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        急性白血病患者紅細(xì)胞生成素及EPOR的表達(dá)及其臨床意義

        2021-03-02 07:18:06董奎良姚洋劉嬌媛
        當(dāng)代醫(yī)學(xué) 2021年6期
        關(guān)鍵詞:血漿水平檢測

        董奎良,姚洋,劉嬌媛

        (大石橋市中心醫(yī)院檢驗科,遼寧 營口 115100)

        急性白血病屬于臨床中發(fā)生率較高的一種血液系統(tǒng)腫瘤,是一類造血干細(xì)胞的惡性克隆性疾病,臨床主要表現(xiàn)為白血病細(xì)胞出現(xiàn)異常增殖,凋亡受到阻礙,抑制正常造血[1]?;熓乾F(xiàn)階段臨床治療急性白血病的主要方式,但臨床治療效果不佳,具有較高的復(fù)發(fā)率和死亡率[2]。有研究[3]結(jié)果顯示,急性白血病的發(fā)生、發(fā)展與基因和相關(guān)信號通路異常密切相關(guān)。本研究主要分析急性白血病患者紅細(xì)胞生成素(EPO)及紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)的表達(dá)及其臨床意義,以期為急性白血病的防治提供指導(dǎo),現(xiàn)報道如下。

        1 資料與方法

        1.1 臨床資料 選取本院2018年2月至2019年7月收治的急性白血病患者80例,其中急性髓系白血病患者(AML組)與急性淋巴細(xì)胞白血病(ALL組)各40例,并選擇同期收治的40例非血液系統(tǒng)疾病患者作為對照組。AML 組男28 例,女12例;年齡3~44 歲,平均(21.2±2.3)歲。ALL 組男 25 例,女15例;年齡4~43歲,平均(20.6±2.7)歲。對照組男23例,女17例;年齡8~52歲,平均(20.3±3.1)歲。3組臨床資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn):急性白血病患者均滿足相關(guān)的診斷標(biāo)準(zhǔn);肝腎功能無異常;患者知情同意并簽署知情同意書;本研究經(jīng)本院倫理協(xié)會審核批準(zhǔn)。排除標(biāo)準(zhǔn):凝血功能異常者;精神疾病者;意識障礙者;嚴(yán)重肝腎功能異常者。

        1.2 方法 ①選擇ELISA法對骨髓血漿中的EPO、EPOR水平進(jìn)行檢測:收集研究對象骨髓上清液,置于-80 ℃的環(huán)境下保存,根據(jù)ELISA試劑盒操作步驟開展相關(guān)檢測。②采用RTPCR法檢測EPO、EPOR的mRNA表達(dá)水平:收集研究對象骨髓沉淀,置于-80 ℃的環(huán)境下保存,根據(jù)RNAis Plus操作步驟提取骨髓RNA,檢測其濃度,選擇TaKaRa Prime seripttm RT reagen tKit逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,采用熒光定量PCR法檢測mRNA水平。③采用Westernblot法檢測EPO、EPOR蛋白表達(dá)水平:收集研究對象骨髓沉淀,置于-80 ℃的環(huán)境下保存,采用BCA法測定蛋白濃度,配制濃度為5%的濃縮膠和濃度為10%的SDS-PAGE 分離膠,50 μg 蛋白上樣電泳,轉(zhuǎn)至 0.2 μm PVDF膜,選擇濃度為5%的脫脂奶粉在室溫下封閉2 h,一抗4 ℃孵育過夜,然后進(jìn)行洗膜處理,二抗室溫孵育1 h,然后選擇ECL顯影曝光。

        1.3 觀察指標(biāo) 比較AML 組、ALL 組和對照組骨髓血漿中EPO、EPOR水平及其mRNA、蛋白水平表達(dá)情況。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計量資料以“”表示,比較采用t檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 3 組骨髓血漿中 EPO、EPOR 水平比較 ALL 組、AML 組骨髓血漿中的EPO表達(dá)明顯高于對照組,EPOR表達(dá)明顯低于對照組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);ALL組、AML組骨髓血漿中的EPO、EPOR表達(dá)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,見表1。

        表1 3組骨髓血漿中EPO、EPOR水平表達(dá)比較()Table 1 Comparison of the expression of EPO and EPOR levels in bone marrow plasma among the three groups()

        表1 3組骨髓血漿中EPO、EPOR水平表達(dá)比較()Table 1 Comparison of the expression of EPO and EPOR levels in bone marrow plasma among the three groups()

        注:與對照組比較,aP<0.05

        組別ALL組AML組對照組EPOR表達(dá)(ng/mL)1.61±0.48a 1.59±0.87a 8.43±1.24例數(shù)40 40 40 EPO表達(dá)(pg/mL)830.34±261.44a 940.24±330.96a 486.28±57.15

        2.2 3 組骨髓血漿中EPO mRNA、EPOR mRNA 水平比較 ALL組、AML組骨髓血漿中的EPO mRNA、EPOR mRNA水平均明顯高于對照組(P<0.05);ALL 組、AML 組骨髓血漿中的EPO mRNA、EPOR mRNA水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,見表2。

        2.3 3組骨髓血漿中EPO、EPOR蛋白水平表達(dá)比較 ALL組、AML 組骨髓血漿中EPO、EPOR 蛋白水平表達(dá)明顯高于對照組(P<0.05);而ALL 組、AML 組骨髓血漿中EPO、EPOR 蛋白水平表達(dá)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義,見表3。

        表2 3組骨髓血漿中EPO mRNA、EPOR mRNA水平比較()Table 2 Comparison of the levels of EPOmRNA and EPOR mRNA in bone marrow plasma among the three groups()

        表2 3組骨髓血漿中EPO mRNA、EPOR mRNA水平比較()Table 2 Comparison of the levels of EPOmRNA and EPOR mRNA in bone marrow plasma among the three groups()

        注:與對照組比較,aP<0.05

        EPOR mRNA 2.76±1.73a 3.02±1.33a 0.81±0.25組別ALL組AML組對照組例數(shù)40 40 40 EPO mRNA 3.86±1.17a 4.09±1.76a 0.84±0.14

        表3 3組骨髓血漿中EPO、EPOR蛋白水平表達(dá)比較()Table 3 Comparison of the expression of EPO and EPOR protein levels in bone marrow plasma among three groups()

        表3 3組骨髓血漿中EPO、EPOR蛋白水平表達(dá)比較()Table 3 Comparison of the expression of EPO and EPOR protein levels in bone marrow plasma among three groups()

        注:與對照組比較,aP<0.05

        EPOR蛋白水平表達(dá)2.35±0.92a 3.35±1.08a 0.44±0.05組別ALL組AML組對照組例數(shù)40 40 40 EPO蛋白水平表達(dá)1.46±0.25a 1.42±0.26a 0.72±0.18

        3 討論

        本研究結(jié)果顯示,急性白血病患者EPO、EPOR 均呈高表達(dá),與焦楨等[4]研究結(jié)果一致。白血病患者骨髓中的白血病細(xì)胞增殖現(xiàn)象較顯著,機(jī)體處于持續(xù)缺氧狀態(tài),導(dǎo)致EPO、EPOR分泌出現(xiàn)異常增加;同時,EPO/EPOR參與的JAK/STAT信號通路被激活,導(dǎo)致白血病細(xì)胞出現(xiàn)無線增值,而有關(guān)其具體的作用機(jī)制還應(yīng)深入探討[5-6]。相關(guān)研究結(jié)果顯示,在前列腺癌、膀胱移行癌、卵巢癌等腫瘤患者也存在EPO、EPOR高表達(dá);同時,與分級、預(yù)后、危險度密切相關(guān),患者惡性程度越嚴(yán)重,表示患者局部缺氧現(xiàn)象越明顯,EPO分泌也越顯著[7-8]。以上結(jié)果表明,通過檢測EPO、EPOR 表達(dá)可對急性白血病患者的預(yù)后進(jìn)行判斷。

        本研究結(jié)果顯示,與對照組比較,ALL 組、AML 組骨髓血漿中的EPO表達(dá)明顯升高(P<0.05);ALL組、AML組骨髓血漿中的EPOR 表達(dá)明顯降低(P<0.05)。急性白血病患者EPOR信號通路中的JAK/STAT 途徑表現(xiàn)為持續(xù)活化狀態(tài),導(dǎo)致大量的EPOR轉(zhuǎn)入到細(xì)胞內(nèi),參與到基因調(diào)控中,進(jìn)而減少血漿中的表達(dá)量,然而該論點(diǎn)還應(yīng)通過深入研究進(jìn)一步論證[9-10]。

        綜上所述,急性白血病患者的EPO、EPOR呈高表達(dá),可根據(jù)EPO、EPOR表達(dá)量對患者預(yù)后進(jìn)行判斷。

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