min，3800r/min離心5min,取5mL上清液，固相萃取柱萃凈化后，將提取液用氮吹儀吹干，流動(dòng)相定容1mL，過(guò)濾0.22μm微孔濾膜，待測(cè)。

2.4 方法驗(yàn)證

2.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線、定量限、檢出限、回收率

取1.0g“空白”人參樣品經(jīng)2.3方法處理后，取多菌靈、克百威標(biāo)準(zhǔn)品10.0μg/mL，配置成10、20、40、60、80μg/kg標(biāo)準(zhǔn)溶液，由面積和濃度進(jìn)行線性回歸，得回歸方程?？税偻=9.94×104X+8672（R2=0.9993,n=5）多菌靈Y=9.7×104X-5762（R2=0.9994,n=5），按照2.1項(xiàng)下的方法測(cè)定，詳見(jiàn)表2

表2 線性范圍、相關(guān)系數(shù)、加標(biāo)回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差、定量限、檢出限Table2 Linear ranges、correlation、cefficients、recoveries、RSDs、LODs、LOQs of Carbofuran and Carbendazim

2.4.2 精密度

按照對(duì)照品溶液制備方法（2.2），取4mL對(duì)照品溶液，用流動(dòng)相稀釋成10mL，超聲，得濃度為4 mg/L的溶液。按照2.1項(xiàng)下的方法測(cè)定，檢查儀器的精密度，詳見(jiàn)表1。

表3 儀器精密度實(shí)驗(yàn)Table 2 Precision experiment

2.4.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)

取濃度為1μg/ml的對(duì)照品溶液，放置于室溫陰暗處1、2、4、8、12h，按照2.1項(xiàng)下的方法測(cè)定。結(jié)果表明樣品在12h內(nèi)穩(wěn)定，詳見(jiàn)表4。

表4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)Table 4 Stability experiments

2.5 樣品含量測(cè)定

本實(shí)驗(yàn)室采用本方法對(duì)本地超市和市場(chǎng)采集的50份人參樣品測(cè)定了，結(jié)果顯示克百威、多菌靈含量均低于檢測(cè)限，結(jié)果是未檢出。

3 討論

3.1 檢測(cè)人參農(nóng)藥殘留的儀器和檢測(cè)方法的選擇

測(cè)定人參農(nóng)藥殘留的儀器多見(jiàn)于氣相、氣相質(zhì)譜和液相。本文采用液相質(zhì)譜聯(lián)用的方法，對(duì)檢測(cè)農(nóng)藥殘留的靈敏度更高，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，適用于不易揮發(fā)的農(nóng)藥檢測(cè)。對(duì)農(nóng)藥檢測(cè)常用的定量方法包括：面積歸一化法、外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。根據(jù)檢測(cè)的儀器的特點(diǎn)，本實(shí)驗(yàn)選擇外標(biāo)方法對(duì)人參進(jìn)行了測(cè)定，根據(jù)被測(cè)的物質(zhì)的母離子和子離子定性，定量分析，有效的避免雜質(zhì)對(duì)測(cè)定過(guò)程的影響。

3.2 人參中不同農(nóng)藥的選擇

針對(duì)人參在不同的生長(zhǎng)期，使用的農(nóng)藥不同，特選克百威、多菌靈提取進(jìn)行研究，克百威是國(guó)家禁用藥品，甲基硫菌靈易生物分解代謝后轉(zhuǎn)化為多菌靈，所以特選克百威，多菌靈檢測(cè)。此外通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)比溶劑直接溶劑萃取和柱固相萃取法的優(yōu)劣性，采用直接溶劑萃取法和固相萃取柱相結(jié)合的方法提取實(shí)現(xiàn)了高效、便捷、分析檢測(cè)。