張露文

(焦作市第二人民醫(yī)院 甲狀腺乳腺外科，河南 焦作 454100)

三陰性乳腺癌的免疫組織化學(xué)檢查孕激素受體(progesterone receptor，PR)、雌激素受體(estrogen receptor，ER)、原癌基因HER-2均為陰性，遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)較高，預(yù)后較其他類型的乳腺癌差。乳腺癌發(fā)病呈年輕化，嚴(yán)重危害女性的身心健康。臨床多采用手術(shù)切除病灶治療，但癌細(xì)胞易脫落、游離，隨著血液、淋巴液擴(kuò)散，形成遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌細(xì)胞增殖、凋亡與某些細(xì)胞因子密切關(guān)系，其中白細(xì)胞介素-8(interleukin-8，IL-8)、環(huán)氧化酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)、血管內(nèi)皮生長因子-A(vascular endothelial growth factor-A，VEGF-A)在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用[1-3]。本研究分析血清IL-8、COX-2、VEGF-A水平變化與三陰性乳腺癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)的關(guān)系及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料將2017年3月至2018年9月焦作市第二人民醫(yī)院收治的67例三陰性乳腺癌患者納入乳腺癌組，將64例乳腺良性腫塊患者納入對照組?；颊呒凹覍倬炇鹬橥鈺?。對照組：年齡22～46歲，平均(33.93±4.90)歲；體質(zhì)量45～68 kg，平均(56.31±4.61)kg；良性腫塊病程1.0～5.5 a，平均(3.24±1.11)a。乳腺癌組：年齡22～48歲，平均(34.81±5.19)歲；體質(zhì)量45～67 kg，平均(55.82±5.07)kg；乳腺癌病程1.5～6.0 a，平均(3.51±0.99)a；國際抗癌聯(lián)盟TNM分期Ⅰ期14例，Ⅱ期31例，Ⅲ期22例。兩組年齡、體質(zhì)量、病程比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。本研究經(jīng)焦作市第二人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過。

1.2 選取標(biāo)準(zhǔn)(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)病理學(xué)檢查、免疫組織化學(xué)檢查確診為三陰性乳腺癌；②臨床資料完整；③無手術(shù)與麻醉禁忌證，有手術(shù)治療指征，能耐受手術(shù)者；④能正常交流者。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤者；②嚴(yán)重心肺功能不全者；③合并其他免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)疾病者；④嚴(yán)重精神、心理疾病致認(rèn)知、語言功能障礙者；⑤妊娠期、哺乳期婦女；⑥有乳腺手術(shù)史或既往有乳腺腫塊史者。

1.3 手術(shù)方法和病理檢測兩組術(shù)前均進(jìn)行常規(guī)檢查，均未發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶。根據(jù)三陰性乳腺癌的臨床分期，對乳腺癌組患者采取改良根治術(shù)、保乳術(shù)治療。對照組患者接受微創(chuàng)手術(shù)切除腫塊。術(shù)后由病理科對患者腫瘤大小、性質(zhì)、淋巴結(jié)狀態(tài)行病理檢查。使用中性甲醛固定患者病理標(biāo)本，石蠟包埋，然后連續(xù)切片4 μm厚，使用免疫組織化學(xué)染色SP法檢測，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。以PBS代替一抗作陰性對照，已知陽性切片為表達(dá)陽性對照。IL-8陽性：連續(xù)選取20個(gè)高倍視野，光鏡下細(xì)胞質(zhì)見棕黃顆粒，陽性細(xì)胞數(shù)占比>25%。COX-2陽性：細(xì)胞質(zhì)內(nèi)或核膜有棕黃色顆粒，陽性細(xì)胞數(shù)占比(5個(gè)高倍視野)>5%。VEGF-A陽性：細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)棕黃色顆粒，選取4個(gè)視野，陽性細(xì)胞>10%。

1.4 觀察指標(biāo)分別于術(shù)前、術(shù)后3 d清晨抽取患者空腹靜脈血5 mL，以3 000 r·min-1離心5～10 min，取上清液，-20 ℃保存，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測COX-2、IL-8、VEGF-A水平。所用酶標(biāo)儀來自美國MD公司，試劑盒來自上海依科賽生物制品有限公司，嚴(yán)格按照操作標(biāo)準(zhǔn)檢測。統(tǒng)計(jì)乳腺癌組1 a內(nèi)復(fù)發(fā)情況，并于1 a后再次檢測乳腺癌組患者的血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平。

2 結(jié)果

2.1 血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平術(shù)前，乳腺癌組血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于對照組(P<0.05)；術(shù)后3 d，乳腺癌組血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平與對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；術(shù)后3 d，乳腺癌組血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平低于術(shù)前(P<0.05)；術(shù)后3 d，對照組血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平與術(shù)前比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組手術(shù)前后血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平比較

2.2 復(fù)發(fā)者與未復(fù)發(fā)者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平術(shù)后1 a，乳腺癌組復(fù)發(fā)4例，未復(fù)發(fā)63例。術(shù)后3 d、術(shù)后1 a，復(fù)發(fā)者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于未復(fù)發(fā)者(P<0.05)；復(fù)發(fā)者術(shù)后1 a血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平高于術(shù)后3 d(P<0.05)。見表2。

表2 復(fù)發(fā)者與未復(fù)發(fā)者術(shù)后3 d、術(shù)后1 a血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平比較

3 討論

乳腺癌屬于常見的惡性腫瘤，三陰性乳腺癌為其中一種分型。與其他類型的乳腺癌相比，三陰性乳腺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移率較高，主要表現(xiàn)為晚期階段易出現(xiàn)肝轉(zhuǎn)移、肺轉(zhuǎn)移，影響患者的生存質(zhì)量。三陰性乳腺癌的發(fā)生、進(jìn)展受各種因素的影響，如細(xì)胞增殖、凋亡過程紊亂，或腫瘤周圍微血管的形成。腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡與機(jī)體某些細(xì)胞因子有重要聯(lián)系。

三陰性乳腺癌浸潤、轉(zhuǎn)移的先決條件為血管新生。本研究結(jié)果顯示，術(shù)前乳腺癌組血清COX-2、IL-8水平高于對照組，術(shù)后3 d乳腺癌組血清COX-2、IL-8水平低于術(shù)前。這表明三陰性乳腺癌患者體內(nèi)血清COX-2、IL-8呈高表達(dá)狀態(tài)，而手術(shù)切除癌組織后機(jī)體血清COX-2、IL-8水平降低，提示血清COX-2、IL-8可反映手術(shù)治療效果。COX-2可刺激癌細(xì)胞增殖和血管生成，抑制宿主免疫功能，為腫瘤生長提供優(yōu)勢條件，增強(qiáng)癌細(xì)胞的侵襲力[4-5]。IL-8可與細(xì)胞表面趨化因子受體1(CXC-chemokine receptor-1，CXCR1)、趨化因子受體2(CXC-chemokine receptor-2，CXCR2)結(jié)合發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，而CXCR1、CXCR2存在于癌細(xì)胞和新生血管內(nèi)皮細(xì)胞中，IL-8與CXCR1、CXCR2結(jié)合后能促進(jìn)癌細(xì)胞增殖及血管生長[6]。除免疫抑制外，乳腺癌發(fā)生發(fā)展的另一關(guān)鍵為血管、淋巴管新生。VEGF-A為血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性有絲分裂原，可作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)癌細(xì)胞增殖；提高血管通透性，導(dǎo)致血漿蛋白滲漏到血管外，形成纖維蛋白凝塊，以此作為新生血管支持物。因此，VEGF-A反映了癌組織血管生成能力，是目前特異性最高、作用最強(qiáng)的血管調(diào)控因子。本研究結(jié)果顯示，術(shù)前乳腺癌組血清VEGF-A水平高于對照組，術(shù)后3 d乳腺癌組血清VEGF-A水平低于術(shù)前。這表明VEGF-A參與三陰性乳腺癌的發(fā)生和進(jìn)展過程。腫瘤的生長必須有新生血管形成為腫瘤細(xì)胞提供足夠營養(yǎng)。隨著癌細(xì)胞的分化，VEGF-A會(huì)呈現(xiàn)高表達(dá)，說明VEGF-A水平可提示患者預(yù)后情況[7-9]。本研究結(jié)果表明，三陰性乳腺癌術(shù)后復(fù)發(fā)者血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平可升高且處于持續(xù)升高狀態(tài)，提示定期監(jiān)測血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平有助于了解手術(shù)預(yù)后與腫瘤進(jìn)展情況，預(yù)測復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。

三陰性乳腺癌患者手術(shù)前后血清COX-2、IL-8、VEGF-A變化顯著，可據(jù)此判斷手術(shù)效果。監(jiān)測三陰性乳腺癌患者術(shù)后血清COX-2、IL-8、VEGF-A水平有助于了解預(yù)后，預(yù)測復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)。