郭 順，陳 強(qiáng)

（1.潼關(guān)縣畜牧發(fā)展中心，陜西渭南 714300；2.陜西安大農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司，陜西渭南 714300）

銅是一種對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育，維持機(jī)體功能至關(guān)重要的微量營(yíng)養(yǎng)素，同時(shí)由于銅具有容易接受和提供電子的能力，參與了許多生化反應(yīng)。此外，銅也是許多酶活性位點(diǎn)的一部分，包括銅鋅超氧化物歧化酶、細(xì)胞色素C氧化酶、L-賴氨酸氧化酶、抗壞血酸氧化酶、酪氨酸酶和多巴胺-羥化酶（Gaetke和Chow，2003）。這些酶在抗氧化防御、黑色素合成、結(jié)締組織形成、多巴胺代謝和線粒體呼吸中發(fā)揮重要作用，同時(shí)它通過誘導(dǎo)花生四烯酸的轉(zhuǎn)化和前列腺素的合成參與抑制炎癥反應(yīng)（任素蘭，2013）。然而，細(xì)胞中高濃度的“游離”銅離子有利于自由基對(duì)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和核酸的損傷，在還原劑即抗壞血酸或谷胱甘肽的存在下，一個(gè)Cu2+離子可以被還原為Cu+，從而催化Haber-Weiss反應(yīng)中過氧化氫形成羥基自由基（畢雪，2015）。此外，銅可以直接與含硫氨基酸如半胱氨酸的硫醇基團(tuán)結(jié)合，導(dǎo)致其氧化并在蛋白質(zhì)之間形成交聯(lián)，這可能導(dǎo)致酶失活或損傷細(xì)胞的結(jié)構(gòu)蛋白（陳藎等，2002）。細(xì)胞內(nèi)銅水平升高的潛在負(fù)面影響受到其與富含硫醇基團(tuán)的胞內(nèi)蛋白質(zhì)結(jié)合的限制，這些蛋白質(zhì)對(duì)銅離子表現(xiàn)出高親和力。同樣，特殊蛋白參與細(xì)胞內(nèi)銅元素的運(yùn)輸，并將銅元素并入酶分子（Ognik等，2016）。由于上述生理功能，家禽日糧中銅的來源通常以硫酸銅的形式補(bǔ)充，但在過去的十年中眾多營(yíng)養(yǎng)實(shí)驗(yàn)也進(jìn)行了金屬納米顆粒的使用，表明有機(jī)體的生物反應(yīng)依賴于粒子的大小、生產(chǎn)方法及劑量（Zhao和Riediger，2014）。但目前關(guān)于納米銅在家禽上的研究報(bào)道較少，因此，本研究以肉仔雞為研究對(duì)象，研究用納米銅替代硫酸銅對(duì)1～28 d肉雞生長(zhǎng)性能、免疫和抗氧化性能的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)試驗(yàn)將平均體重一致的1104只1日齡肉仔雞隨機(jī)分為3組，每組8個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)46只。對(duì)照組肉雞在1～28 d時(shí)飼喂基礎(chǔ)試驗(yàn)日糧（以硫酸銅的形式補(bǔ)充5 mg/kg銅），T1和T2組肉雞在1～28 d時(shí)分別飼喂基礎(chǔ)日糧+2 mg/kg和4 mg/kg銅（納米銅形式）。

表1 肉雞試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.2 生產(chǎn)管理試驗(yàn)期間，每天飼喂肉雞兩次，記錄每次飼喂量，以統(tǒng)計(jì)每周的飼料用量，在14和28 d時(shí)對(duì)每個(gè)重復(fù)的動(dòng)物進(jìn)行稱重。試驗(yàn)期間每個(gè)重復(fù)的肉雞維持在相同的飼養(yǎng)環(huán)境中，自由采食和飲水，并進(jìn)行常規(guī)免疫。

1.3 樣品采集與分析試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇10只體重接近的肉雞禁食12 h后翅下靜脈采血10 mL，一部分保留全血，另一部分分離血清。采用血液分析儀測(cè)定全血指標(biāo)，血清抗氧化指標(biāo)用商品試劑盒測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)分析試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS軟件Oneaway ANOVA法進(jìn)行單因素方差分析，采用Duncan’s法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 納米銅對(duì)肉雞生長(zhǎng)指標(biāo)的影響由表2可知，對(duì)照組與處理組對(duì)14 d肉雞的體重，1～14 d、15～28 d和1～28 d平均日增重和平均日采食量及1～14 d肉雞料重比的影響均無顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，2 mg/kg 納米銅組28 d肉雞體重顯著提高1.64%（P＜0.05），但15～28 d和1～28 d料重比分別顯著降低3.93%和3.18%（P＜0.05）。

表2 納米銅對(duì)1～28 d肉雞生長(zhǎng)指標(biāo)的影響

2.2 納米銅對(duì)肉雞血液生化指標(biāo)和免疫性能的影響由表3可知，日糧處理對(duì)肉雞血液血球容積和白細(xì)胞占比及IgG和溶菌酶濃度的影響均無顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，2和4 mg/kg納米銅組血液血紅蛋白和紅細(xì)胞占比顯著提高 （P＜0.05），但隨著日糧納米銅從0添加到 4 mg/kg，紅細(xì)胞沉積顯著降低（P＜0.05）。2和4 mg/kg納米銅組肉雞血液IgA濃度較對(duì)照組分別顯著提高7.14%和5.37%（P＜0.05），同時(shí)IL-6濃度分別顯著提高7.34%和5.87%（P＜0.05）。2 mg/kg納米銅組肉雞血液IgM濃度較對(duì)照組顯著提高15.24%（P＜0.05）。

表3 納米銅對(duì)1～28 d肉雞血液生化指標(biāo)和 免疫性能的影響

2.3 納米銅對(duì)肉雞抗氧化性能的影響由表4可知，日糧添加不同水平納米銅對(duì)肉雞血清超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶活性的影響均無顯著差異（P＞0.05）。2 mg/kg和4 mg/kg納米銅組血清總抗氧化力活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但丙二醛濃度顯著降低（P＜0.05）。隨著日糧納米銅添加水平的升高，銅藍(lán)蛋白濃度顯著升高（P＜0.05）。

表4 納米銅對(duì)1～28 d肉雞血清抗氧化性能的影響

3 討論

本試驗(yàn)研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，日糧用2 mg/kg和4 mg/kg納米銅替代5 mg/kg硫酸銅對(duì)肉雞日增重、采食量及試驗(yàn)前期的料重比無顯著影響。但2 mg/kg納米銅組顯著提高了28 d肉雞的體重及試驗(yàn)后期和全期的飼料效率。作者推測(cè)，納米銅對(duì)生長(zhǎng)性能的積極作用可以歸因于它較硫酸銅更容易吸收，對(duì)胃腸道微生物群的殺菌作用更好，本試驗(yàn)結(jié)果與Xia等（2004）報(bào)道的結(jié)果一致，發(fā)現(xiàn)在0～7周齡肉雞日糧中添加36和75 mg/kg銅及1.5 g/kg銅蒙脫土可提高小腸內(nèi)容物中總蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的活性。

納米銅組肉雞血液血紅蛋白和紅細(xì)胞占比顯著 提 高，這與Ghasemipoor和Zolghadri（2014）報(bào)道的結(jié)果一致。此外，添加納米銅可降低紅細(xì)胞血沉率。血液中免疫球蛋白IgA、IgM含量增加，而溶菌酶活性無顯著差異，這與Wang等（2011）報(bào)道的結(jié)果一致，其研究也發(fā)現(xiàn)納米銅可以提高C3和C4濃度。

Leeson（2009）報(bào)道，日糧適宜水平的銅會(huì)影響脂質(zhì)代謝，如降低家禽產(chǎn)品中的膽固醇水平。根據(jù)Pineda等（2013）的研究，將0.3 mL納米銅水膠體注射到受精卵氣室中有可能降低生長(zhǎng)雞的氧化強(qiáng)度。該研究發(fā)現(xiàn)，不管注射納米銅的時(shí)間是多少，經(jīng)過這一過程孵出的小雞代謝率都顯著降低，而這與較低的氧氣消耗有關(guān)。這些結(jié)果表明，用2 mg/kg和4 mg/kg納米銅替代硫酸銅可顯著提高血清總抗氧化力活性，降低血清丙二醛含量，這一結(jié)果提示納米銅降低了重要細(xì)胞結(jié)構(gòu)的氧化。

4 結(jié)論

日糧用低劑量納米銅替代硫酸銅對(duì)肉雞生長(zhǎng)性能無負(fù)面影響，同時(shí)可以改善紅細(xì)胞和IgA濃度，提高血清抗氧化指標(biāo)。在本試驗(yàn)條件下，考慮整個(gè)試驗(yàn)期肉雞的飼料報(bào)酬，以納米銅的形式添加銅水平為2 mg/kg效果最佳。