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        生防芽孢桿菌與殺菌劑的篩選復(fù)配及對(duì)欒樹枝枯病防控效果

        2021-03-05 00:57:36曾艷玲黎肇家李姝江
        關(guān)鍵詞:枯病粗提物多菌靈

        曾艷玲,劉 韓,黎肇家,李姝江*

        (1.長(zhǎng)江上游森林資源保育與生態(tài)安全國家林業(yè)和草原局重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/四川農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)院,成都 611130;2.四川省甘孜州林業(yè)科學(xué)研究所,四川康定 626001)

        欒樹枝枯病由小新殼梭孢(Neofusicoccum parvum)引起的枝干病害[1]。枝枯病可致欒樹枝條無法正常生長(zhǎng),病害嚴(yán)重會(huì)導(dǎo)致整個(gè)枝條干枯死亡,藥用價(jià)值、觀賞價(jià)值、園林綠化價(jià)值、經(jīng)濟(jì)價(jià)值降低,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。中國北部及中部大部分省區(qū)均有欒樹枝枯病的發(fā)生。小新殼梭孢是一種木本植物病害常見病原菌。小新殼梭孢可以導(dǎo)致多種木本植物發(fā)生多種病害,可以侵染桉樹,導(dǎo)致桉樹枝干枯萎[2-3];能使麻風(fēng)樹發(fā)生芽枯病[4];能使柑橘果實(shí)腐爛[5];藍(lán)莓、核桃枝干枯死等[6-7]。目前對(duì)小新殼梭孢引起的病害防治主要是依靠苯醚甲環(huán)唑、多菌靈和甲基硫菌靈等化學(xué)藥劑防治為主[2,8]。然而,化學(xué)藥劑長(zhǎng)期使用破壞生態(tài)環(huán)境,并且長(zhǎng)期使用高濃化學(xué)藥劑對(duì)人體健康存在潛在的威脅[9-10],病原菌容易產(chǎn)生抗藥性[11-12]。生物防治具有低毒、綠色環(huán)保的優(yōu)點(diǎn),但易受環(huán)境、氣候、定殖能力等的影響,存在大田防效差、顯效慢等特點(diǎn)。目前已有多種菌藥聯(lián)用增效組合的報(bào)道,將生物防治與化學(xué)防治相結(jié)合,不但能控制病害,而且降低化學(xué)藥劑使用濃度。該策略在植物保護(hù)研究領(lǐng)域被廣泛研究,且取得了良好效果[13]。W.Saksirirat等[14]認(rèn)為代森錳鋅與木霉結(jié)合使用能有效地控制馬鈴薯莖腐病??莶菅挎邨U菌與氟環(huán)唑聯(lián)用對(duì)禾谷鐮孢霉的增效作用,結(jié)果表明:菌藥聯(lián)用對(duì)禾谷鐮孢霉的最高抑菌活性可達(dá)74.44%,表現(xiàn)增效和持效作用[15]。牛贍光等[16]的研究表明,多菌靈對(duì)熒光假單胞桿菌P32的存活和定殖有一定的促進(jìn)作用,并提高了P32防治棉花黃萎病的效果。但是利用生防芽孢桿菌和化學(xué)藥劑協(xié)同防治小新殼梭孢引起的植物病害鮮有報(bào)道。為減少化學(xué)農(nóng)藥的使用量,延緩抗藥性,實(shí)現(xiàn)化學(xué)農(nóng)藥的減量增效,本研究將篩選具有對(duì)小新殼梭孢抑制作用的化學(xué)藥劑與解淀粉芽孢桿菌進(jìn)行復(fù)配,以期為防治病害提供技術(shù)支撐。

        1 材料和方法

        1.1 供試材料

        枯草芽孢桿菌菌株 BS(Bacillus subtilis)、貝萊斯芽孢桿菌BV(Bacillus velezensis)、解淀粉芽孢桿菌 BA(Bacillus amyloliquefaciens)、甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌BM(Bacillus methylotrophicus)、小新殼梭孢NP(Neofusicoccum parvum)均由四川農(nóng)業(yè)大學(xué)林木病理實(shí)驗(yàn)室提供,分離自四川廣安前鋒區(qū)欒樹苗圃的兩年生健康欒樹。發(fā)病欒樹采自于四川廣安前鋒區(qū)欒樹苗圃兩年生苗木;盆栽欒樹采購自成都市眾鑫丹桂苗木專業(yè)合作社一年生苗木?;|(zhì)為市銷營養(yǎng)土和自然土按1∶2混勻。50%多菌靈(四川國光農(nóng)化股份有限公司),50%咪鮮胺(江蘇輝豐生物農(nóng)業(yè)股份公司),30%甲霜-噁霉靈(河南省開封市浪潮化工有限公司),40%菌核凈(浙江斯佩斯植保有限公司),80%代森錳鋅(鄭州宏順化工產(chǎn)品有限公司),80%?!じd\(山東東合生物科技有限公司),78%波爾多-錳鋅(美國仙農(nóng)有限公司),農(nóng)泰樂70%丙森鋅可濕性粉劑(江蘇利民化工股份有限公司),66.5%霜霉威鹽酸鹽(河北中保綠農(nóng)作物科技有限公司),47%春雷王銅(陜西麥可羅生物科技有限公司)。

        1.2 培養(yǎng)基及發(fā)酵液制備

        馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(馬鈴薯200 g,葡萄糖 20 g,瓊脂 20 g,水 1 000 mL);LB 培養(yǎng)基(酵母浸粉5 g、氯化鈉10 g、胰蛋白酶10 g)。使用100 mL LB培養(yǎng)液培養(yǎng)芽孢桿菌菌株24 h得到發(fā)酵液。

        1.3 4種芽孢桿菌對(duì)病原菌的室內(nèi)抑菌篩選

        1.3.1 芽孢桿菌菌懸浮液抑菌效果

        取芽孢桿菌發(fā)酵液,離心去掉上清液,菌體重新用無菌水懸浮使菌體濃度達(dá)到1×107cfu/mL。選用對(duì)峙平板法[17]測(cè)定芽孢桿菌對(duì)病原菌的抑菌效果,根據(jù)菌體懸浮液抑菌效果篩選出抑菌率具有顯著高的芽孢桿菌。抑菌率=(對(duì)照組菌落直徑-處理組菌落直徑)/(對(duì)照組菌落直徑-菌塊直徑)×100%。

        1.3.2 芽孢桿菌發(fā)酵液無菌上清液抑菌效果

        挑取芽孢桿菌發(fā)酵液,離心,將上清液移到新的無菌離心管,去掉菌體,上清液反復(fù)經(jīng)過0.22 μm濾膜過濾除去殘余菌體,制成無菌上清液。采用瓊脂擴(kuò)散法[18]測(cè)定抑菌效果。抑菌率=(對(duì)照組菌落直徑-處理組菌落直徑)/(對(duì)照組菌落直徑-菌塊直徑)×100%。

        1.3.3 芽孢桿菌粗提取物的抑菌效果

        向無菌上清液加入硫酸銨鹽析[19](飽和度30%、40%、50%、60%、70%),攪拌均勻,4℃放置 48 h,雙層濾紙過濾后,用去離子水溶解沉淀,再反復(fù)經(jīng)過0.22 μm微孔濾膜過濾滅菌,濾液用于檢測(cè)抗菌活性。收集所有經(jīng)過微孔濾膜過濾的溶液,將收集好的溶解加入甲醇旋渦攪拌混勻,在4℃,6 000 r/min下離心10 min,去掉硫酸銨鹽分沉淀,即得粗提取物。粗提取物采用紫外吸收法(OD280)測(cè)定濃度[20]。粗提取物經(jīng)過0.22 μm微孔濾膜過濾,濾液用于抗菌活性檢測(cè),測(cè)定抑菌率。

        1.4 化學(xué)殺菌劑對(duì)小新殼梭孢的室內(nèi)毒力篩選[21]

        采用生長(zhǎng)速率法[22]測(cè)定殺菌劑對(duì)小新殼梭孢菌絲生長(zhǎng)的抑制率。將供試藥劑分別稀釋:5、10、15、20、25、30、35、40 mg/L 用于試驗(yàn)濃度梯度,多菌靈試驗(yàn)濃度設(shè)計(jì)為 0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4 mg/L。采用十字交叉法[23]測(cè)定各處理的菌落直徑,并通過抑菌率計(jì)算EC50值[24]、P值。比較毒力大小及抑菌效果,篩選最佳抑菌效果的藥劑作為后續(xù)利用。

        1.5 化學(xué)殺菌劑與芽孢桿菌混合搭配對(duì)病原菌的室內(nèi)篩選

        1.5.1 化學(xué)殺菌劑對(duì)芽孢桿菌菌株生長(zhǎng)的影響

        以化學(xué)殺菌劑50 mg/L濃度為母液,將母液藥劑配制成含藥 0.5、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4 mg/L 的 LB液體培養(yǎng)基200 mL。根據(jù)1.3篩選結(jié)果,將目標(biāo)芽孢桿菌懸液50 μL接入含化學(xué)藥劑LB液體培養(yǎng)基中,25℃,150 rpm/min培養(yǎng)24 h。經(jīng)過含藥培養(yǎng)基培養(yǎng)之后,芽孢桿菌懸浮液OD600值[25]。

        1.5.2 聯(lián)合毒力測(cè)定

        以測(cè)定殺菌劑和粗提物有效中量EC50值為基礎(chǔ),配制50倍母液Wadley法確定復(fù)配比例混合單劑成為復(fù)合劑[26],設(shè)計(jì)殺菌劑與粗提物(V殺菌劑∶V粗提物)復(fù)配比例為2∶0、1∶1、1∶2、1∶4、2∶1、4∶1、5∶1、7∶1、0∶2。制成含復(fù)合劑的PDA培養(yǎng)基,使培PDA養(yǎng)基中復(fù)合劑體積濃度為2.00%。同時(shí)分別設(shè)計(jì)以殺菌劑和粗提物EC50值為基礎(chǔ)的單劑抑菌率試驗(yàn),單劑試驗(yàn)按在復(fù)合配比中所占有的比例進(jìn)行試驗(yàn),用十字交叉法測(cè)定各處理的菌落直徑,并計(jì)算實(shí)際抑菌率,采用Horsfall方法[27]評(píng)價(jià)復(fù)配聯(lián)合毒力作用。

        1.6 欒樹枝枯病盆栽防治試驗(yàn)

        采用傷口接種法[28]檢測(cè)欒樹枝枯病防治效果。在欒樹苗木枝干需要?jiǎng)潅幾鳂?biāo)記,用無菌水洗凈并用酒精棉消毒后,滅菌刀片在標(biāo)記處橫縱交叉劃傷造成輕微傷口;將生長(zhǎng)3 d的菌餅接種到傷口處,保鮮膜包裹紗布保濕,每隔2 d揭開紗布不揭開保鮮膜觀察是否需要更換菌餅,常規(guī)管理。苗木發(fā)病后,依次用篩選出來的化學(xué)殺菌劑(4 mg/L)、芽孢桿菌發(fā)酵液(OD600為1.522)、芽孢桿菌粗提取物(OD600為 0.079)、復(fù)合劑(100%)、蒸餾水(CK)涂布處理發(fā)病部位,30 d后記錄發(fā)病情況、計(jì)算病情指數(shù)和防治效果(表1)。

        表1 枝干病害分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)Table 1 Classification criteria of branch diseases

        病情指數(shù)=[∑(病級(jí)株數(shù)×代表數(shù)值)]/(株數(shù)總和×發(fā)病最重等級(jí)的代表數(shù)值)

        防治效果=[對(duì)照病情指數(shù)-處理病情指數(shù)]/對(duì)照病情指數(shù)×100%

        1.7 數(shù)據(jù)分析

        試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用origin2018和SPSS 22.0軟件分析處理,LSD 法做多重比較分析(P<0.05)。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 4種芽孢桿菌對(duì)病原菌抗菌效果的室內(nèi)篩選

        2.1.1 芽孢桿菌菌懸液的室內(nèi)抑菌篩選

        初步篩選結(jié)果如表2所示,枯草芽孢桿菌的抑菌率為41.65%,顯著低于其他菌株。因此通過菌體對(duì)小新殼梭孢的抑菌率篩選貝萊斯芽孢桿菌、甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌和解淀粉芽孢桿菌進(jìn)入下階段篩選。

        表2 4種芽孢桿菌懸浮液對(duì)病原菌抑菌率Table 2 The antifungal rate of four Bacillus suspensions to pathogen(5 days)

        2.1.2 無菌上清液對(duì)枝枯病菌的抑菌效果

        如圖1顯示3種菌的抑菌率隨著培養(yǎng)時(shí)間的推移,抑菌率先上升再下降。貝萊斯芽孢桿菌培養(yǎng)液的抑制率總是小于甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌和解淀粉芽孢桿菌,甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌與解淀粉芽孢桿菌的培養(yǎng)液對(duì)小新殼梭孢的抑制作用明顯,篩選出甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌和解淀粉芽孢桿菌進(jìn)入下一個(gè)階段。

        圖1 無菌上清液對(duì)病原菌的抑菌率隨時(shí)間變化趨勢(shì)圖Figure 1 Trend chart of antibacterial rate of sterile supernatant with time

        2.1.3 粗提取物篩選

        試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌和解淀粉芽孢桿菌經(jīng)過硫酸銨沉淀之后的培養(yǎng)液所含的非蛋白類對(duì)小新殼梭孢無抗菌活性(抑菌率為0),而蛋白類提取物質(zhì)對(duì)小新殼梭孢具有抑制效果(表3),且解淀粉芽孢桿菌粗提取物抑菌率顯著高于甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌粗提取物(Sig<0.05),說明解淀粉芽孢桿菌的蛋白類代謝物對(duì)小新殼梭孢的抑菌能力強(qiáng)于甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌。因此,選擇解淀粉芽孢桿菌作為篩選之后的拮抗菌菌株。

        表3 芽孢桿菌蛋白類代謝物在不同硫酸銨濃度沉淀下對(duì)病原菌的獨(dú)立性檢驗(yàn)Table 3 Independence test of two bacillus protein metabolites under different ammonium sulfate concentrations for pathogens

        2.2 化學(xué)殺菌劑對(duì)小新殼梭孢的室內(nèi)毒力篩選

        在10種化學(xué)藥劑對(duì)小新殼梭孢毒力試驗(yàn)中(表4),50%多菌靈可濕性粉劑EC50值最小,抑菌效果最佳,其次是50%咪鮮胺-錳鋅可濕性粉劑,且EC50值相差較小。毒力效果較差的是40%菌核凈可濕性粉劑和80%代森錳鋅可濕性粉劑;80%福-福鋅可濕性粉劑、78%波爾多-錳鋅可濕性粉劑和70%丙森鋅可濕性粉劑對(duì)病原菌基本沒有毒力作用,EC50值超過100 mg/L。毒力回歸方程斜率B值與病原菌對(duì)藥劑的敏感性成正相關(guān)關(guān)系,47%春雷王銅可濕性粉劑和66.5%霜霉威鹽酸鹽水劑毒力試驗(yàn)B為負(fù)值,在毒理學(xué)上不成立,對(duì)小新殼梭孢毒力試驗(yàn)所測(cè)得的EC50值也不成立,對(duì)小新殼梭孢沒有抑菌效果。B值最大為40%菌核凈可濕性粉劑約2.185,但40%菌核凈可濕性粉劑EC50較大不適合作為小新殼梭孢的防治藥物。50%多菌靈可濕性粉劑EC50小于50%咪鮮胺-錳鋅 EC50,B值高于50%咪鮮胺-錳鋅,說明小新殼梭孢對(duì)50%多菌靈可濕性粉劑的敏感度增強(qiáng)幅度強(qiáng)于50%咪鮮胺-錳鋅。因此根據(jù)化學(xué)藥劑毒力測(cè)試篩選結(jié)果,50%多菌靈可濕性粉劑適合作為小新殼梭孢化學(xué)防治藥劑選擇。

        表4 10種化學(xué)藥劑對(duì)小新殼梭孢的毒力效果Table 4 Toxicity of 10 fungicides to Neofusicoccum parvum

        2.3 化學(xué)殺菌劑與芽孢桿菌混合搭配對(duì)病原菌的室內(nèi)篩選

        2.3.1 多菌靈對(duì)解淀粉芽孢桿菌生物相容性

        經(jīng)過含藥LB培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h之后,含藥培養(yǎng)基渾濁,對(duì)照組澄清,即解淀粉芽孢桿菌與多菌靈有良好的生物相容性,經(jīng)過分光光度計(jì)測(cè)定每個(gè)含藥培養(yǎng)基OD600值,各個(gè)培養(yǎng)基菌液OD600均在1.027~1.037之間(表5),各個(gè)多菌靈藥劑濃度對(duì)解淀粉芽孢桿菌生長(zhǎng)速度沒有影響。多菌靈和解淀粉芽孢桿菌可以共存并沒有出現(xiàn)抑制生長(zhǎng)速度的情況,所以多菌靈和解淀粉芽孢桿菌可以相互混合搭配。

        表5 解淀粉芽孢桿菌在含藥LB培養(yǎng)基培養(yǎng)24 h OD600值Table 5 OD600values of Bacillus amyloliquefaciens cultured in drug-containing LB medium for 24 h

        2.3.2 粗提物抗菌效果

        解淀粉芽孢桿菌粗提物抑菌試驗(yàn)結(jié)果顯示,當(dāng)粗提物濃度達(dá)到70 ml/L時(shí),抑菌率達(dá)到50%以上,EC50值為68.0070mg/L。毒力回歸方程斜率為4.1034,該斜率大于多菌靈毒力回歸方程斜率值(1.205 7),則說明小新殼梭孢對(duì)粗提物敏感度高于對(duì)多菌靈的敏感度。

        2.3.3 復(fù)配劑對(duì)病原菌的毒力測(cè)定

        對(duì)于小新殼梭孢而言,復(fù)合劑實(shí)際抑菌率隨著配比比例的變化而變化,變化趨勢(shì)隨著多菌靈比例的提高而提高。當(dāng)V(多菌靈)∶V(粗提物)比例為1∶4和 1∶2時(shí),IR<1,屬于拮抗作用;比例為 1∶1到 7∶1時(shí),IR>1,則為加和作用,其中 5∶1是增效作用IR最大為1.222。

        V(多菌靈)∶V(粗提物)為 5∶1 為優(yōu)選復(fù)配比例。

        2.4 欒樹枝枯病的盆栽防治效果

        欒樹枝枯病防治效果如表8所示,所選的藥劑對(duì)欒樹枝枯病防治表現(xiàn)出良好的防治效果,施加藥劑處理組無葉片枯萎現(xiàn)象,而對(duì)照組欒樹出現(xiàn)葉片缺水枯萎現(xiàn)象(圖2)。防治效果最佳為復(fù)合劑,復(fù)合劑處理組發(fā)病率為27.80%,病情指數(shù)均為15.62%,防治效果為81.99%,防治效果顯著高于其他防治試劑。接種防治試劑后欒樹發(fā)病明顯緩慢,對(duì)照組發(fā)病率高達(dá)為90.42%,病情指數(shù)71.43%顯著高于試驗(yàn)組。粗提物防治效果低于多菌靈,而復(fù)合劑防治效果增強(qiáng),多菌靈成分對(duì)防治效果起主導(dǎo)作用,解淀粉芽孢桿菌代謝產(chǎn)物在防治起輔助作用。多菌靈在芽孢桿菌代謝產(chǎn)物的輔助下,防治效果增強(qiáng),防治效果所反映的效應(yīng)與室內(nèi)毒力試驗(yàn)基本一致。

        圖2 藥劑對(duì)欒樹枝枯病盆栽防治效果Figure 2 Prevention effect of fungicides on potting of Koelreuteria bipinnata branch withered disease

        表6 解淀粉芽孢桿菌粗提物對(duì)病原菌的毒力測(cè)定Table 6 Toxicity of crude extract of Bacillus amyloliquefaciens to Neofusicoccum parvum

        表7 復(fù)配劑對(duì)病原菌的毒力試驗(yàn)Table 7 Toxicity test of compounding agents to pathogenic bacteria

        表8 藥劑對(duì)欒樹枝枯病盆栽防治效果Table 8 Prevention effect of fungicides on potting of Koelreuteria bipinnata branch withered disease

        3 討論

        枝枯病是危害比較嚴(yán)重的一種枝干病害,能夠危害林木的主干、大枝和小的枝條,林木被枝枯病病原菌侵染以后,輕則樹皮腐爛,影響?zhàn)B分傳輸,重則整個(gè)枝條或者整棵樹死亡。枝枯病的防治方法包括增強(qiáng)樹勢(shì)或在秋天落葉后和春天萌芽前在枝干噴施藥劑預(yù)防;發(fā)病初期及時(shí)刮除病斑,并涂藥劑防護(hù)。當(dāng)前防治枝枯病的主要藥劑是化學(xué)殺菌劑,但是長(zhǎng)期大量使用化學(xué)藥劑破壞生態(tài)的弊端不容忽視。本研究所篩選的解淀粉芽孢桿菌在其生長(zhǎng)過程中能夠產(chǎn)生多種抑菌物質(zhì),具有廣泛抑制真菌與細(xì)菌的功能,近年來解淀粉芽孢桿菌作為益生菌的應(yīng)用方面的研究與探索越來越多[29],和其他生防菌一樣存在諸如防效不穩(wěn)定和商業(yè)化困難等問題。已有研究表明:化學(xué)藥劑有助于生防微生物克服包括病原菌在內(nèi)的自然環(huán)境中習(xí)居微生物的排斥作用,使其能夠順利地在各種土壤生態(tài)環(huán)境中定殖、繁殖,并形成優(yōu)勢(shì)種群,從而更好地發(fā)揮生物防治作用。兩種植物病害防治方式相協(xié)同可以相互補(bǔ)充各自的短處發(fā)揮各自的優(yōu)勢(shì),增強(qiáng)防治效果[30]。

        生防微生物與化學(xué)藥劑協(xié)同防治植物病害既能達(dá)到預(yù)期防治效果又能減少化學(xué)藥劑的使用,本試驗(yàn)結(jié)果也證實(shí)了這種情況:利用50%多菌靈可濕性粉劑與解淀粉芽孢桿菌粗提物復(fù)配成新的復(fù)合劑,其中50%多菌靈可濕性粉劑與解淀粉芽孢桿菌粗提物復(fù)配比例為5∶1增效作用最強(qiáng)。盆栽試驗(yàn)防治效果以復(fù)合劑最佳,復(fù)合劑防治效果為83.83%,顯著優(yōu)于單劑防治效果(粗提物防治效果66.14%;多菌靈防治效果74.98%)。單劑試驗(yàn)中多菌靈單劑防治效果優(yōu)于芽孢桿菌代謝產(chǎn)物單劑,而復(fù)合劑因有芽孢桿菌代謝產(chǎn)物的參與,不僅可以減少多菌靈藥劑的使用,還可以增強(qiáng)多菌靈殺菌效果,提高防治效果,即高效又降低環(huán)境污染。

        盆栽試驗(yàn)結(jié)果與室內(nèi)毒力試驗(yàn)結(jié)果基本一致,但是這只是在室內(nèi)和盆栽進(jìn)行的試驗(yàn),大部分環(huán)境條件均可以通過人為控制,而自然條件是復(fù)雜多樣的、是不可控制的,因而在自然條件下,復(fù)合劑和藥劑單劑對(duì)欒樹枝枯病的防治效果要取得良好的效果還需要進(jìn)一步等待研究。本研究只針對(duì)欒樹枝枯病病原菌進(jìn)行了篩選復(fù)配對(duì)應(yīng)的藥劑,因此本試驗(yàn)涉及的其他芽孢桿菌如甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌是否也能與多菌靈或其他殺菌劑進(jìn)行復(fù)配,復(fù)配后是否也能提高防治效果;多種芽孢桿菌是否能與殺菌劑復(fù)配等問題,以及關(guān)于如何增強(qiáng)菌藥聯(lián)用后芽孢桿菌拮抗代謝物質(zhì)對(duì)靶標(biāo)病原菌的抑菌活性,也將成為下一步研究的關(guān)鍵。通過研究其菌藥聯(lián)合增效機(jī)制,可以更清楚地了解如何使二者達(dá)到優(yōu)勢(shì)互補(bǔ),發(fā)揮多位點(diǎn)、多途徑的特點(diǎn),從而達(dá)到減少化學(xué)藥劑用藥量、增強(qiáng)防效的目的。

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